中國棉鈴蟲核型多角體病毒的感染對宿主細胞周期和細胞周期蛋白的影響.pdf

1、我們以HaSNPV——Hz細胞為實驗系統(tǒng),研究桿狀病毒的感染對昆蟲細胞周期進程和周期蛋白的影響.實驗結果如下:1.正常Hz細胞周期備個時相的分布和時間間隔;通過FACS 分析不同步的正常Hz細胞,發(fā)現(xiàn)47-53﹪的細胞處于G<,1>,期;20-27﹪的細胞處于S期;33-2肌﹪ 的細胞處于G<,2>/M期;并且沒有異倍體(>4NDNA)細胞的出現(xiàn).羥基腺可以將Hz細胞抑制于細胞周期的G<,1>期.加入終濃度為60ug/ml的羥基脲作用2

2、4hr后,74﹪的Hz細胞被抑制于細胞周期的G<,1>期.通過細胞周期抑制劑抑制并釋放細胞來測定細胞周期各時相之間的時間間隔,FACS分析發(fā)現(xiàn)Hz細胞完成整個細胞周期時間大概為40hr,G<,1>期到S 期的時間為10hr:S期到G<,2>/M期的時間為14hr:G<,2>/M期到G<,1>期的時間為16hr.2.HaSNPV的感染對Hz細胞周期進程的影響;HaSNPV感染不同步的Hz細胞,病毒感染后的8hr,處于G<,2>/M期的細胞

3、數(shù)量開始增加,有44﹪ 的細胞被抑制在G<,2>/M期,這種對細胞周期的抑制完成于HaSNPV感染后24hr左右,抑制于G<,2>/M期達到70﹪ 左右.FACS分析發(fā)現(xiàn)NaSNPV感染24 hr后,出現(xiàn)了 14.3﹪的異倍體(>4NDNA)細胞;當HaSNPV感染72hr 時,異借體(>4NDNA)細胞的數(shù)量達到最大值,并且細胞的異倍體化現(xiàn)象隨著感染時間延長越趨明顯.用HaSNPV感染同步于G<,1>期的Hz細胞,同樣發(fā)現(xiàn)HaSNPV

4、感染可以將細胞抑制于G<,2>/M期.3.HaSNPV的感要對Hz細胞周期蛋白的影響;HaSNPV感染不同步的Hz細胞,CyclinB<,1>表達量在病毒感染后的16hr開始升高,在感染后的24hr達到高峰.用HaSNPV感染同步于G<,1>期的Hz細胞,同樣發(fā)現(xiàn)HaSNPV感染導致CyclinB<,1>表達量升高.通過共聚焦激光掃描顯微鏡對正常Hz細胞和HaSNPV感染48hr后細胞中的CyclinB<,1>進行了定位,發(fā)現(xiàn)在正常的H