水稻T-DNA插入突變體的鑒定與一個(gè)遲抽穗突變體的初步研究.pdf

1、水稻是世界上主要的糧食作物。水稻在禾谷類(lèi)作物中基因組最小，且易于體外操作與分化等優(yōu)點(diǎn)，因此被確定為禾谷類(lèi)作物功能基因組學(xué)研究的模式植物。隨著水稻基因組測(cè)序工作的完成，以功能基因組學(xué)研究為代表的后基因組時(shí)代已經(jīng)到來(lái)，豐富的信息資源將為水稻功能基因的發(fā)掘創(chuàng)造十分有利的條件。用插入突變建立突變體庫(kù)，是水稻功能基因組學(xué)研究的基本方法。 本研究通過(guò)對(duì)水稻中花11的T-DNA插入突變?nèi)后w的鑒定和分析，為水稻功能基因組研究提供材料和技術(shù)平臺(tái)。

2、主要研究結(jié)果如下： 1在本實(shí)驗(yàn)室已建立的水稻T-DNA插入標(biāo)簽系的基礎(chǔ)上，對(duì)其中部分T1代株系進(jìn)行了田間調(diào)查和初步篩選，獲得多個(gè)具有突變表型的突變體株系，其突變表型包括抽穗期變異、株高變矮、寡分蘗，葉片卷曲，穎花開(kāi)裂、粒型等類(lèi)型。 2對(duì)部分經(jīng)過(guò)T0及T1代水稻轉(zhuǎn)化植株的突變表型鑒定和除草劑Basta抗性篩選，且經(jīng)過(guò)分子生物學(xué)驗(yàn)證，獲得了一些與T-DNA共分離的突變體；并建立起一套適合水稻，高效簡(jiǎn)潔的擴(kuò)增T-DNA側(cè)翼序列

3、的TAIL-PCR方法體系。 3從T-DNA插入突變體庫(kù)中篩選到一個(gè)是單拷貝的且與T-DNA共分離的遲抽穗突變體M29，并經(jīng)過(guò)TAIL-PCR法分離和序列測(cè)定得到未知的水稻側(cè)翼序列，通過(guò)國(guó)際水稻基因組核酸數(shù)據(jù)庫(kù)在線分析，得到了插入位點(diǎn)序列的相關(guān)信息，包括在染色體上的位置及可能編碼的蛋白。 4.在TIGR基因組研究中心的水稻核苷酸數(shù)據(jù)庫(kù)中分析預(yù)測(cè)了突變體M29被插入基因lh(暫命名)，并通過(guò)長(zhǎng)距離PCR法獲得該基因片段，大