頑痹清丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及指紋圖譜研究.pdf

1、　　目的：本課題主要對(duì)頑痹清丸建立較完整、可行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系。采用薄層色譜法對(duì)絡(luò)石藤、土茯苓、黃芩、益母草、乳香、紫草、吳茱萸、牡丹皮進(jìn)行定性鑒別,構(gòu)建專屬性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好的薄層鑒別方法；對(duì)君藥忍冬藤、臣藥黃芩中的指標(biāo)性成分馬錢苷、黃芩苷進(jìn)行含量測(cè)定；對(duì)頑痹清丸進(jìn)行HPLC指紋圖譜研究,建立頑痹清丸的 HPLC指紋圖譜,以此對(duì)頑痹清丸的整體質(zhì)量?jī)?yōu)劣進(jìn)行評(píng)價(jià)；對(duì)頑痹清丸進(jìn)行一般質(zhì)量檢查,從而進(jìn)一步完善頑痹清丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),為臨床安全

2、有效用藥提供質(zhì)量控制依據(jù)。
　　方法：通過(guò)對(duì)頑痹清丸處方中忍冬藤、絡(luò)石藤、土茯苓、黃芩、益母草、乳香、川牛膝、吳茱萸、紫草、生地黃、牡丹皮以及薏苡仁進(jìn)行薄層色譜鑒別。了解各味藥材的主要化學(xué)成分和有效成分,著重考察提取方法、展開(kāi)系統(tǒng)、點(diǎn)樣體積、定位試劑和方法,記錄薄層色譜圖。由于TLC鑒別實(shí)驗(yàn)影響因素較多,需完成對(duì)環(huán)境條件、溫濕度、薄層板質(zhì)量、不同類型薄層板的使用、以及展開(kāi)前的預(yù)處理、預(yù)飽和時(shí)間、點(diǎn)樣情況、顯色顏色、清晰度、穩(wěn)定性

3、等諸多因素的綜合考慮和考察,從而構(gòu)建操作簡(jiǎn)便、專屬性強(qiáng)、重復(fù)性好的 TLC鑒別方法；對(duì)該方的君藥忍冬藤和臣藥黃芩進(jìn)行定量研究,以馬錢苷、黃芩苷為定量指標(biāo),采用HPLC法對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定；建立頑痹清丸的HPLC指紋圖譜,并對(duì)其相似度進(jìn)行分析,建立了頑痹清丸 HPLC指紋圖譜及其質(zhì)量評(píng)價(jià)方法；對(duì)頑痹清丸進(jìn)行一般質(zhì)量檢查,包括水分測(cè)定、裝量差異測(cè)定和溶散時(shí)限的測(cè)定,能夠科學(xué)全面的評(píng)價(jià)頑痹清丸的質(zhì)量。
　　結(jié)果：選取絡(luò)石藤、土茯苓、黃芩

4、、益母草、乳香、吳茱萸、紫草、牡丹皮8味藥的薄層色譜鑒別列入頑痹清丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),所選用的薄層鑒別方法專屬性強(qiáng)、簡(jiǎn)便、可行,可用于頑痹清丸的定性鑒別；參考2010版《中國(guó)藥典》,采用 HPLC 法對(duì)忍冬藤和黃芩進(jìn)行含量測(cè)定；馬錢苷的 HPLC 色譜條件為：Agilent C18柱(4.6mm ×250mm,5μm)；柱溫：30℃；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液( 12：88 )；流速：1.0mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：236nm；馬錢苷在

5、0.0134~0.0804mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,r=0.9998；平均加樣回收率為97.07%, RSD 為 1.24%。黃芩苷的 HPLC 色譜條件為：Agilent C18 柱( 4.6mm ×250mm,5μm)；柱溫：30℃；流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸溶液(47：53)；流速：1.0mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)為 280nm。黃芩苷在 0. 2776μg~ 2.776μg 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,r=0.9994；

6、平均加樣回收率為99.10%,RSD為1.29%；分別采集了 10 批頑痹清丸 HPLC 指紋圖譜,并進(jìn)行了方法學(xué)考察,通過(guò)對(duì)頑痹清丸 HPLC指紋圖譜的分析找出其特有指紋特征進(jìn)行分析,確認(rèn)了樣品有 20個(gè)共有峰；根據(jù) 2010年版《中國(guó)藥典》,對(duì)頑痹清丸進(jìn)行一般質(zhì)量檢查,包括水分測(cè)定、裝量差異、溶散時(shí)限的測(cè)定,頑痹清丸的水分、裝量差異、溶散時(shí)限均符合2010版藥典規(guī)定。
　　結(jié)論：本課題運(yùn)用薄層色譜法對(duì)頑痹清丸處方中絡(luò)石藤、土