灰飛虱體內(nèi)水稻條紋葉枯病毒的快速檢測及Wolbachia KefKL功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、水稻條紋葉枯病毒(rice stripe virus, RSV)是單鏈負義編碼的RNA病毒,它能引發(fā)水稻條紋葉枯病,導致水稻產(chǎn)量嚴重下降.這種病毒主要經(jīng)灰飛虱傳播,可以在灰飛虱體內(nèi)復制并經(jīng)卵傳給下一代.所以,灰飛虱體內(nèi)水稻條紋葉枯病毒的快速而準確的檢測對水稻條紋葉枯病的預測和防治都具有重要的意義.在這里,我們采用RT-PCR的方法對單個傳毒灰飛虱體內(nèi)的水稻條紋葉枯病毒進行了檢測.用位于水稻條紋葉枯病毒的依賴于RNA的RNA聚合酶基因上的

2、一對引物,我們從帶毒灰飛虱和染病水稻葉上都特異性地得到了445bp的PCR產(chǎn)物.同時,在灰飛虱actin基因內(nèi)含子和外顯子相連處設計了一對引物,其PCR產(chǎn)物做為RNA特異的陽性對照,從而保證RT-PCR結構的準確性.我們還優(yōu)化了雙重RT-PCR的條件,即一次PCR反應得以同時檢測水稻條紋葉枯病毒和灰飛虱actin基因的存在.我們的實驗結果表明RT-PCR方法可以快速而準確地檢測出灰飛虱帶毒與否,從而得以對水稻條紋葉枯病的爆發(fā)進行早期監(jiān)測

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