EP對(duì)腎小球系膜細(xì)胞MMP-9、ColⅣ表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察丙酮酸乙酯（EP）對(duì)大鼠腎小球系膜細(xì)胞株(HBZY-1)MMP-9、ColⅣ表達(dá)的影響，并探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng)HBZY-1，以不同濃度葡萄糖及不同時(shí)間作用HBZY-1，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）方法檢測(cè)MMP-9、ColⅣ mRNA表達(dá)；加入不同濃度EP、PDTC（NF-κB特異性抑制劑）及作用不同時(shí)間干預(yù)，RT-PCR和免疫印跡法（western blotting）方法分別檢測(cè)MMP-9、Co

2、lⅣ mRNA和蛋白表達(dá)；細(xì)胞免疫熒光方法檢測(cè)NF-κB p65蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）隨著干預(yù)葡萄糖濃度增加及作用時(shí)間延長(zhǎng)，MMP-9 mRNA的表達(dá)下調(diào)（P<0.05），ColⅣ mRNA的表達(dá)上調(diào)（P<0.05），作用呈量效、時(shí)效關(guān)系。（2）加入不同濃度的EP、PDTC干預(yù)體外高糖培養(yǎng)HBZY-124h，MMP-9 mRNA和蛋白的表達(dá)逐漸增加（P<0.05），ColⅣ mRNA和蛋白的表達(dá)逐漸下降（P<0.05），EP

3、5mmol/L與10mmol/L MMP-9、ColⅣ表達(dá)相近，提示5mmol/L EP可能為其最佳作用濃度。(3)5mmol/L EP作用體外高糖培養(yǎng) HBZY-1不同時(shí)間（12-48h），隨著作用時(shí)間延長(zhǎng)，MMP-9 mRNA和蛋白的表達(dá)上調(diào)（P<0.05），ColⅣ mRNA和蛋白的表達(dá)下調(diào)（P<0.05），作用呈時(shí)效關(guān)系。（5）高糖作用下NF-κB熒光信號(hào)從胞漿轉(zhuǎn)移到胞核，EP、PDTC阻斷了NF-κB信號(hào)的核轉(zhuǎn)位。