慢性乙型肝炎濕熱中阻證和肝郁脾虛證患者HBV特異性CTL應答研究.pdf

1、背景和目的:慢性乙型肝炎(CHB)是嚴重危害人類健康的疾病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計全世界有3.5億人攜帶乙肝病毒，每年約100萬人因HBV感染而死亡。干擾素-α、核苷（酸）類似物雖能降低部分患者病毒含量，但干擾素-α有效率僅為25％-40％，且其不良反應嚴格限制了其使用范圍，而核苷（酸）類似物有需長期服藥、停藥后易復發(fā)、易產生耐藥性的缺點，更為重要的是，它們難以完全清除乙肝病毒，因此有必要積極探索治療慢性乙型肝炎的新方法?，F(xiàn)已普遍認為乙

2、肝病毒本身對肝臟沒有損傷作用，HBV感染后主要通過機體對病毒的免疫應答而導致肝細胞的損害。其中CD8+T細胞所介導的乙肝病毒特異性CTL應答反應起關鍵作用，是啟動肝細胞損傷和清除乙肝病毒的始動者。故探索以增強HBV特異性CTL應答的方法十分必要，進行此類研究首要的任務是確定能誘導強的HBV特異性CTL應答的抗原或具有廣泛免疫原性的特異性表位。中醫(yī)藥在慢性乙型肝炎治療上有獨特的優(yōu)勢，辨證論治是祖國傳統(tǒng)醫(yī)學的精髓，因此有必要探討HBV特異性

3、CTL應答與中醫(yī)證型之間關系，為慢性乙型肝炎中西醫(yī)結合治療提供理論依據(jù)。大量研究證實，機體免疫與慢性乙型肝炎中醫(yī)證型之間存在密切關系，免疫指標檢測為中醫(yī)證型斷定提供了客觀依據(jù)，但基于慢性乙型肝炎具體中醫(yī)證型與不同誘導劑特異性CTL應答之間關系尚未見系統(tǒng)報道。為此本研究通過HBcAg、HBsAg及混合肽段(HBcAg18-27、HBcAg60-68、HBsAg183-191)對慢性乙型肝炎患者特異性CTL應答的影響與其不同中醫(yī)證型之間的相

4、關性觀察，為選擇更加高效的誘導劑誘導HBV特異性CTL應答治療慢性乙型肝炎，以及指導中醫(yī)辨證分型提供客觀依據(jù)。
　　方法:收集據(jù)中醫(yī)辨證分型為濕熱中阻型和肝郁脾虛型的慢性乙型肝炎患者各30例，分別用重組HBcAg、HBsAg、混合肽段誘導CHB患者PBMC體外增殖。用酶聯(lián)免疫斑點(ELISPOT)法檢測抗原或肽段誘導后CD8+T細胞分泌IFN-γ數(shù)量反映CTL應答水平。
　　結果:HBcAg分別與HBsAg及混合肽段誘導慢乙