益氣養(yǎng)陰?kù)铕龇剿帉?duì)IPF大鼠氧自由基水平的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：本研究通過(guò)檢測(cè)博萊霉素(BLM)致特發(fā)性肺纖維化(IPF)大鼠模型血液及肺組織中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)等指標(biāo)的變化，運(yùn)用HE、MASSON染色以及SP免疫組織化學(xué)染色等技術(shù)手段，研究IPF時(shí)氧化損傷的特點(diǎn)以及肺組織病理形態(tài)學(xué)改變和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(indtlciblenitric oxidesynthase，iNOS)的表達(dá)特征，并以益氣養(yǎng)陰?kù)铕鲋兴庍M(jìn)行干預(yù)，研究氣陰

2、兩虛、脈絡(luò)瘀阻與IPF發(fā)病的相關(guān)性，探討益氣養(yǎng)陰?kù)铕龇▽?duì)IPF的作用機(jī)理，為臨床治療提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：將120只Sprague Dawley(SD)大鼠(雌雄各半)置于實(shí)驗(yàn)環(huán)境中適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為5組(每組24只)：①正常對(duì)照組(對(duì)照組，control group)；②IPF模型組(模型組，model group)；③益氣養(yǎng)陰?kù)铕龇降蛣┝拷M(低劑量組，low-dose．group)；④益氣養(yǎng)陰?kù)铕龇礁邉┝拷M

3、(高劑量組，high-dose group)；⑤強(qiáng)的松組(prednisone group)。 根據(jù)文獻(xiàn)方法，造模各組大鼠氣管內(nèi)滴注博萊霉素A，(BLMA5，5mg/kg，溶于0.2 ml無(wú)熱源生理鹽水)，復(fù)制IPF模型；對(duì)照組氣管內(nèi)滴注等量無(wú)熱源生理鹽水。手術(shù)后第2天始，給對(duì)照組與模型組大鼠灌服生理鹽水(10ml/kg)；給低劑量組和高劑量組大鼠灌服中藥水煎劑(12.3g/kg、24.6g/kg，相當(dāng)于臨床成人用藥量的7倍和1

4、4倍)；給強(qiáng)的松組大鼠灌服強(qiáng)的松混懸液(6mg/kg)。各組動(dòng)物于造模后第7d、14d、28d分3批斷頭處死。取血漿，并分離血清，取肺組織制成10％組織勻漿，5000r/min離心15 min，取上清液，-20℃凍存待檢。在肺門(mén)處結(jié)扎取右肺1 cm×1 cm×1 cm大小組織，用4％多聚甲醛固定、包埋、切片(5 μm)，行HE、MASSON及iNOS免疫組化染色，光學(xué)顯微鏡下觀察肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)以及iNOS的表達(dá)情況。檢測(cè)血液和肺組織中M

5、DA、SOD、ET-1以及NO等指標(biāo)變化。 結(jié)論： 1、IPF時(shí)機(jī)體MDA含量增加，SOD活力降低，表明機(jī)體氧化一抗氧化失衡是其發(fā)病的重要機(jī)制，自由基直接參與了IPF的形成過(guò)程。益氣養(yǎng)陰?kù)铕龇剿幠苡行Ы档蚆DA含量，增加SOD活力，從而影響IPF的形成過(guò)程。 2、IPF時(shí)大量產(chǎn)生的NO造成血管通透性增大，其結(jié)果加重了氣道的炎癥反應(yīng)和組織損傷；而ET-1作為前纖維化因子在IPF狀態(tài)下的過(guò)量增加，加劇了組織損傷程度。益