E-cadherin通過激活MEK-ERK信號通路促進卵巢癌細胞SKOV-3增殖.pdf

1、研究背景：
　　 鈣粘素(Cadherin)是細胞黏附分子中的一個家族，它們是親同性的細胞黏附分子，其作用依賴于Ca2+的存在。目前鑒定出的Cadherin有30多種，分布于不同的組織中，常見的有上皮鈣粘素（E-cadherin）、神經(jīng)鈣粘素（N-cadherin）、胚胎鈣粘素(P-cadherin)等。E-cadherin是鈣粘素家族中的重要一員，是分子量為120KD的跨膜蛋白，由位于16號染色體長臂22.1區(qū)的CDH1基因編

2、碼。E-cadherin不僅可以通過胞外區(qū)域幫助建立鈣依賴性的同型細胞間的黏附，還可以通過胞內(nèi)短尾與連接素結(jié)合連接到細胞骨架肌動蛋白絲建立細胞內(nèi)外的聯(lián)系，進而在細胞內(nèi)外發(fā)揮重要作用。
　　 由于E-cadherin可以加強細胞間的黏附、抑制上皮細胞向間質(zhì)細胞轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal-transition，EMT)進而抑制腫瘤細胞的侵襲及轉(zhuǎn)移，所以它在肺癌、胃癌、喉癌、胰腺癌和膀胱癌等多種惡性腫瘤中通常被

3、認為是一個腫瘤抑制基因。然而，近年來越來越多的研究結(jié)果開始挑戰(zhàn)這一觀點。例如有人報道E-cadherin是細胞不貼壁生長所必需的，并且抑制口腔鱗癌細胞的凋亡。E-cadherin-連接素細胞黏附復(fù)合體表達被發(fā)現(xiàn)在頭頸部鱗狀細胞癌及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中起到重要作用。值得一提的是，E-cadherin在卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展中可能發(fā)揮特異性作用的現(xiàn)象日益受到學(xué)者們的重視?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，正常的人類卵巢上皮細胞不表達E-cadherin，而卵巢裂隙、包涵膿腫

4、及內(nèi)陷處的上皮細胞卻高表達E-cadherin，而90％的卵巢上皮癌發(fā)生在這些部位。在轉(zhuǎn)移性卵巢癌的各個時期都發(fā)現(xiàn)E-cadherin的表達，并且表達水平明顯高于正常卵巢組織。這些結(jié)果提示E-cadherin的表達水平在卵巢上皮癌的早期發(fā)生階段上調(diào)并可能發(fā)生促進細胞癌變的作用，這與E-cadherin的傳統(tǒng)腫瘤抑制基因的角色大相徑庭。然而，E-cadherin在晚期卵巢癌的發(fā)展中發(fā)揮何種作用，其機制如何均不明確，有待于展開研究來探索。<

5、br>　　 研究目的：
　　 盡管E-cadherin因其可以抑制腫瘤轉(zhuǎn)移而被認為是一個經(jīng)典的抑癌基因，其在卵巢癌中卻呈獨特的高表達狀態(tài)。本研究探討E-cadherin促進卵巢癌細胞增殖的可能作用及其機制。
　　 研究方法：
　　 在表達E-cadherin的卵巢癌細胞系SKOV-3中利用RNA干擾（RNAi）技術(shù)阻斷E-cadherin的編碼基因CDH1，然后通過CCK-8和克隆形成實驗來觀察SKOV-3細胞

6、生物學(xué)行為的相應(yīng)變化。然后，應(yīng)用已建立的研究E-cadherin介導(dǎo)的鈣依賴性細胞黏附的細胞模型，通過Westernblot研究E-cadherin在卵巢癌中的可能作用及相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。
　　 研究結(jié)果：
　　 1.轉(zhuǎn)染針對CDH1的siRNA質(zhì)粒后，卵巢癌細胞株SKOV-3E-cadherin的表達明顯下調(diào)。
　　 2.阻斷E-cadherin的表達后SKOV-3細胞株的生長和增殖明顯被抑制。