富營養(yǎng)化水體中水葫蘆根際微生物群落結構研究.pdf

1、隨著工農業(yè)的迅速發(fā)展，水體的污染問題越來越嚴重，特別是由于氮磷過剩引發(fā)的水體的富營養(yǎng)化，已經成為全球范圍內水質量最為關注的問題。利用水生高等植物治理和修復富營養(yǎng)化水體具有明顯的效果，且投入少，效益高。水葫蘆是研究最早最深入，也是實際生態(tài)修復工程中應用較廣的水生植物。水葫蘆對富營養(yǎng)化水體的修復一方面靠植物本身吸收和利用，另一方面，根際微生物吸收利用及微生物通過氨化-硝化-反硝化作用對水體中的氮磷的去除，也起到很關鍵的作用。根際微生物中不同

2、的種群具有不同的功能，因此，本文研究了富營養(yǎng)化水體中水葫蘆根際微生物結構，利用傳統(tǒng)培養(yǎng)法、分子生物學手段（T-RFLP技術與克隆文庫法）研究富營養(yǎng)化水體中水葫蘆根際微生物的群落結構，以期了解水葫蘆根際微生物群落多樣性與富營養(yǎng)化水體環(huán)境的關系，為能構建水葫蘆-微生物耦合降解系統(tǒng)，強化水葫蘆凈水功能提供理論依據(jù)。
　　本文利用硝化細菌培養(yǎng)基從水葫蘆根際樣品中共分離出8株細菌。其中，從自養(yǎng)型培養(yǎng)基中分離得到5株可耐受203mg/L的NO

3、2-N的細菌，分別為3株惡臭假單胞菌（Pseudomonas putida），1株蒙氏假單胞菌（Pseudomonas monteilii）和1株屬于叢毛單胞菌的菌株;從異養(yǎng)型培養(yǎng)基中分離得到3株可耐受237mg/L的NH4+-N的細菌，3株均為不動桿菌(Acinetobacter sp.)。
　　以16S rRNA基因為分子標記，利用T-RFLP技術對水葫蘆根際樣品的微生物結構多樣性進行了分析，并以水葫蘆近水樣、遠水樣品進行了對

4、照。在同一時間段內，水葫蘆根際具有更豐富的微生物群落多樣性，水葫蘆近水樣次之，遠水樣多樣性最小。根據(jù)T-RFLP圖譜，水葫蘆根際微生物的最優(yōu)勢菌株是159bp代表的菌株，通過在線軟件(SMS)對培養(yǎng)所得的不動桿菌Y11-5作酶切模擬分析，發(fā)現(xiàn)Y11-5與159bp對應。對十月水葫蘆根際樣品(RO)建立了16S rDNA文庫，結果顯示:水葫蘆根際微生物的主要類群為Proteobacteria（變形菌門），其約占整個群體的65.1％。文庫中

5、其他的類群是擬桿菌門（Bacteroidetes）11.6％、酸桿菌門(Acidobacteria)7％、疣微菌門（Verrucomicrob ia）7％和Hydrogenedentes2.3％;未分類細菌占7％。
　　以amoA基因為分子標記，利用T-RFLP技術對水葫蘆根際氨氧化細菌的群落結構進行了分析，并以水葫蘆近水樣作為對照。結果顯示:水葫蘆根際氨氧化細菌的群落多樣性高于近水樣，但兩個樣品具有極為相似的優(yōu)勢菌種。對水葫蘆根