CRM1抑制劑的設計、合成及抗腫瘤活性評價.pdf

1、CRM1(Chromosome region maintenance1)，也叫XPO1（Exportin1），它是一種真核蛋白，調控核蛋白，rRNA，snRNA和mRNA等蛋白和RNA出入細胞核。CRM1能夠轉運大部分腫瘤抑制蛋白和原癌蛋白，其表達異常與腫瘤的發(fā)生發(fā)展以及耐藥性等密切相關。因此，CRM1已經成為了腫瘤藥物研究的靶點之一。
　　目前已經報道的大多數CRM1抑制劑都具有α，β不飽和δ內酯環(huán)，包括天然來源的哥納香甲素、L

2、eptomycinB等化合物。本課題對α，β不飽和δ內酯環(huán)的初步研究發(fā)現(xiàn)，內酯環(huán)不飽和雙鍵的取代會使目標化合物的抗腫瘤活性消失，而不同的側鏈對活性影響較大。因此，在本課題組前期研究的基礎上，以發(fā)現(xiàn)的先導化合物對照2和哥納香甲素的基本結構為骨架，開展先導化合物的結構優(yōu)化和構效關系研究，發(fā)現(xiàn)新型的CRM1抑制劑。具體研究工作如下:
　　一、6-氧/氮/硫甲基-5，6-二氫-吡喃-2-酮的合成及活性研究
　　以對照2為先導化合物，

3、保留不飽和內酯環(huán)，對側鏈進行修飾，在6位引入不同的雜原子（氧、氮、硫），通過取代、開環(huán)、酯化、氧化、關環(huán)等反應合成14個氧甲基化合物，4個氮甲基化合物，1個硫甲基化合物，1個亞砜甲基化合物，并評價了它們的抗腫瘤活性，它們的IC50值都大于或等于2.31μM。苯環(huán)上存在吸電子基團的氧甲基化合物、氮甲基化合物、硫甲基化合物抗腫瘤活性都減弱或者消失，而其它供電子基團的氧甲基化合物、亞砜基化合物都有良好的抗腫瘤活性。說明苯環(huán)上的吸電子基團和6-

4、雜原子對化合物的抗腫瘤活性影響很大。
　　二、6-氮乙基-5，6-二氫-吡喃-2-酮的合成及活性研究
　　基于有較好抗腫瘤活性的6-亞砜基化合物，通過對氨基進行?；芯旷０奉惢衔飳ι锘钚缘挠绊?。利用?；⒊森h(huán)、硫代等反應得到17個6-氮乙基化合物，并評價其抗腫瘤活性，發(fā)現(xiàn)它們大部分化合物抗腫瘤活性消失，說明側鏈的酰胺鍵對抗腫瘤活性影響可能很大。
　　三、候選化合物對Hela細胞周期、凋亡和CRM1蛋白表達量的影響

5、
　　CRM1在Hela細胞中高表達，因此，基于前期研究結果，選擇活性最好的化合物I11，評價其對Hela細胞凋亡率和周期分布的影響。結果表明I11在20μM濃度時可以將Hela細胞阻滯在G1期，誘導22.7％細胞凋亡。并且通過免疫蛋白印跡技術，發(fā)現(xiàn)化合物I11能夠明顯的降低CRM1蛋白的表達量。
　　綜上，基于哥納香甲素的基本骨架，對前期發(fā)現(xiàn)潛在的CRM1抑制劑，進行了結構優(yōu)化和構效關系研究，共合成目標化合物37個，結構經