缺血后處理對離體大鼠心肌線粒體的保護作用.pdf

1、目的： 觀察心肌缺血后處理對大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的作用。著重探討心肌缺血后處理對大鼠離體心肌線粒體的作用，從缺血后處理對心肌線粒體Ca2+的轉運包括Ca2+攝取，調節(jié)線粒體通透性轉換孔（mPTP）開放，呼吸鏈即線粒體內膜上一組酶的復合體活性及心肌釋放的乳酸脫氫酶（LDH）活性、心肌梗死面積的影響。 方法： 取16只大鼠隨機分為2組，依照Langendorff離體心臟模型對其進行逆行灌注，灌注數(shù)秒后心臟開始搏

2、動，用Krebs-Henseleit液平衡灌注10 min，心臟搏動達到穩(wěn)定狀態(tài)。對照組：全心缺30 min，用K-H液再灌注3 h；后處理組：全心缺血30 min后，再灌注30 s，缺血30 s，反復3次，然后持續(xù)再灌注3 h。采用紫外分光光度法測定心肌釋放的LDH活性。用TTC染色法測定心肌梗死面積。利用差速離心的方法提取心肌細胞線粒體，應用福林酚法測定線粒體蛋白濃度。借助分光光度計觀察心肌線粒體Ca2+的轉運包括Ca2+攝取及線粒

3、體通透性轉換孔（mPTP）開放。利用試劑盒檢測呼吸鏈即線粒體內膜上一組酶的復合體活性。 結果： 1.心肌缺血后處理對大鼠心肌釋放的LDH活性和心肌梗死面積的影響后處理組心肌釋放的LDH活性顯著低于對照組（P<0.01）；與對照組相比，后處理組心肌梗死面積縮小（P<0.01）。 2.缺血對線粒體通透性轉換孔（mPTP）開放的調節(jié) 對照組Cyt C釋放速度與最大釋放量均明顯高于后處理組（P<0.01），表明心

4、肌缺血后處理延遲了mPTP開放。 3.缺血后處理對呼吸鏈即線粒體內膜上一組酶的復合體活性的影響后處理組線粒體復合體活性明顯高于對照組（P<0.01）。 4.缺血后處理對心肌線粒體鈣離子的轉運Ca2+攝取的影響 后處理組心肌線粒體Ca2+最大攝取量低于對照組（P<0.01）。 結論： 1.缺血后處理能夠縮小心肌梗死面積；減少缺血再灌注損傷心肌細胞LDH的釋放，對缺血再灌注損傷心肌具有保護作用。

5、 2.缺血后處理能夠抑制Ca2+誘發(fā)的mPTP開放，減少線粒體Cyt C釋放，從而減少細胞凋亡，起到保護缺血再灌注損傷心肌的作用。 3.缺血后處理能夠增強呼吸鏈即線粒體內膜上一組酶的復合體活性，從而保護線粒體產生ATP，為細胞的一切活動提供能量。 4.缺血后處理能夠明顯減少線粒體鈣離子的攝取，減輕線粒體鈣超載。避免了由于線粒體鈣超載而導致mPTP呈高通透狀態(tài)廣泛持久開放，線粒體腫脹破壞，細胞能量耗竭的現(xiàn)象，最終起到保護