阿托伐他汀抑制無(wú)血清和缺氧條件下對(duì)比劑誘導(dǎo)的人腎小管上皮細(xì)胞凋亡.pdf

1、目的:探討阿托伐他汀在無(wú)血清和缺氧條件下對(duì)比劑誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞凋亡中的作用及機(jī)制。
　　方法:培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞（HKC）在無(wú)血清和缺氧條件下分別與不同濃度（10、20、40、80、120、150mgI/ml）的碘海醇（非離子型低滲對(duì)比劑）共孵育2h；碘海醇（120mgI/ml）無(wú)血清和缺氧條件下干預(yù)HKC細(xì)胞0、1、2、4、8、12h。不同濃度阿托伐他?。?0-8、10-7、10-6、10-5mol/L）先與HKC細(xì)胞共

2、孵育12h后，碘海醇（120mgI/ml）無(wú)血清和缺氧條件下刺激2h和12h。CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖；流式AnnexinV-FITC/PI雙染檢測(cè)細(xì)胞凋亡；熒光顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS水平；Western-Blot檢測(cè)Bax、Bcl-2蛋白。
　　結(jié)果:在無(wú)血清和缺氧條件下碘海醇呈一定的濃度和時(shí)間依賴(lài)性誘導(dǎo)HKC細(xì)胞活性下降和凋亡。與正常情況下碘海醇干預(yù)細(xì)胞相比，無(wú)血清缺氧培養(yǎng)加重碘海醇對(duì)細(xì)胞的損傷，表現(xiàn)為細(xì)胞活性受到抑制增強(qiáng)（0

3、.474±0.060VS0.312±0.076，P<0.05，n=3），凋亡明顯增加（9.53％±1.19%VS18.83%±1.36%，P<0.05，n=3），細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生增多，Bax蛋白上調(diào)增加（1.276±0.058VS1.468±0.076，P<0.05，n=4），Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)增加（0.117±0.022VS0.067±0.009，P<0.05，n=4）。阿托伐他汀在10-8~10-6mol/L范圍內(nèi)呈濃度依賴(lài)性抑

4、制無(wú)血清和缺氧條件下碘海醇誘導(dǎo)的HKC細(xì)胞活性下降、凋亡、細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生、Bax蛋白表達(dá)上調(diào)及Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)。細(xì)胞內(nèi)ROS水平與Bax蛋白表達(dá)呈正相關(guān)，與Bcl-2蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論:無(wú)血清和缺氧條件下碘海醇呈濃度和時(shí)間依賴(lài)性誘導(dǎo)HKC細(xì)胞活性下降、凋亡，此作用與細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激及Bax蛋白表達(dá)上調(diào)、Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)相關(guān)。阿托伐他汀在10-8~10-6mol/L范圍內(nèi)呈濃度依賴(lài)性抑制無(wú)血清和缺氧條件下碘海