真姬菇微衛(wèi)星分子標記的開發(fā)及其種質資源分析.pdf

1、真姬菇（Hypsizygus marmoreus）是著名的食藥用菌，具有廣闊的開發(fā)利用前景。目前通過人工馴化和栽培實驗，真姬菇已經(jīng)實現(xiàn)了人工栽培，而且我國、日本和韓國等國家和地區(qū)的一些大型食用菌企業(yè)，都可以在人工控制溫度、濕度、光照和空氣成分的環(huán)境中，實現(xiàn)真姬菇的工業(yè)化栽培。
　　 作為重要的栽培菌株，客觀評價真姬菇栽培菌株種質資源的遺傳多樣性，掌握不同栽培菌株的鑒別方法，是充分保護和利用真姬菇種質資源，開展真姬菇良種選育，保護

2、真姬菇品種知識產(chǎn)權，加強真姬菇菌種質量管理的基礎。本研究從全國范圍內收集了真姬菇27個主要栽培菌株，其中包括21株常規(guī)栽培真姬菇菌株和6株工業(yè)化栽培真姬菇菌株.根據(jù)形態(tài)學特征和ITS序列對所收集的真姬菇菌株進行了分類鑒定，利用SSR分子標記對真姬菇的種質資源進行分析研究。主要研究結果如下：
　　 1.一部分形態(tài)特征（細密花斑，菜盤型等）可以將工業(yè)化栽培菌株與常規(guī)栽培菌株區(qū)分開；但兩者仍具有一些相同的形態(tài)特征，如菌蓋為傘型，菌蓋土

3、黃色等。
　　 2.對供試菌株的ITS區(qū)域進行測序和比較分析，結果顯示供試菌株的ITS序列長度為594bp，通過blast比對發(fā)現(xiàn)在種的水平上證明菌株來源準確。用PHILIP軟件分析發(fā)現(xiàn)菌株間的相似系數(shù)約為99％，說明利用單一的ITS序列不能將菌株區(qū)分開。
　　 3.利用簡單重復序列（SSR）標記技術，以27個真姬菇菌株為供試材料，根據(jù)香菇、糙皮側耳、灰蓋鬼傘基因組序列設計引物，對真姬菇供試菌株進行轉移擴增。從54對引物

4、中篩選出23對能夠擴增出穩(wěn)定帶型且菌株之間帶型差異明顯的SSR引物。利用23對引物對全部供試菌株進行擴增，共擴增133條條帶，其中多態(tài)性條帶為108條，多態(tài)性比率達到81.2％。UPGMA聚類分析結果表明，大部分常規(guī)栽培菌株（95％）和工業(yè)化栽培菌株（80％）聚在不同組，說明兩者之間的遺傳背景存在明顯差異.
　　 4.根據(jù)獲得的菌株特有的SSR標記分析表明，2個工業(yè)化栽培菌株各自具有一條特異條帶，通過引物組合法，利用7對引物，可