核轉錄因子（NF）-κB誘捕物對SKOV3細胞NF-κB活性和成瘤性的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、復旦大學碩士學位論文核轉錄因子（NF）κB誘捕物對SKOV3細胞NFκB活性和成瘤性的影響姓名：陸建萍申請學位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學指導教師：孫紅20030401InfluenceofTranscriptionFactorKBDecoyTransfectiononNFKBActivityandTumorigenicityinNudeMiceofSKOV3CellLineAbstract[Objectives]Toinvestigate

2、whetherNF—KBdecoyoligodeoxynuleotides(ODNs)changestheSKOV3cellline’SNF—KBactivityVEGF／uPA／ICAM一1expressionandtumorigenicityinnudemiceinordertoevaluateNFKBasapotentialtargetforovariancancer【Methods]1Thetransfectionefficie

3、ncytoSKOV3cellsoftheNF—KBdecoyODN——cationicliposome—protaminecomplex(1uM)withdifferentchargeratioweremeasuredbyflowcytometry(FCMlandfluorescencemeter2ThedirecteffectofNF—KBdecoyODNstransfecfion011thegrowthofSKOV3cellsinv

4、itrowasmeasuredbyMTTmethod3AftertransfectedwitllNFKBdecoyODNstheSKOV3cellswerestimulatedbyIL1且andculturedfor6，12，24，48hTheNF—KBDNAbindingactivitywasmeasuredbygelmobilityshiftassayandthemRNAlevelofICAM一1／uPA／VEGFwasmeasur

5、edbyRTPCRandVEGFlevelinsupematantwasmeasuredbyELISAkit4ThefemalenudemicewereimplantedbySKOV3cellstransfectedbyNF—KBdecoy0DNsorScrambledODNSandt11eirtumorgrowthandsurvivalwereobserved[Results]1TheefficiencyofLPD(positive／

6、negativechargeratio=4)transfectiontoSKOV3cellsWas9641％，significantlyhigherthanthatofnakedDNAtransfectionwhichwasonly1286％fP0001)and10％novelbovinescrine(NBS)didn’taffecttheefficiency2ThegrowthofSKOV3cellswasnotaffectedby4

7、8hincubationafterNF—KBdecoyODNorscrambledODNtransfectioninvitro3SKOV3cellsexpressedconstitutiveNF—KBDNAbindingactivityandtheactivationofIL—lBresultedinasignificantincreaseofitsactivityTheNF—KBdecoyODNtransfectionsignific

8、antlydecreasedconstitutivelevel(onlyat6hs)andactivatedlevelbyIL一1Binvi仃o4TheactivatedmRNAlevelofuPA、VEGF、ICAM一1andtheVEGFlevelinthesupematantWassignificantlyinhibitedbyNFKBdecoyODNtransfectionespeciallyat6hraftertransfec

9、tioninvitro5Themeansurvivaldatewasprolongedfrom3838days(controlgroup)，3650days(scrambledODNtransfectiongroup)to6188daysfNFKBdecoyODNtransfectiongroup)althoughthetumorigenicityratewasnotdownregulated[Conclusions]1LPDmetho

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