不同類型牛GPR54基因啟動子變異與其表達水平的關聯(lián)性.pdf

1、本文旨在研究不同類型牛GPR54基因啟動子的變異對GPR54基因表達水平的影響，以揭示牛GPR54基因多態(tài)性與牛早熟性之間的關聯(lián)性。試驗提取荷斯坦牛(HT)、皖東牛(WD)及江淮水牛(JH)3種類型牛血液白細胞總RNA，通過PCR、測序、RT-PCR和雙熒光素酶報告基因的方法，檢測不同類型牛GPR54基因啟動子區(qū)973bp區(qū)域的多態(tài)性，啟動子效率以及GPR54基因的表達水平，分析啟動子變異在牛品種、年齡和性別間對GPR54基因表達的效應

2、。采用線性模型解析年齡和性別與GPR54基因表達的效應。結果表明：
　　1.根據(jù)比較基因組學原理，比較不同類型牛群內的多態(tài)性，皖東牛GPR54-973片段存在3個多態(tài)性位點，檢測出3種基因型CCCCTT、AATTCC和ACTCCT，分別位于-947bp、-816bp和-754bp，荷斯坦牛中僅發(fā)現(xiàn)1種基因型，即CCCCTT，而江淮水牛除對應位點的基因型為CCTTCC，其他位點還存在多個SNP位點，構成了WD、HT和JH的不同啟動子

3、型。
　　2.根據(jù)檢測出的啟動子型，對3種基因型和3種牛GPR54基因啟動子進行雙熒光素酶檢測，結果顯示CCT基因組合啟動效率是ATC組合的3倍，是ATC/CCT型的1.39倍（P<0.01）；3種牛啟動子的啟動效率存在著極顯著的差異，其中啟動子HT效率是JH的4.44倍（P<0.01），是WD的1.99倍（P<0.01）；啟動子WD效率是JH的2.24倍（P<0.01）。
　　3.比較荷斯坦牛、皖東牛和江淮水牛血液白細胞G