雨蛙素誘導胰腺炎模型的探索及脂肪因子預測持續(xù)性器官衰竭的臨床初步研究.pdf

1、胰腺炎的研究模型眾多，其中雨蛙素腹腔注射法由于易于誘導、非侵襲性操作、重復性好，并且其胰腺的組織病理學表現(xiàn)接近于人體的急性胰腺炎特征而被廣泛應用。研究中經常需要嚴重程度不同的胰腺炎模型，但至今尚無一個呈遞進式變化的胰腺炎模型，因此有必要對雨蛙素誘導胰腺炎模型進行深入探索，本研究擬通過不同劑量的雨蛙素刺激來觀察胰腺炎嚴重程度的變化。
　　除了常見的炎癥物質如IL-6、IL-8、IL-10、CRP等參與到不同嚴重程度胰腺炎的發(fā)生進展當

2、中，近些年來，脂肪因子作為一種調節(jié)炎癥反應的物質與胰腺炎的發(fā)病密切相關。但是目前尚無有關多種脂肪因子和胰腺炎嚴重程度的臨床研究，本研究擬探索脂肪因子變化與胰腺炎嚴重程度的關系，并將這些變化與APACHE-II評分進行比較，研究脂肪因子預測持續(xù)性器官衰竭的特異性和敏感性，為臨床應用奠定基礎。
　　研究一小鼠胰腺炎模型的探索和改進
　　目的:
　　建立同一病因所致的輕癥和重癥胰腺炎。
　　方法:
　　采用兩種方

3、法建立雨蛙素誘導的小鼠胰腺炎模型。1.雨蛙素濃度相同而注射次數(shù)不同建立胰腺炎模型，采用C57小鼠以雨蛙素50ug/kg分別間斷腹腔注射3、6、9、12次誘導；2.通過不同的雨蛙素濃度統(tǒng)一注射12次誘導，以雨蛙素10ug/kg、50ug/kg、250ug/kg三個濃度統(tǒng)一間斷腹腔注射12次來誘導，觀察血清淀粉酶和脂肪酶、胰腺干濕重、胰腺組織HE染色及組織病理學評分、肺臟組織HE染色。
　　結果:
　　常規(guī)雨蛙素劑量（50ug/

4、kg）分別腹腔注射3、6、9、12次時，實驗組血清淀粉酶明顯高于對照組（P<0.05），并在9次時達到高峰（25966.67±3787.02 U/L）；胰腺干濕重在實驗組中顯著高于對照組（P<0.05），在注射6次時達到峰值（81.13±1.03％）；胰腺組織HE染色光學顯微鏡下顯示注射3次時胰腺局部僅有些許水腫和少量炎細胞浸潤，6次時可見大量中性粒細胞浸潤，明顯的水腫，9次時胰腺小葉邊緣出現(xiàn)少量的壞死灶，12次可見到大范圍的腺泡壞死灶

5、（胰腺組織病理評分8.20±0.84），鏡下表現(xiàn)出壞死性胰腺炎改變。雨蛙素腹腔注射次數(shù)相同（12次），分別以10ug/kg，50ug/kg，250ug/kg濃度處理各組小鼠，50ug/kg組其血清淀粉酶和脂肪酶、胰腺干濕重均達到最高值，顯著高于對照組（P<0.05），而胰腺組織HE染色鏡下顯示10ug/kg組以局部的炎細胞浸潤和輕度的水腫為主，50ug/kg已前述，250ug/kg組主要出現(xiàn)片狀的胰腺腺泡壞死，部分小葉結構缺失。

6、　　結論:
　　在一定范圍內隨著雨蛙素劑量的增加，胰腺炎的嚴重程度是逐漸增加的。在C57小鼠體內，常規(guī)雨蛙素劑量（50 ug/kg）間斷腹腔注射6次可誘發(fā)出急性水腫型胰腺炎，而12次可誘發(fā)出壞死性胰腺炎改變。
　　研究二脂肪因子預測胰腺炎持續(xù)性器官衰竭的臨床初步研究
　　目的:
　　本課題擬觀察胰腺炎患者發(fā)病早期血清脂肪因子變化與胰腺炎嚴重程度的關系，研究脂肪因子預測持續(xù)性器官衰竭的特異性和敏感性，為臨床應用奠定

7、基礎。
　　方法:
　　從前期注冊的一個前瞻性隊列研究中提取符合標準的90名連續(xù)胰腺炎患者，血清脂聯(lián)素、抵抗素和瘦素的測定分別采用MILLIPLEX? MAP和ELISA方法檢測，并且比較不同嚴重程度患者間三個脂肪因子的含量變化。比較各組APACHE-II評分和脂肪因子對持續(xù)性器官衰竭的預測價值。
　　結果:
　　抵抗素在胰腺炎合并持續(xù)性器官衰竭患者中顯著增加，與不合并者相比差異具有統(tǒng)計學意義，在超重和非超重AP

8、亞組中結果與上述類似。瘦素和脂聯(lián)素在胰腺炎合并持續(xù)性器官衰竭各亞組中都有所增加，但差異沒有統(tǒng)計學意義。
　　抵抗素與APACHE-II評分對胰腺炎患者合并持續(xù)性器官衰竭的預測能力接近（AUC分別是0.72、0.75，p=0.66）；在超重與非超重各AP亞組中，抵抗素均顯示出同樣的準確性，在超重人群中曲線下面積是（0.69 vs0.66，p=0.82），在非超重人群中曲線下面積是（0.76 vs0.87，p=0.39）。此外，瘦素與