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文檔簡介
1、目的:探討miR-122對乙型肝炎病毒HBsAg、HBeAg表達的影響。方法:以空白對照組(陰性對照組),GFP(反義寡核苷酸序列)組為陰性對照,設計合成2條miR-122的反義寡核苷酸序列anti-miR-122,LNA-antimiR-122(反義鎖核苷酸)以及人miR-122的寡核苷酸序列(hsa-miR-122)。脂質體包裹后分別以400nm/L(GFP組),400nm/L(anti-miR-122組),40nm/L(LNA-a
2、ntimiR-122組),400nm/L(hsa-miR-122)轉染HepG2.2.15細胞。細胞轉染24小時,48小時后取培養(yǎng)液上清,時間分辨熒光免疫法檢測HBsAg,HBeAg的表達。轉染48小時后,提取總RNA,Taqman技術實時熒光定量PCR檢測anti-miR-122組,LNA-antimiR-122組,hsa-miR-122組,GFP組,和陰性對照組內細胞miR-122的含量。結果:①轉染24小時后HBsAg表達:hsa
3、-miR-122組HBsAg表達低于陰性對照組(p<0.05),has-miR122組HBsAg表達低于anti-miR-122組(p<0.01),anti-miR122組HBsAg表達高于GFP組(p<0.01)。②轉染24小時后HBeAg表達:anti-miR122組HBeAg表達高于陰性對照組(p<0.01),LNA-antimiR-122組HBeAg表達顯著高于陰性對照組(p<0.01),hsa-miR-122組HBeAg表達低
4、于anti-miR122組(p<0.01),GFP組HBeAg表達低于anti-miR122組(p<0.01)。③轉染48小時后HBsAg表達:GFP組相對于陰性對照組,HBsAg表達兩者沒有差異,(p=1.000),anti-miR-122組HBsAg表達高于陰性對照組(p<0.05),hsa-miR-122組HBsAg表達低于anti-miR122組(p<0.01),hsa-miR-122組HBsAg表達低于LNA-antimiR-
5、122組(p<0.05),anti-miR122組HBsAg表達高于GFP組(p<0.05)。④轉染48小時后HBeAg表達:LNA-antimiR-122組HBeAg表達高于陰性對照組的表達(p<0.05),hsa-miR-122組HBeAg表達低于LNA-antimiR-122組(p<0.05),GFP組HBeAg表達低于LNA-antimiR-122組(p<0.05)。⑤實驗組各組細胞內miR-122的表達:LNA-anti-mi
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