長期服用赤丸方水煎液對大鼠腎臟功能和腎臟組織形態(tài)學的慢性影響.pdf

1、目的:本實驗是以《金匱要略·腹?jié)M寒疝宿食病脈證第十》中的赤丸方為基礎、參考現(xiàn)代藥理研究結論、結合導師臨床體會、從動物實驗入手,觀察、研究赤丸方中的藥物,在經(jīng)過60min的煎煮減毒處理后,是否仍會對Wister大鼠的腎臟產(chǎn)生慢性毒性以及其慢性毒性的程度;采集可靠的實驗依據(jù)、提供可靠的實驗結果,為臨床選方用藥提供參考,并為進一步揭示其腎臟毒性機制、避免其腎臟毒性反應打下基礎。
　　方法:清潔級純系Wister大鼠80只,體重200±1

2、0克,雌雄各半,分別用隨機區(qū)組法分為4組(空白對照組、高劑量組、中劑量組、低劑量組),每組20只,雌雄各半;給各組大鼠稱量體重并對體重值做統(tǒng)計學處理,在統(tǒng)計學結果顯示各組大鼠體重的差值無統(tǒng)計學意義后,將各組大鼠按各自組別適應性喂養(yǎng)一周;適應性喂養(yǎng)結束后再次稱量大鼠體重、計算各組大鼠一周的體重變化值,并分別作統(tǒng)計學處理;在統(tǒng)計結果仍無顯著性差異的情況下,用剪尾采血法剪尾,采集各組大鼠的血液送檢其血液一般情況。于第二周開始,依據(jù)給藥標準、根

3、據(jù)大鼠體重、按照赤丸方中各藥的比例稱取各藥物;以水為溶劑、按照重浸提法的要求提取所稱量藥物的成份,用700W的額定功率對浸漬液進行60min的煮沸減毒處理[事先測定該加熱功率下60min的蒸發(fā)量,準確控制溶劑容量以保證加熱60min后所得溶液的濃度恰為200％(2g生藥/ml)];用煎煮所得的湯劑,按照等濃度不等容積的方法,以擬臨床用量60、30、10倍的藥量,分別給高、中、低劑量組大鼠按相應劑量灌胃給藥并觀察其灌胃后反應(空白組用涼開

4、水);每天定時灌胃1次,每周連續(xù)灌胃6次、測量體重1次、并隨體重變化調整給藥量,持續(xù)灌胃3個月;在末次灌胃結束24h后再次測量各組大鼠體重變化,用剪尾采血法采集各大鼠的血液標本送檢其血液學一般情況;用心臟采血法,采集各組半數(shù)大鼠的血液標本送檢其與腎功能相關的生化指標;剖取大鼠腎臟組織、制作組織標本,在光鏡下觀察其腎臟組織形態(tài)學的改變。各組剩余大鼠繼續(xù)喂養(yǎng)3周,為觀察其可逆性情況和可能存在的遲發(fā)性毒性反應做準備;對各標本的相關指標值進行統(tǒng)

5、計分析。
　　結果:1.實驗藥物對各組大鼠體重增長所造成的影響有統(tǒng)計學意義:與空白組組相比:高劑量組體重表現(xiàn)出顯著性差異(P<0.01);與高劑量組體重變化相比:各組體重均有統(tǒng)計學意義(P<0.01,P<0.05,P<0.01);與中劑量組體重相比:高劑量組體重有統(tǒng)計學意義(P<0.05);與低劑量體重相比:高劑量組體重有統(tǒng)計學意義(P<0.01);2.實驗藥物對各組大鼠的血紅蛋白含量所造成的影響無統(tǒng)計學意義(P>0.05);3.

6、實驗藥物對各組大鼠的紅細胞數(shù)值所造成的影響無統(tǒng)計學意義(P>0.05);4.實驗藥物對各組大鼠的腎功能所造成的影響為:1)對尿素氮排泄的影響無統(tǒng)計學意義(P>0.05);2)對肌酐排泄的影響無統(tǒng)計學意義(P>0.05);3)對尿酸排泄的影響無統(tǒng)計學意義(P>0.05);4.對各組大鼠腎臟的組織形態(tài)學未造成異常影響;5.不存在遲發(fā)性的腎臟毒性反應。
　　結論:將赤丸方中各味藥物的水浸漬液進行60min的煎煮減毒處理后所制成的濃度為2