惡性黑色素瘤細胞凋亡相關基因和蛋白表達譜.pdf

1、四川大學博士學位論文惡性黑色素瘤細胞凋亡相關基因和蛋白表達譜姓名：王玉芳申請學位級別：博士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：王樹人20040501惡性黑色素瘤細胞凋亡相關基因蛋白質(zhì)表達譜四川大學博士生學位論文響并采用WesternBlot檢測caspases及凋亡相關蛋白在惡性黑色素瘤細胞株中的表達情況。結(jié)果:從獲得的四株惡性黑色素瘤細胞凋亡相關基因表達譜來看:(1)Bcl2家族成員BaxMcl1BelXL、Bar和Nip3呈陽性信號(

2、2)凋亡抑制蛋白家族成員CIAPI和ApollonBruce表達陽性(3)癌基因MDM2以及細胞周期檢控點基因HUS1在惡性黑色素瘤細胞中表達呈陽性:(4)TNF受體家族HVEM1TNFR2p75和LTbR呈陽性表達(5)caspase14在惡性色素瘤細胞、組織和正常黑素細胞、皮內(nèi)痣中都有表達。而且MART1高表達的細胞株A375M14和SKMel1中表達水平高于MARTI低表達的細胞株A875和正常黑素細胞，在腫瘤組織中的表達高于皮內(nèi)

3、痣。以MARTI表達水平為標準，將惡性黑色素瘤細胞系分為MARTI高表達細胞系，包括A875M14SKMel1和MARTI低表達細胞系A875。通過測定不同抗癌藥物和Uv刺激對細胞增殖活力的影響，發(fā)現(xiàn)MART1低表達的細胞株對處理因素較MARTI高表達細胞株更加敏感。進一步通過WesternBlot方法檢測了caspase以及凋亡相關蛋白質(zhì)在兩大類惡性黑色素瘤細胞與人正常黑素細胞的表達。結(jié)果顯示:(1)MARTI高表達的細胞中凋亡抑制蛋

4、白質(zhì)MLIALBcl2在表達顯著高于MART1低表達的細胞，也高于正常黑素細胞(2)凋亡抑制蛋白質(zhì)cIAPIcIAP2和survivin的表達在MART1低表達的細胞中低于正常黑素細胞和MART1高表達的細胞，在正常黑素細胞和MARTI高表達的細胞無顯著差別:(3)促凋亡蛋白質(zhì)SMAC在惡性黑色素瘤細胞中表達較正常黑素細胞降低(4)在惡性黑色素瘤細胞與人正常黑素細胞均未檢測到caspase67810的表達而caspase39表達在MAR