OPG-RANKL系統(tǒng)在大數鼓室硬化發(fā)病機制中的調控作用.pdf

1、南方醫(yī)科大學2 0 0 q 級碩士學位論文O P G ／R A N K L 系統(tǒng)在大鼠鼓室硬化發(fā)病機制中的調控作用T h er e g u l a t i v e e f f e c t o f O P G ／R A N K L s y s t e mo n t h ep a t h o g e n e s iS o f e x p e r i m e n t a I t y m p a n o s c 1e r o s iS inr

2、a t S課題來源：廣東省自然科學基金( 項目編號：1 0 1 5 1 0 0 8 0 0 4 0 0 0 0 0 5 )專 業(yè) 名 稱學位申請人指 導 教 師答辯委員會主席答辯委員會成員論文評閱人耳鼻咽喉一頭頸外科黃宏明吳佩娜鄭億慶教授文衛(wèi)平教授汪 建教授張思毅教授姜 捷教授2 0 1 2 年O 5 月1 5 日 廣州中文摘要鼓室硬化發(fā)病機制的作用。如能證實0 P G ／I 洲K L 系統(tǒng)在鼓室硬化的發(fā)病機制中起到決定性作用，那么通過

3、外部的拮抗性干預將有望阻止甚至逆轉鼓室硬化的病理過程，對鼓室硬化的防治具有重要的意義。目的：鼓室內注射肺炎鏈球菌建立S D 大鼠鼓室硬化模型，探討O P G ／R A N K L 系統(tǒng)在大鼠鼓室硬化發(fā)病機制中的調控作用。方法：本實驗分兩步進行，第一步建立大鼠鼓室硬化模型，第二步對大鼠鼓室硬化模型的聽泡標本進行蘇木精一伊紅( h e m a t o x y l i ne o s i n ，H E ) 染色和免疫組化染色。1 ．購買3 0

4、只健康的成年雄性S D 大鼠，隨機分為兩組，造模組2 0 只，對照組l O 只，肌注安定針和氯胺酮針進行全身麻醉。在造模組大鼠的右耳( 2 0耳) 鼓室內接種濃度為1 ×1 0 8 C F U ／m 1 的肺炎鏈球菌懸液進行鼓室硬化造模，對照組大鼠的右耳( 1 0 耳) 不干預作為空白對照。分別于造模后第l 周、2 周、4周、6 周、8 周在全身麻醉下用耳科顯微鏡下觀察并評估所有大鼠右耳的鼓膜充血程度、鼓室積膿程度和鼓室硬化程

5、度。2 ．于鼓室硬化造模后的第8 周，全麻下處死所有大鼠，收集造模組大鼠右耳中有鼓室硬化形成的聽泡標本作為鼓室硬化組和對照組大鼠右耳的正常聽泡標本作為正常組。以上聽泡標本用％4 多聚甲醛固定，然后用1 0 ％乙二胺四乙酸鈉( E D T A ) 溶液脫鈣，脫鈣充分后用石蠟包埋并做層厚為5 I lm 的切片。分別用H E 染色觀察鼓室粘膜的病理學改變和免疫組化染色檢測鼓室粘膜中的O P G 和R A N K L 蛋白表達水平。結果：1 ．