sd大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γppar-γ酶聯(lián)免疫分析

1、SD大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)酶聯(lián)免疫分析酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：檢測范圍：96T20pgml500pgml使用目的：使用目的：本試劑盒用于測定SD大鼠血清、血漿及相關液體樣本中過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)含量。實驗原理實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中SD大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)水平。用純化

2、的SD大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)，再與HRP標記的過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)呈正相關。用酶標儀在450nm

3、波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中SD大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)濃度。試劑盒組成試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml1瓶7終止液6ml1瓶2酶標試劑6ml1瓶8標準品（960pgml）0.5ml1瓶3酶標包被板12孔8條9標準品稀釋液1.5ml1瓶4樣品稀釋液6ml1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml1瓶12密封袋1個標本要求標本要求1標本采集后盡早進行提取，提取按

4、相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于20℃保存，但應避免反復凍融2不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。480pgml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液240pgml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液120pgml3號標準品1

5、50μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液60pgml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液30pgml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度

6、。注意事項注意事項1試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡1530分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用