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1、“金桃金桃”獼猴桃胚乳植株再生體系的優(yōu)化獼猴桃胚乳植株再生體系的優(yōu)化_胚乳培養(yǎng)胚乳培養(yǎng)論文網(wǎng)文網(wǎng)獼猴桃是一種營(yíng)養(yǎng)豐富的水果,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和藥用價(jià)值。由于獼猴桃果實(shí)中種子過多,大大影響到其食用品質(zhì)。為獲得獼猴桃無籽或少籽的材料,前人對(duì)獼猴桃進(jìn)行了的胚乳培養(yǎng)的研究,但是對(duì)獼猴桃胚乳組織再生過程中的體系優(yōu)化的研究尚未報(bào)道。金桃是我國(guó)育成的獼猴桃優(yōu)良品種,在意大利等國(guó)有廣泛的推廣,其商品性狀優(yōu)良,在目前的國(guó)際市場(chǎng)中具有較好的競(jìng)爭(zhēng)力。本文以
2、獼猴桃金桃種子的胚乳為試驗(yàn)材料,通過器官發(fā)生途徑誘導(dǎo)形成不定芽,探討了培養(yǎng)基種類、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合、不同濃度蔗糖以及暗培養(yǎng)時(shí)間對(duì)不定芽形成的影響,以求建立一個(gè)高效的適合獼猴桃胚乳培養(yǎng)的再生系統(tǒng)。為通過胚乳再生植株改良和選育獼猴桃新品種提供技術(shù)參數(shù)。并應(yīng)用流式細(xì)胞儀鑒定了胚乳愈傷組織誘導(dǎo)得到的植株染色體倍性。1材料和方法1.1植物材料選取獼猴桃金桃品種(Actindiachinensiscv.Jintao(2n=4x=116)中華獼猴桃
3、黃瓤,意大利產(chǎn))的果實(shí),用自來水沖洗30分鐘,75%酒精滅菌處理1min,然后用0.2%HgCl滅菌處理20min,再用無菌水沖洗3次。在無菌條件下,取出種子,剝?nèi)シN皮并去掉胚,接種在培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基為12MS附加瓊脂粉5gL、蔗糖20gL,用0.1molL的HCl或者NaOH調(diào)整pH值至5.8,在121℃12MS0.1molLNAA5molLBA+20gL蔗糖的再生培養(yǎng)基上,進(jìn)行不同時(shí)間(0,7,14,21d)的暗培養(yǎng)后轉(zhuǎn)入光下培養(yǎng),
4、探討暗培養(yǎng)時(shí)間對(duì)器官形成的影響。1.3培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件為:在25℃日光燈照明的168h的光周期,光照強(qiáng)度40umolms下培養(yǎng)。1.4倍性鑒定1.4.1提取液配制10mmolLMgSO50mmolLKCl5mmolLHEPES0.25%TritonX1001%(WV)PVP30。1.4.2鑒定方法取約2cm的不定芽苗頂部葉為多倍體檢測(cè)材料。加入1ml0℃的提取液中在培養(yǎng)皿里用鋒利的刀片快速將其切碎溶液用300目尼龍網(wǎng)過濾至離心管中300
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