莪術(shù)油及其組分對慢粒白血病細(xì)胞作用及機(jī)制的研究.pdf

1、慢性粒細(xì)胞性白血病(chronic myelocytic leukemia,CML)占務(wù)類白血病的20﹪,發(fā)病年齡分布較廣,預(yù)后不良,嚴(yán)重危害人類生命健康.其發(fā)生與染色體易位有密切的關(guān)系.染色體t(9;22)易位形成的bcr/abl融合基因表達(dá)產(chǎn)物為P<'210>蛋白,具有酪氨酸激酶活性,能夠激活多條信號傳導(dǎo)通路使細(xì)胞增殖過度,而分化和調(diào)亡受抑制,導(dǎo)致CML發(fā)生、發(fā)展和惡化.bcr/abl融合基因與腫瘤細(xì)胞復(fù)發(fā)、急變及對常規(guī)化療藥物耐藥

2、性密切相關(guān).消除融合基因bcr/abl是治療CML,消除其耐藥和復(fù)發(fā)的關(guān)鍵,而尋找高效低毒的新型靶向藥物是CML治療的重要課題之一.莪術(shù)揮發(fā)油是中藥莪術(shù)的提取物,莪術(shù)醇和β-欖香烯雖具有抗腫瘤作用,但易導(dǎo)致患者出現(xiàn)惡心、食欲不振、發(fā)熱、靜脈炎、劇烈疼痛等不良反應(yīng),限制了其進(jìn)一步的應(yīng)用.以往研究表明,莪術(shù)醇對宮頸癌等腫瘤有較好的療效,進(jìn)一步研究其是否有抗腫瘤作用及作用機(jī)制有重要意義,并可能為腫瘤的治療找到一種高效安全的新藥.該研究以人慢性

3、粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株K562、小鼠淋巴細(xì)胞白血病L1210細(xì)胞株為對象,研究了莪術(shù)醇、β-欖香烯及莪術(shù)油對腫瘤的作用及其機(jī)制.以MTT法測定莪術(shù)醇等對K562、L1210細(xì)胞的增殖抑制作用,并求得細(xì)胞生長曲線.用形態(tài)學(xué)、激光共聚焦及細(xì)胞內(nèi)酶測定等方法測定莪術(shù)醇等誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡、分化情況;用RT-PCR測定對K562細(xì)胞bcl-2 mRNA、bax mRNA及bcr/abl mRNA表達(dá)量的變化,同時測定莪術(shù)各組分對K562細(xì)胞微核影

4、響.結(jié)論:1、成功從莪術(shù)揮發(fā)油中提取莪術(shù)醇,并用脂質(zhì)體包裹;2、莪術(shù)油及其組分在體外對白血病細(xì)胞具有明顯的增殖抑制作用,并呈時間、濃度依賴性;3、莪術(shù)油及其組分對K562細(xì)胞具有明確的凋亡誘導(dǎo)作用,其機(jī)制可能與bcl-2及bax途徑相關(guān);4、莪術(shù)醇能夠降低bcr/abl融合基因的表達(dá),減少K562細(xì)胞的微核率,誘導(dǎo)562細(xì)胞凋亡并促進(jìn)分化.鑒于bcr/abl是細(xì)胞染色體斷裂易位所致,易位中伴有的染色體損傷可以使微核增加.莪術(shù)醇能減少微核