聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1依賴(lài)的細(xì)胞死亡機(jī)制在腸缺血再灌注損傷中作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)依賴(lài)的細(xì)胞死亡機(jī)制在大鼠腸缺血再灌注損傷中的作用。 方法：選取雄性Sprague-Dawley大鼠33只，隨機(jī)分配到以下5組：假手術(shù)組(Sham，n=5)：腸缺血再灌注組(n=7/group)，I/R1組(腸缺血時(shí)間為15 min)，Drug1組(腸缺血時(shí)間為15 min，術(shù)前給3-aminobenzamide，30mg/kg)，I/R2組(腸缺血時(shí)間為30 min)，Drug

2、2組(腸缺血時(shí)間為30 min，術(shù)前給3-aminobenzamide，30 mg/kg)。動(dòng)物麻醉成功后，通過(guò)阻斷腹腔干和腸系膜上動(dòng)脈后恢復(fù)血運(yùn)，制作鼠腸缺血再灌注模型。按不同分組要求缺血時(shí)間分別為15 min和30 min，再灌注2小時(shí)后，處死動(dòng)物取材，分別作HE染色、聚腺苷二磷酸核糖(PAR)的免疫組化染色，用TUNEL方法檢測(cè)組織細(xì)胞凋亡情況，用Western Blot檢測(cè)凋亡早期信號(hào)聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)片

3、段p85和凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)的表達(dá)情況。所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(means±SD)表示，組間比較采用One-Way ANOVA和Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn)，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，采用SPSS 10.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：I/R1組腸損傷程度、PAR陽(yáng)性表達(dá)率、細(xì)胞凋亡率和凋亡早期信號(hào)PARP-1p85片段、AIF表達(dá)程度均較Sham組顯著增高(P<0.05)；I/R2組腸損傷程度、PAR陽(yáng)性表達(dá)率均較

4、Sham組和I/R1組顯著增高(P<0.05)。應(yīng)用PARP-1抑制劑3-AB后，Drug1組腸損傷程度、PAR表達(dá)陽(yáng)性率、細(xì)胞凋亡率和凋亡早期信號(hào)PARP-1 p85片段、AIF表達(dá)程度均較I/R1組顯著降低(P<0.05)。Drug2組腸損傷程度、PAR表達(dá)陽(yáng)性率均較I/R2組顯著降低(P<0.05)。結(jié)論：(1)腸I/R會(huì)導(dǎo)致PARP-1激活程度明顯增加，通過(guò)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死兩種死亡方式來(lái)介導(dǎo)組織損傷，PARP-1激活程度與這兩