診斷超聲對(duì)人早孕絨毛DNA損傷作用.pdf

1、背景： 超聲是婦產(chǎn)科領(lǐng)域常用的診斷工具之一，已廣泛應(yīng)用于早早孕的診斷及胚胎、胎兒的發(fā)育監(jiān)測(cè)和畸形篩查。灰階成像技術(shù)的進(jìn)步使超聲能清晰的監(jiān)測(cè)卵泡、胚胎及胎兒的發(fā)育；體外胚胎移植卵泡針吸穿刺術(shù)需要在超聲直視下進(jìn)行；陰道超聲能更好的觀察胚胎及胎兒的結(jié)構(gòu)，而不受腹部皮膚、脂肪和肌肉組織的干擾；脈沖多普勒技術(shù)(PD)、彩色血流成像技術(shù)(CDFI)有效提高了早孕診斷的準(zhǔn)確率；三維、四維超聲能觀察到常規(guī)二維超聲探察不到的切面．這些超聲新技術(shù)的

2、應(yīng)用自然伴隨著超聲輸出功率的增加，達(dá)到一定水平后對(duì)生物組織會(huì)產(chǎn)生明顯的效應(yīng)．與傳統(tǒng)的B型和M型技術(shù)相比，多普勒成像及測(cè)量技術(shù)輸出功率更高，而脈沖多普勒技術(shù)則是其中輸出功率最高的．目前一個(gè)爭(zhēng)論的焦點(diǎn)就是無(wú)妊娠并發(fā)癥的婦女在孕早期運(yùn)用脈沖多普勒檢查到底是利大于弊還是弊大于利．歐洲超聲醫(yī)學(xué)和生物學(xué)聯(lián)盟(EFSUMB)對(duì)孕早期進(jìn)行陰道超聲檢查的結(jié)論和建議是：由于缺乏長(zhǎng)期的、大樣本的、重復(fù)性的調(diào)查研究，孕早期進(jìn)行陰道超聲檢查的安全問(wèn)題值得關(guān)注，必

3、須從純醫(yī)學(xué)的角度認(rèn)為對(duì)胚胎和／或孕母有利才予以陰道超聲檢查．即使臨床認(rèn)為有必要對(duì)胎兒行脈沖或彩色多普勒檢查，也要把輸出參數(shù)設(shè)為盡可能低． 超聲波引起的生物學(xué)效應(yīng)主要是熱效應(yīng)和空化效應(yīng)，診斷超聲引起的溫度升高不超過(guò)生理體溫1.5℃臨床上可忽略熱效應(yīng)的損傷，超過(guò)4℃持續(xù)5分鐘則具有潛在危險(xiǎn)性。近年來(lái)，隨著超聲新技術(shù)的應(yīng)用，超聲設(shè)備的輸出聲強(qiáng)大幅度增加，超聲產(chǎn)科應(yīng)用的安全性問(wèn)題受到了研究者極大的關(guān)注．胚胎發(fā)育是細(xì)胞分化組織誘導(dǎo)形態(tài)發(fā)生

4、和胚體整和等一系列生命現(xiàn)象組成的程序性表達(dá)過(guò)程，可分為胚前期(受精～14d)、器官形成期(15～56d)、胎兒期(57d～分娩)．孕早孕(尤其是器官形成期)胚胎對(duì)外界因素非常敏感，這個(gè)階段胚胎的改變不僅可能引起宮內(nèi)生長(zhǎng)異常，胎兒死亡等，最重要的可能是引起出生后遲發(fā)性疾病發(fā)生的根源，且隨著胎兒生長(zhǎng)，胎兒骨化越明顯，產(chǎn)生熱效應(yīng)的可能增加．這些年來(lái)國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者對(duì)此做了相關(guān)性研究，但是對(duì)超聲應(yīng)用的安全性問(wèn)題仍有許多尚待解決(1)既往研究都是以

5、動(dòng)物試驗(yàn)和離體試驗(yàn)為主，也有部分是流行病學(xué)調(diào)查，而并非直接以人體胚胎作為研究對(duì)象；(2)從形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)方面研究診斷超聲對(duì)胚胎組織的影響，是目前主要手段和方法，分子生物學(xué)水平的研究很少(3)超聲輸出劑量、試驗(yàn)條件和試驗(yàn)方法的不一致導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果的多樣性，甚至得出相反的結(jié)論．本研究擬采用人體早孕絨毛組織作為研究對(duì)象，以細(xì)胞核內(nèi)γH2AX含量作為檢測(cè)DNA損傷的敏感指標(biāo)，評(píng)價(jià)一定劑量的超聲輻射對(duì)人體器官形成期胚胎的DNA損傷作用，并進(jìn)一步評(píng)

6、價(jià)損傷的可修復(fù)性． 材料與方法： 對(duì)擬進(jìn)行人工流產(chǎn)的90例早孕(42～56天)婦女隨機(jī)分為5組：I組(20例，對(duì)照組)、Ⅱ組(20例，5分鐘組)、Ⅲ組(20例，10分鐘組)、Ⅳ組(20例，20分鐘組)，V組(10例，20分鐘，輻射48小時(shí)后行人工流產(chǎn)術(shù))．應(yīng)用Acuson Aspen彩色多普勒超聲儀(Ispta=13mW／cm2,Isppa=52 mW／cm2)對(duì)孕囊進(jìn)行不同時(shí)間的定點(diǎn)照射，前四組輻射后1小時(shí)內(nèi)取材，第五

7、組輻射后48小時(shí)取材．用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)上述各組絨毛細(xì)胞γH2AX蛋白表達(dá)情況． 結(jié)果： 各實(shí)驗(yàn)組的絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞γH2AX表達(dá)率均升高，各組表達(dá)率分別為(16.42±2.87)％ (16.63±3.74)％， (23.66±5.28)％， (40.26±9.43)％， (17.31±6.07)％。對(duì)照組(Ⅰ組)與輻射5分鐘組(Ⅱ組)間無(wú)顯著差異(P>O．05)；對(duì)照組與輻射10分鐘組(Ⅲ組)、輻射20分鐘組(Ⅳ組)

8、間有顯著差異(P<0.01)；輻射20分鐘組與修復(fù)組(Ⅴ組)間有顯著差異(P<0.01)；修復(fù)組與對(duì)照組間無(wú)顯著差異(P>0.05)． 結(jié)論： 1.以γH2AX作為標(biāo)記物，診斷超聲可引起人早孕絨毛DNA損傷 2.診斷超聲輻射5分鐘不會(huì)引起人早孕絨毛DNA損傷 3.診斷超聲引起的DNA損傷具有時(shí)間依賴(lài)性 4.診斷超聲引起的DNA損傷至少可以部分被修復(fù) 5.診斷超聲引起的DNA損傷48小時(shí)后可