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文檔簡介
1、目的: 通過體外實驗研究NF-κB信號通路在幽門螺桿菌引起慢性胃炎的機制中所起的作用,以及評價特異性調(diào)節(jié)NF-κB活性對于減輕幽門螺桿菌引起的慢性炎癥反應(yīng)的作用,為將來的動物及臨床實驗奠定基礎(chǔ),為阻斷慢性炎癥向胃癌發(fā)展這一進程提供依據(jù),從而為最終解決由幽門螺桿菌所引起的慢性胃炎等疾病提供有效的方案。 方法: 分別培養(yǎng)幽門螺桿菌11637標準菌株以及人胃粘膜上皮細胞(GES-1),將GES-1細胞分為3組:空白組、
2、GES-1+Hp組及GES-1+Hp+NF-κ抑制劑組,每組各做10例,在后兩組中按細胞與細菌為1:50的量加入Hp11637菌株,共培養(yǎng)24小時后,提取上清液用ELISA法檢測IL-8、TNF-a的含量,裂解細胞,用Western Blot法檢測NF-κB的表達含量。以空白組為對照分別比較Hp及NF-κB抑制劑對于=NF-κB信號通路的影響作用。 結(jié)果: 1、成功培養(yǎng)Hp11637標準菌株及GES-1細胞。 2
3、、在GES-1細胞中加入Hp菌株后共培養(yǎng)24小時后提取上清液再次進行Hp培養(yǎng),Hp培養(yǎng)成功。 3、在GES-1細胞中按比例加入定量的Hp菌株,共培養(yǎng)24小時后檢測上清液中的IL-8、TNF-a含量,較空白組明顯升高(p<0.05),裂解細胞后檢測裂解液中的NF-κB表達量較空白組升高(p<0.05)。 4、在GES-1細胞中加入定量的Hp菌株以及特異性NF-κB信號通路抑制劑,共培養(yǎng)24小時后檢測上清液中的IL-8、TN
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