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文檔簡介
1、 目的:觀察過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)對類風濕關節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)的動物模型—膠原誘導性關節(jié)炎(collagen-induced Arthritis,CIA)大鼠滑膜細胞的影響,探討RA臨床治療的新靶點。
方法:健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠皮內注射II型膠原以建立CIA大鼠模型,然后取其滑膜組織用膠原酶消化法進行原代培養(yǎng)及鑒定。取第3-4代的傳代細胞
2、進行后續(xù)試驗。MTT比色法檢測PPARγ激動劑羅格列酮對滑膜細胞增殖的影響,計算各濃度下細胞的抑制率,以確定羅格列酮最佳實驗濃度。流式細胞儀檢測PPARγ激動劑羅格列酮對滑膜細胞凋亡率和細胞生長周期的影響,Western-blot檢測不同時間作用下PPARγ激動劑羅格列酮對滑膜細胞PPARγ和核因子-κB(NF-κB)水平的影響, ELISA檢側不同時間作用下PPARγ激動劑羅格列酮對滑膜細胞上清液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細
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