Ⅱ型膠原mRNA在骨關(guān)節(jié)炎軟骨細胞中的表達.pdf

1、目的：骨關(guān)節(jié)炎是目前臨床上最為常見的骨關(guān)節(jié)疾病，它的病因、病理機制還沒有被很好地全面地闡釋，治療上也沒有好的方法。對于骨關(guān)節(jié)炎病因的探索是目前的熱點和焦點，而且爭論很大。Ⅱ型膠原是關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)的主要結(jié)構(gòu)成分，軟骨基質(zhì)中II型膠原質(zhì)和量的改變是導(dǎo)致骨關(guān)節(jié)軟骨喪失其正常生物力學(xué)特性的直接原因。間質(zhì)金屬蛋白酶在軟骨基質(zhì)(特別是Ⅱ型膠原)的裂解過程中起主要作用，這已被大家所公認，但對骨關(guān)節(jié)炎軟骨細胞中Ⅱ型膠原mRNA的表達是否有改變，及其變化是

2、否直接導(dǎo)致軟骨基質(zhì)中II型膠原質(zhì)和量的改變，目前還沒有定論，且相關(guān)研究都建立在動物模型試驗上。本試驗通過對骨關(guān)節(jié)炎患者軟骨細胞II型膠原mRNA的表達水平的測定，來進一步探討骨關(guān)節(jié)炎的病因，以便尋求更好的臨床治療方法。方法：12份骨關(guān)節(jié)炎軟骨標本取白骨關(guān)節(jié)炎患者行全膝或全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)后，其中原發(fā)性骨關(guān)節(jié)炎軟骨標本5份，繼發(fā)性骨關(guān)節(jié)炎軟骨標本7份；9份正常軟骨標本取自股骨頸骨折患者行全髖置換術(shù)后，作為對照組。取等量軟骨組織，充分剪碎，置于

3、0．2％Ⅱ型膠原酶溶液中，37。恒溫搖床中消化6小時，收集軟骨細胞，抽提軟骨細胞總RNA，采用逆轉(zhuǎn)錄／聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)得到試驗組和對照組軟骨細胞II型膠原mRNA和內(nèi)參照β-actin的擴增產(chǎn)物，進行瓊脂糖凝膠電泳，將各目的條帶的灰度值與內(nèi)參照B-actin條帶值相比，得到各指標比值。數(shù)據(jù)用SPSSl2．O統(tǒng)計軟件進行分析。結(jié)果：II型膠原mRNA在試驗組(骨關(guān)節(jié)炎)軟骨細胞中的表達明顯低于對照組(正常軟骨)，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗存在顯著性差