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文檔簡(jiǎn)介
1、研究過(guò)氧化物酶6(Peroxiredoxin-6,Prdx6)對(duì)小鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面愈合修復(fù)作用的影響,并對(duì)Prdx6對(duì)小鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面愈合修復(fù)作用機(jī)制進(jìn)行初步探究。
昆明種小鼠90只,雌雄各半,建立小鼠深Ⅱ度燙傷模型,隨機(jī)分為模型組(外涂PBS),實(shí)驗(yàn)組(外涂Prdx6),陽(yáng)性對(duì)照組(外涂外用重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子,rh-bFGF),每組30只,每日給藥四次,連續(xù)給藥21 d。肉眼觀察記錄各組實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚創(chuàng)面愈合狀況,
2、包括:創(chuàng)面組織紅腫程度,創(chuàng)面顏色變化,炎性滲出程度,毛發(fā)生成時(shí)間,結(jié)痂面積等,并對(duì)各組小鼠皮膚形態(tài)學(xué)變化進(jìn)行拍照統(tǒng)計(jì)。觀察記錄小鼠皮膚創(chuàng)面愈合時(shí)間,采用干濕法計(jì)算創(chuàng)面組織含水量,運(yùn)用描記稱(chēng)重法計(jì)算創(chuàng)面愈合率。分別于燙傷后5 d,10 d,14 d,取創(chuàng)面組織,Bouin氏液進(jìn)行固定,按照常規(guī)方法石蠟包埋、石蠟切片、進(jìn)行蘇木精-伊紅(H-E)染色,光鏡下觀察創(chuàng)面病理學(xué)改變;分別于燙傷后5 d,10d,取模型組(PBS),實(shí)驗(yàn)組(Prdx6
3、)小鼠皮膚進(jìn)行組織勻漿,對(duì)創(chuàng)面組織丙二醛(malondialdehyde,MDA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量進(jìn)行測(cè)定;采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)燙傷皮膚組織腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素1-β(IL-1β)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、白細(xì)胞介素10(IL-10)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、F
4、as、FasL、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的mRNA表達(dá)水平;采用蛋白質(zhì)免疫印跡法(western blot)檢測(cè)燙傷皮膚組織中JNK、p-JNK、p38、p-p38蛋白含量表達(dá)變化。
1. Prdx6對(duì)創(chuàng)面愈合時(shí)間的影響:與模型組相比,Prdx6組小鼠創(chuàng)面愈合時(shí)間較短,且愈合過(guò)程中,炎性滲出較少,皮膚顏色較為紅潤(rùn),無(wú)皮膚壞死現(xiàn)象。Prdx6組小鼠皮膚結(jié)痂面積小,新生皮膚
5、顏色與原始皮膚更為相近。
2. Prdx6對(duì)創(chuàng)面愈合率的影響:實(shí)驗(yàn)第5 d,10 d,14 d,Prdx6組小鼠皮膚創(chuàng)面愈合率均大于模型組,且存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。
3. Prdx6對(duì)組織含水量的影響:實(shí)驗(yàn)第5d,Prdx6組小鼠皮膚創(chuàng)面組織含水量小于模型組,且存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。
4. H-E觀察發(fā)現(xiàn),與模型組相比,Prdx6組小鼠皮膚皮膚組織水腫較輕,表
6、皮增生較快,新生肉芽組織形成較快,且新生表皮較厚。
5.燙傷后,皮膚組織MDA含量迅速升高,SOD含量迅速降低,實(shí)驗(yàn)第5、14d,Prdx6組皮膚組織中MDA含量較低,SOD含量較高,且與模型組存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。
6.實(shí)驗(yàn)第5、14d,Prdx6組TNF-α、IL-1β、VEGF含量較模型組低,且存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01);實(shí)驗(yàn)第14d,IL-6的mRNA表達(dá)量與模型組相
7、比較低,且存在顯著性差異(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)第5d,IL-10 mRNA表達(dá)量與模型組相比較高,且存在顯著性差異(P<0.01)。
7.實(shí)驗(yàn)第5、14d,Prdx6組的caspase-3、caspase-9、Fas mRNA表達(dá)量與模型組相比較低,且存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。實(shí)驗(yàn)第5d,F(xiàn)asL的mRNA表達(dá)量與模型組相比較低,且存在顯著性差異(P<0.01)。
8.實(shí)驗(yàn)第5d,Prdx6組的p
8、-p38、p38、p-p38/p38蛋白表達(dá)量與模型組比較均明顯降低,且存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。實(shí)驗(yàn)第5、14d,p-JNK、JNK、p-JNK/JNK蛋白表達(dá)量與模型組比較均明顯降低,且存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。
Prdx6在小鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面愈合修復(fù)過(guò)程中可縮短創(chuàng)面愈合時(shí)間,提高創(chuàng)面愈合率,降低炎癥反應(yīng),縮小結(jié)痂面積,對(duì)燙傷皮膚創(chuàng)面愈合具有很好的修復(fù)作用。其作用機(jī)制可能與降低皮膚損
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