IGF-Ⅰ和bFGF對(duì)大鼠髕腱損傷愈合影響的試驗(yàn)研究及其動(dòng)物模型的建立.pdf

1、目的:(1)建立大鼠體內(nèi)髕腱損傷模型.(2)觀察類胰島素生長(zhǎng)因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)對(duì)大白鼠髕腱損傷愈合早期的影響.(3)探討聯(lián)合應(yīng)用類胰島素生長(zhǎng)因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)大白鼠髕腱損傷愈合早期是否有協(xié)同作用.(4)觀察類胰島素生長(zhǎng)因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)對(duì)大白鼠髕腱損傷后期的影響.(5)觀察聯(lián)合應(yīng)用類胰島素生長(zhǎng)因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)大白鼠髕腱損傷愈合后期是否有協(xié)同作用

2、.方法:(1)健康雄性Wistar大鼠,年齡8周,體重250-300g,按4.5mg/kg腹腔注射3﹪(w/v)的戊巴比妥溶液麻醉.手術(shù)刀切開皮膚和髕腱鞘暴露髕腱,在髕腱中部制成2×4~6mm的窗口型缺損,作為大鼠體外髕腱損傷愈合模型.(2)第一部分:80只雄性Wistar大鼠,隨機(jī)分為4組,每組20只,術(shù)后3天分別以0,10,50,500ng的劑量局部注射IGF-Ⅰ.手術(shù)后7天處死大鼠.第二部分:80只雄性Wistar大鼠,隨機(jī)分為4

3、組,每組20只,手術(shù)后3d,第一組注射100ul注射用水,第二組注射50ng溶于100ul注射用水的IGF-Ⅰ,第三組注射50ng溶于100ul注射用水的bFGF,第四組注射溶于100ul注射用水的50ngbFGF+50ngIGF-Ⅰ,術(shù)后7天處死大鼠.第三部分:80只雄性Wistar大鼠,隨機(jī)分為4組,每組20只,各組在手術(shù)后3d,10d,17d,分別以0,10,50,500ng的劑量局部注射IGF-Ⅰ3次,術(shù)后4周處死大鼠.第四部分

4、:80只雄性Wistar大鼠,隨機(jī)分為4組,每組20只,各組分別在手術(shù)后3d,10d,17d,第一組注射100ul注射用水,第二組注射50ng溶于100ul注射用水的IGF-Ⅰ,第三組注射50ng溶于100ul注射用水的bFGF,第四組注射溶于100ul注射用水的50ng bFGF+50ng IGF-Ⅰ,術(shù)后4周處死大鼠.(3)動(dòng)物處死后,顯微鏡下直接觀察損傷髕腱的愈合情況,每組10個(gè)大鼠髕腱甲醛固定,石蠟包埋,進(jìn)行增生細(xì)胞核抗原(PC

5、NA),Ⅲ型膠原表達(dá)的免疫組化染色分析;另10個(gè)大鼠髕腱行生物力學(xué)和吡啉啶含量的檢測(cè).結(jié)論:(1)大鼠髕腱損傷模型可作為研究各種生長(zhǎng)因子對(duì)肌腱損傷后愈合影響的實(shí)驗(yàn)研究模型.(2)第一部分:局部應(yīng)用IGF-Ⅰ促進(jìn)了髕腱愈合初始階段的細(xì)胞增生和Ⅲ型膠原表達(dá),但對(duì)早期階段的生物力學(xué)沒有明顯的影響.第二部分:聯(lián)合應(yīng)用胰島素生長(zhǎng)因子-1(IGF-Ⅰ)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)大白鼠髕腱損傷早期的細(xì)胞增生和Ⅲ型膠原表達(dá)有協(xié)同作用;而對(duì)生

6、物力學(xué)無明顯的影響.第三部分:IGF-Ⅰ對(duì)大鼠髕腱損傷愈合后期的細(xì)胞增生和Ⅲ型膠原表達(dá)無明顯的影響,但I(xiàn)GF-Ⅰ對(duì)大鼠髕腱損傷愈合后期的細(xì)胞增生和Ⅲ型膠原表達(dá)無明顯的影響,但I(xiàn)GF-Ⅰ可以影響其愈合后期的生物力學(xué),并且與IGF-Ⅰ的劑量呈明顯的量效關(guān)系.第四部分:聯(lián)合應(yīng)用胰島素生長(zhǎng)因子-1(IGF-Ⅰ)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)增加大白鼠髕腱損傷后期的生物力學(xué)有協(xié)同作用;但對(duì)其細(xì)胞增生和Ⅲ型膠原表達(dá)無明顯影響.(3)該研究表