蛋白質的電化學探針研究及分析應用.pdf

1、本論文將蛋白質的分析檢測同電分析化學的內容相結合，開展了蛋白質電化學探針的研究及分析應用方向的研究工作。主要包括以下內容： 1.開展了蛋白質的電化學探針的研究。以滴汞電極、靜汞電極等為工作電極，采用線掃伏安法、循環(huán)伏安法等電化學手段，結合紫外-可見分光光度法，根據蛋白質的結構特點和與有機小分子結合的本質，篩選了一些具有電化學活性的有機小分子如酸性鉻藍K、變色酸2B、變色酸2R、釷試劑、鉻天青S等，以它們?yōu)殡娀瘜W探針，以人血清白蛋

2、白為模型，研究了它們與蛋白質的結合反應。在酸性條件下，這些有機小分子能夠發(fā)生解離而帶負電荷，而人血清白蛋白帶正電荷，兩者可以發(fā)生相互作用。這些有機小分子具有電化學活性，能夠在電極上發(fā)生極譜還原反應，當加入蛋白質后，由于相互作用而導致了還原峰電流的降低，峰電流的降低值同蛋白質的加入量在一定濃度范圍內呈現較好的線性關系。對結合反應條件和電化學檢測條件進行了優(yōu)化，考察了常見金屬離子、氨基酸等物質對分析測定的干擾，在最佳條件下，建立了測定不同蛋

3、白質的工作曲線，并將所建立的電化學分析新方法應用于正常人血清樣品中蛋白質含量的測定，結果與經典的考馬斯亮藍G-250光度法一致，說明了本分析方法的準確性和可靠性。 2.對結合反應機理進行了電化學推導?？疾炝松鲜鲇袡C小分子在溶液中的電化學行為以及與蛋白質相互作用后溶液的電化學參數的變化情況，結果表明，加入蛋白質后，溶液的電化學參數如標準電極電位E0，標準速率常數ks和電子轉移系數α等基本不發(fā)生變化，說明其與蛋白質發(fā)生結合后成生了一

4、種非電化學活性的生物超分子復合物，降低了溶液中有機小分子的游離濃度，從而使有機小分子的還原峰電流降低。利用相關的電化學方程分別對結合反應的結合比和結合常數進行了求解。 3.初步開展了生物多糖物質肝素鈉的電化學研究。選擇了中性紅為探針，優(yōu)化了結合條件和電化學測定條件，考察了不同的干擾物質對測定的影響，建立了測定肝素鈉的電化學新方法，并應用于肝素鈉注射液的測定，結果令人滿意。利用電化學方程求解了中性紅與肝素鈉的結合比和結合常數。