分子標(biāo)記在水稻抗性育種及雜交稻種子純度和真?zhèn)舞b定中的應(yīng)用.pdf

1、水稻是全世界最重要的糧食作物之一。白葉枯病和褐飛虱是水稻的兩種主要的病蟲(chóng)害，利用品種抗性是防治水稻白葉枯病和褐飛虱最經(jīng)濟(jì)而有效的措施。 為了選育多抗水稻新品種，本研究以高抗白葉枯病抗源CBB23和高抗褐飛虱品系B5為供體親本，以雜交稻恢復(fù)系揚(yáng)稻6號(hào)和1826為受體親本，通過(guò)雜交和復(fù)交聚合抗白葉枯病基因Xa23和抗褐飛虱基因Bph14和Bph15，在各分離世代分別利用EST標(biāo)記C189選擇Xa23基因、利用SSR標(biāo)記MRG2329

2、和MS5選擇Bph14和Bph15基因。通過(guò)苗期分子標(biāo)記選擇，成株期農(nóng)藝性狀選擇，最后獲得一系列Bph14、Bph15單基因和Bph14+Bph15雙基因純合且聚合有Xa23基因的水稻品系。從獲得的品系中，選擇其中的18份重點(diǎn)材料，對(duì)其白葉枯病和褐飛虱的抗性分別進(jìn)行了鑒定。鑒定結(jié)果表明，育成的品系抗性明顯增強(qiáng)，所有品系對(duì)白葉枯病都表現(xiàn)為抗；對(duì)褐飛虱的抗性，除2份Bph14基因純合的品系表現(xiàn)為中感外，其它都為中抗以上。 本研究結(jié)果

3、表明，PCR標(biāo)記C189和MRG2329、MS5完全可應(yīng)用于水稻抗白葉枯病和抗褐飛虱育種實(shí)踐中，并實(shí)現(xiàn)這兩種抗性基因的分子聚合。 雜交水稻的推廣應(yīng)用為水稻增產(chǎn)作出了巨大的貢獻(xiàn)，但近年來(lái)由于生物學(xué)混雜、機(jī)械混雜和人為利用相似的種子以桃代李等，嚴(yán)重影響了雜交稻的種子質(zhì)量。目前雜交稻的種子純度和真?zhèn)舞b定通常是在播種前到海南進(jìn)行田間種植鑒定，隨著分子生物學(xué)和生物技術(shù)的發(fā)展，人們開(kāi)始研究和應(yīng)用DNA分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行雜交稻種子純度和真?zhèn)舞b定

4、，以克服海南田間種植鑒定周期長(zhǎng)、異地鑒定費(fèi)用高等缺點(diǎn)。目前，利用分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)雜交稻種子進(jìn)行純度和真?zhèn)舞b定，所用的標(biāo)記主要是RAPD標(biāo)記和SSR標(biāo)記，而SSR標(biāo)記技術(shù)與RAPD技術(shù)相比，具有穩(wěn)定性強(qiáng)和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。 為探討利用SSR標(biāo)記技術(shù)鑒定雜交稻種子純度和真?zhèn)蔚臏?zhǔn)確性，本研究利用SSR標(biāo)記技術(shù)，從100對(duì)SSR引物中篩選到5對(duì)能在兩優(yōu)932的雙親間表現(xiàn)多態(tài)性的引物，然后在兩優(yōu)932的6種不同類型串粉混雜材料中進(jìn)一步篩選特異

5、引物。用篩選到的特異引物RM302對(duì)兩優(yōu)932種子進(jìn)行純度鑒定，在200粒供試種子中，鑒定出種子的純度為90.50％，與海南田間種植鑒定結(jié)果90.60％和武漢田間種植鑒定結(jié)果91.57％基本一致。 另外，利用SSR標(biāo)記技術(shù)，從100對(duì)SSR引物中篩選到5對(duì)能在鄂粳雜1號(hào)的雙親間表現(xiàn)多態(tài)性的引物，用篩選到的引物RM206和RM340對(duì)湖北省某縣種子管理站查封的“鄂粳雜1號(hào)”種子進(jìn)行真?zhèn)舞b定，結(jié)果表明，兩對(duì)引物在待鑒定樣品A、B中均