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文檔簡介
1、本研究以卡特蘭品種Brassolaeliocattleya Sung Ya Green‘Green World’為試材,觀測和記錄研究了卡特蘭的生長發(fā)育規(guī)律以及北方溫室溫度和濕度的周年變化,研究了各年生器官中營養(yǎng)物質(zhì)的周年變化,以及不同葉齡葉片相對于不同光強的葉綠素熒光特性。采用石蠟切片法觀察了卡特蘭花芽的形態(tài)發(fā)生和結(jié)構發(fā)育過程。在此基礎上,在花芽分化期進行3種不同的溫度處理,探討了相應時期內(nèi)的營養(yǎng)以及新葉中內(nèi)源激素的動態(tài)變化;對處于不
2、同花芽分化階段的卡特蘭進行不同的溫度處理,研究了溫度對開花性狀和質(zhì)量的影響;在花芽分化期噴灑和注射不同濃度的GA3、NAA、ABA等激素,探討了激素對開花性狀和質(zhì)量的影響。最后對卡特蘭花朵衰老過程中的某些生理生化變化進行了研究,并且構建了卡特蘭 ACO基因的反義表達載體 pBI121ACC,為進一步應用反義技術培養(yǎng)花期長的卡特蘭新品種奠定了基礎。通過以上研究,得出以下主要研究結(jié)果:
通過研究各年生器官中營養(yǎng)物質(zhì)變化發(fā)現(xiàn),卡特蘭
3、當年形成的假鱗莖儲存較少的淀粉,營養(yǎng)物質(zhì)主要以可溶性糖的成分存在,其它各年生假鱗莖和葉片中,營養(yǎng)物質(zhì)以淀粉形態(tài)儲存,花芽分化和開花消耗大量營養(yǎng)。在休眠期營養(yǎng)儲存少,在新芽初生期各假鱗莖營養(yǎng)儲存較多,所以卡特蘭的換盆和分株繁殖宜在新芽初生期進行。
對不同葉齡葉片的熒光特性研究表明,隨著光照強度的增加和葉齡的增長,PSⅡ電子傳遞量子產(chǎn)率(Yield)、光化學淬滅(qP)、有效光化學量子產(chǎn)量(Fv'/Fm')表現(xiàn)為逐漸降低,非光化學
4、猝滅(qN)逐漸升高。新葉雖然在低光強下有著較高的qP、Yield、Fv'/Fm',但當光強高于740μmol·m-2s-1時,光抑制現(xiàn)象嚴重,表觀電子傳遞速率(ETR)降低,表明新葉對強光的適應能力較差,因此在栽培中,新葉生長期光照強度不宜超過740μmol·m-2s-1。一年生葉片ETR最高,光能利用效率最高,但光強超過1250μmol·m-2s-1時同樣會導致光抑制,二、三年生葉片 ETR相近,四年生 ETR最低,光能利用率最低,
5、最易受到光抑制。
在北方溫室溫度條件下,卡特蘭花芽分化從7月初花序原基分化開始,至9月下旬合蕊柱及花粉塊形成歷時約3個月。其過程可分為6個時期:未分化期、花序原基分化期、小花原基分化期、萼片原基分化期、花瓣原基分化期、合蕊柱及花粉塊分化期。其中,小花原基分化期、合蕊柱及花粉塊分化期歷時長,分化較慢,其它時期歷時短,分化較快。自萼片原基分化期開始,新生植株生長已基本停止。
6月下旬,在卡特蘭花芽未分化期開始不同的溫度處
6、理表明,25/20℃處理能顯著的促進花芽分化,30/25℃處理花芽能正常分化,35/30℃處理抑制花芽分化;25/20℃和30/25℃處理條件下,葉面積增長速率差異不顯著,在處理24 d時,25/20℃處理條件下花鞘增長速率快于30/25℃處理。35/30℃處理條件下,葉面積和花鞘增長速率明顯落后于其它兩個處理。在不同溫度處理的開始時,隨處理溫度的升高,可溶性糖在新葉和新假鱗莖中下降幅度增大,在老葉和老假鱗莖中下降幅度變小,淀粉在各個器
7、官中下降幅度也變小。處理18 d時,35/30℃處理條件下,新葉中可溶性糖含量明顯高于其它兩個處理,假鱗莖中可溶性糖含量則低于其它兩個處理。在30/25℃處理條件下,可溶性糖和淀粉在各個器官中變化趨勢基本一致。在25/20℃處理條件下,新葉的可溶性糖含量與其它各器官變化趨勢相反。
25/20℃、30/25℃處理條件下,新生葉片中GA3、ZR、ABA含量增加,IAA含量減少。35/30℃處理抑制新生葉片中GA3、ZR、ABA含量
8、,促進IAA含量,而較低的GA3、ZR、ABA含量和較高水平的IAA含量不利于花芽分化;35/30℃處理使GA3/IAA、GA3/ZR的比值處于一個較為穩(wěn)定的狀態(tài),而這種狀態(tài)不利于花芽分化。保持較低的IAA/ZR與IAA/ABA水平,有利于花芽分化的繼續(xù)進行。
在6月下旬,卡特蘭花芽未分化期開始25/20℃處理能夠顯著地促進開花,使盛花期提前56 d,但開花率低,開花以單花為主。在8月中旬萼片分化期開始25/20℃處理也能夠顯
9、著地促進開花,使盛花期提前14 d,開花以雙花為主,并且花朵顯著增大?;ㄑ课捶只陂_始35/30℃的高溫處理能夠抑制開花,萼片分化期開始35/30℃的高溫處理能夠延遲開花,花期延遲14 d。兩次30/25℃處理與對照無差異?;ɡ倨魄势谶M行10/6℃的低溫處理能夠延遲開花,使盛花期推遲36 d,在元旦開放。
在花芽分化過程中噴施300 mg·kg-1和600 mg·kg-1的GA3能夠使花柄和花葶的長度顯著增加,使盛花期分別提前
10、9.33 d和8.67 d,兩個處理之間差異不顯著。噴施不同濃度的NAA對卡特蘭開花性狀沒有影響,當噴施NAA的濃度為200 mg·kg-1時使花期推遲6.67 d。注射GA3的濃度為60 mg·kg-1和120 mg·kg-1時,能夠使盛花期顯著提前13.34 d和22.34 d,使萼片、花瓣、花柄和花葶的長度顯著增加;9月9日花鞘注射10 mg·kg-1的NAA能夠使花期提前,能夠使花朵顯著增大。噴施和注射ABA對卡特蘭的花期沒有影
11、響,注射ABA濃度為40 mg·kg-1時,開花率下降,花朵縮小。所以,在栽培中推薦使用注射的方法進行花期調(diào)控,不僅用量小,而且效果顯著,注射60 mg·kg-1的GA3或10 mg·kg-1的NAA不僅能夠使花期提前,而且使花朵增大,可以作為花期調(diào)控的重要手段。
卡特蘭花衰老過程中花瓣的可溶性蛋白質(zhì)含量逐漸下降,細胞質(zhì)膜透性、丙二醛(MDA)、超氧陰離子(O2·-)產(chǎn)生量隨花瓣的衰老逐漸增加,超氧物歧化酶(SOD)和過氧化物
12、酶(POD)活性逐漸降低。內(nèi)源ZRs含量降低,內(nèi)源IAA、ABA含量上升,乙烯釋放量呈躍變型變化,GA3含量變化不明顯。
以花瓣為試材,首先提取總 RNA,并根據(jù)其它蘭花的ACC氧化酶基因保守序列設計一對特異性引物,然后通過RT-PCR法克隆得到1條967 bp的卡特蘭ACO cDNA片斷,共編碼321個氨基酸殘基。序列分析結(jié)果顯示該克隆片斷與已發(fā)表的其它蘭花的ACO基因序列同源性均在85%以上,尤其與卡特蘭原生種和其近親屬的
13、同源性均在95%以上。將克隆的卡特蘭ACO片段反向連接到植物表達載體pBI121中CaMV35S啟動子的下游,構建了卡特蘭ACO基因的反義表達載體pBI121ACC。
本研究論文首次明確了卡特蘭在北方溫室環(huán)境條件下的生長發(fā)育規(guī)律、需肥規(guī)律、需光特性,首次明確了卡特蘭花芽分化的規(guī)律和時期,為制定合理的栽培和管理措施提供了一定依據(jù);通過研究不同溫度處理對卡特蘭花芽分化、營養(yǎng)物質(zhì)、內(nèi)源激素的影響,首次揭示了溫度對營養(yǎng)物質(zhì)、內(nèi)源激素的
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