c型凝集素lsectin作為丙型肝炎病毒受體的系統(tǒng)分析

1、?！?576乏6分類號UDC密級保密期限博士學位論文題目鯉燧巡也勉塑逝壟夔遜歪必作者姓名——一率11T卜厶一————————————————————一———————————————————————————一指導教師一賀疊塑瞳培養(yǎng)單位一芏奎匡堂盤堂瞳筮盟魚塹盟匿堂盟窒塹專業(yè)名稱——紐胞生塹堂論文提交日期——2006年5月15日學位授予單位主國△氐鯉筮至芏主醫(yī)堂盤鱟瞳中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院制中文摘要丙型肝炎病毒(HCV)是導致肝臟炎

2、癥的主要病毒之一。目前全世界有17億人感染Hcv，大部分患者發(fā)展成慢型肝炎，有些進一步發(fā)展為肝硬化和肝細胞性肝癌。HCV引起肝病的機制還不是很清楚。研究者利用病毒樣顆粒、可溶性HCV膜糖蛋白E2和HCV假型病毒顆粒發(fā)現(xiàn)了CD81、SR—BI等潛在的HCV受體，然而這些受體在人體內廣泛表達，不能解釋HcV感染的組織特異性。最近的研究發(fā)現(xiàn)一些肝臟特異表達的分子雖然不是感染所必需的，但是能夠有效地以反式感染方式提高HCV感染效率如DC—SIG

3、NR。LSECtin是我室克隆鑒定的一種新的II型C型凝集素，特異性地表達在肝竇和淋巴結竇內皮細胞表面。LSECtin能夠結合甘露糖、巖藻糖和N一乙酰葡糖胺，與同一家族的HCV受體DC—SIGNR具有相似的基因和蛋白結構，共定位于肝竇內皮細胞。這提示LSECtin可能結合HCV，并且與DC—SIGNR相互作用參與結合HCV，參與感染過程。我們用HCV患者血清、可溶性糖蛋白E2和NCV假病毒顆粒檢測HCV與LSECtin的結合，并且采用免

4、疫共沉淀技術和細胞粘附實驗檢測LSECtin與DC—SIGNR的相互作用。結果表明LSECtin能夠結合血清中的病毒顆粒，這種結合可能是通過與HCV表面的糖蛋白相互作用實現(xiàn)的，LSECtin結合HCV假病毒顆粒的能力低于DC—S16NR。結合抑制實驗顯示其結合受到鈣離子拮抗劑EGTA抑制，但是不能被甘露聚糖抑制，提示LSECtin是通過其C型凝集素樣結構域(CTLD)識別E2糖蛋白上非甘露糖的特異性糖基。同時還發(fā)現(xiàn)LSECtin和DC—

5、SIGNR存在相互作用，LSECtin頸區(qū)的coiled—coll域為相互作用所必需。LSECtin和DC—SIGNR共表達的細胞結合IICV能力較單獨表達DC一$1GNR的細胞降低，提示二者的相互作用可能是改變細胞結合能力的原因。本研究鑒定了一個新的HCV受體——LsECtin，它在體內肝竇內皮細胞上與DC—SIGNR共同參與與HCV的結合，這提示HCV反式感染可能是一個更為復雜的過程，并且為研究抑制HCV入胞藥物提供了新的藥物靶點。