葛根渣異黃酮酶法提取的應用基礎研究.pdf

1、本文將酶處理與直接醇提工藝相結合，并利用大孔樹脂對獲得的異黃酮進行了純化，取得如下研究成果： 在醇提之前采用纖維素酶和木聚糖酶對葛根渣進行預處理，并對預處理條件進行了優(yōu)化。直接醇提法總異黃酮得率為0.84％。用10FPIU(以每g葛根渣計，下同)的纖維素酶處理12h后，總異黃酮得率可以增至1.14％；300IU的木聚糖酶處理6h，總異黃酮得率可以增至1.28％。纖維素酶和木聚糖酶之間存在著協(xié)同作用：當木聚糖酶用量為300IU時，

2、添加少量的纖維素酶協(xié)同處理6h可進一步提高總異黃酮得率，而纖維素酶添加量為7.5FPIU時，總異黃酮得率可達1.38％。采用黑曲霉菌株A.nigerZU-01，以葛根渣為主要原料進行固態(tài)發(fā)酵，利用微生物產生的酶系破壞細胞壁的纖維結構，促進異黃酮的溶出。優(yōu)化后的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中葛根渣和麩皮組成比例為7：3，含水率70％。在30℃下發(fā)酵120h，總異黃酮提取得率為1.53％。HPLC圖譜顯示：固態(tài)發(fā)酵后大豆苷元的含量下降，而糖苷型異黃酮的含

3、量明顯增加，其中葛根素含量比直接醇提法提高了70％。在同樣的培養(yǎng)基條件下，選取另一種黑曲霉菌株A.nigerZU-02對葛根渣在30℃進行固態(tài)發(fā)酵，144h后，總異黃酮得率達到1.47％。HPLC圖譜顯示：該菌株固態(tài)發(fā)酵后，除葛根素含量有所下降之外，大豆苷、大豆苷元、染料木苷和染料木素含量均有不同程度的增加。 采用大孔樹脂吸附法對異黃酮進行了精制。經過靜態(tài)吸附實驗，從六種樹脂中篩選異黃酮回收率較高的HZ801樹脂，并對其進行動態(tài)