不同培養(yǎng)條件對產(chǎn)毒銅綠微囊藻和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻生長競爭的影響.pdf

1、銅綠微囊藻是水華時的優(yōu)勢藻種,銅綠微囊藻可分為產(chǎn)毒銅綠微囊藻和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻,不同的環(huán)境條件可以影響這兩種藻的競爭關(guān)系。本文對比并選擇了一種最佳的銅綠微囊藻DNA提取方法并據(jù)此建立一套測定水中產(chǎn)毒和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻濃度的實時熒光定量PCR方法,應(yīng)用該方法檢測混合培養(yǎng)液中兩張藻量,通過PB設(shè)計和CCD設(shè)計考察了光照、溫度、pH、硝態(tài)氮離子濃度、P離子濃度這五個因素對產(chǎn)毒/不產(chǎn)毒銅綠微囊藻生長競爭的綜合影響。全文研究內(nèi)容和實驗結(jié)果如下:<

2、br>　　 (1)分別對比了SDS裂解法、Dneasy Blood&Tissue Kit試劑盒、CTAB提取法提取銅綠微囊藻DNA的效果,結(jié)果表明采用Dneasy Blood& Tissue Kit試劑盒提取DNA具有很好的重復(fù)性,提取效率穩(wěn)定;SDS裂解法也能有效提取銅綠微囊藻的DNA,但是重復(fù)性略差;CTAB法在提取樣品DNA時發(fā)生了降解。
　　 (2)分別用SDS裂解法和Dneasy Blood& Tissue Kit試

3、劑盒提取不產(chǎn)毒銅綠微囊藻標(biāo)準(zhǔn)品的DNA并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明采用Dneasy Blood& TissueKit試劑盒提取的標(biāo)準(zhǔn)品DNA具有很好的重復(fù)性,采用該方法提取的標(biāo)準(zhǔn)品DNA經(jīng)PCR擴增后可以建立相關(guān)性很好的標(biāo)準(zhǔn)曲線用于產(chǎn)毒和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻濃度的定量檢測。
　　 (3)應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測混合培養(yǎng)液中的產(chǎn)毒銅綠微囊藻和不產(chǎn)毒銅綠微囊藻的細(xì)胞濃度,通過PB設(shè)計在光照、溫度、pH、硝態(tài)氮離子濃度、P離子濃度這五個因素