阿莫西林和氨芐西林殘留分析的前處理及HPLC檢測(cè)方法研究.pdf

1、青霉素類抗生素是指分子中含有青霉烷、具有殺菌作用的一類抗生素。但因大量使用，導(dǎo)致其殘留成為動(dòng)物源性食品的安全隱患。為避免消費(fèi)者受到食品中抗生素殘留的危害，本實(shí)驗(yàn)結(jié)合國(guó)內(nèi)外對(duì)青霉素類抗生素的藥理研究及殘留分析方法的研究，選用雞為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，以母核6-APA合成的抗原，免疫動(dòng)物得到的多抗，制備免疫親和層析柱。從而建立及分析青霉素類抗生素中氨芐西林、阿莫西林兩種藥物的兩種前處理方法及高效液相色譜分離分析方法。
　　 本實(shí)驗(yàn)具體工作內(nèi)容和

2、結(jié)果如下：
　　 1、高效液相色譜分離阿莫西林、氨芐西林條件的建立
　　 實(shí)驗(yàn)首先對(duì)幾種緩沖體系進(jìn)行比較，磷酸鹽緩沖體系可對(duì)氨芐西林、阿莫西林進(jìn)行較好分離，確定為實(shí)驗(yàn)所需緩沖體系。通過(guò)紫外掃描確定254nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。然后針對(duì)不同的緩沖液離子濃度、pH值對(duì)氨芐西林、阿莫西林分離效果的影響進(jìn)行分析，結(jié)果表明緩沖液離子濃度為50mmol/L、pH為5.6、運(yùn)行溫度為22℃為最佳色譜條件。最終采用的液相色譜分析條件為：紫外檢測(cè)

3、器，自動(dòng)進(jìn)樣器，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，運(yùn)行緩沖液為50mmol/L磷酸鹽緩沖液，pH值5.6，溫度22℃。每次進(jìn)樣前均乙腈：水-10：90洗15min、流動(dòng)相洗10min。在確定的最佳色譜條件下10min中內(nèi)阿莫西林、氨芐西林完全分離且峰形較佳。
　　 2、SPE-HPLC分析雞肌肉樣品中的阿莫西林、氨芐西林殘留方法建立
　　 實(shí)際雞肌肉樣品采用鎢酸提取、乙腈去蛋白、SPE凈化后HPLC檢測(cè)，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，

4、SPE-HPLC方法下氨芐西林的檢測(cè)限為0.06μg/g定量限為0.09μg/g，阿莫西林的檢測(cè)限為0.05μg/g定量限為0.06μg/g。兩者在雞肌肉組織中的回收率范圍為77.7％～95.1％。色譜圖背景簡(jiǎn)單，無(wú)干擾藥物分離的雜質(zhì)峰出現(xiàn)。
　　 3．IAC-HPLC分析雞肌肉樣品中的阿莫西林、氨芐西林殘留方法建立
　　 實(shí)際雞肌肉樣品采用鎢酸提取、乙腈去蛋白、IAC凈化后的HPLC檢測(cè)，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，氨芐西林的檢測(cè)