針對水稻條紋病毒的人工miRNA設計與應用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、水稻條紋病毒(Rice stripe virus,RSV)引起的水稻條紋葉枯病是最重要的水稻病毒病之一,給我國水稻生產安全造成了巨大威脅。為了創(chuàng)制高抗RSV的水稻新種質,本研究首先根據天然microRNA(miRNA)的結構特點和作用原理,針對水稻條紋葉枯病毒基因組設計了人工miRNA(artificial microRNA,amiRNA),同時克隆了miRNA528基因的前體(pre-miRNA)。應用重疊PCR(over-lappi

2、ng)技術并以這個水稻天然miRNA前體作為骨架,構建2個水稻轉化載體(pAmiR-1和pAmiR-2),其中載體pAmiR-1是針對RSV p3基因；載體pAmiR-2是針對RSV pc3基因。通過農桿菌介導法將2個人工miRNA表達載體導入水稻品種武育粳3號,分子鑒定表明共獲得219株轉基因水稻植株。利用攜帶RSV的介體灰飛虱(Laodelphax striatellus,Fallen)對部分轉基因株系進行抗病毒鑒定,結果表明共有2

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