基于金銀-DNA的雙光子納米探針構建及其細胞成像應用研究.pdf

1、近年來，以近紅外光作為激發(fā)光源的雙光子顯微鏡在生物檢測和醫(yī)學成像領域成為關注的熱點。與傳統(tǒng)的單光子顯微鏡相比，雙光子顯微鏡具有明顯的優(yōu)勢：能夠進行深層組織成像，具有高的時空分辨率，允許的觀察時間更長。然而，目前大部分應用于雙光子成像的熒光探針雙光子吸收橫截面積較小，限制了雙光子顯微技術的應用。此外，雙光子有機小分子探針由于其本身內(nèi)在的原因，在實際應用過程中不可避免地存在細胞膜穿透能力差、抗光漂白能力弱等問題。因而設計并合成具有優(yōu)良性質的

2、雙光子有機小分子仍然是雙光子顯微鏡應用于生物檢測和成像中亟需解決的問題。
　　納米材料由于其優(yōu)良的特性，在生物醫(yī)學領域的應用越來越廣泛。納米材料如金屬納米材料、介孔硅等不僅是很好的載體，其在生物體內(nèi)的循環(huán)時間可調，且存在 EPR效應?；陔p光子有機小分子在生物檢測和醫(yī)學成像方面的優(yōu)勢，結合納米材料的應用特點，本論文的研究工作主要包括以下幾個方面：
　　一、設計并合成了具有優(yōu)良雙光子性質的有機小分子BMVC-Bu，并對其與不同

3、DNA序列的作用進行研究，考察不同 DNA序列對BMVC-Bu的熒光增強效果，測定最強增強效果下 DNA與 BMVC-Bu的結合比和結合常數(shù)。同時，也考察了BMVC-Bu與DNA/BMVC-Bu的雙光子性質，為后續(xù)的實際應用打下理論基礎。
　　二、基于谷胱甘肽（GSH）與銀納米顆粒（AgNPs）之間的作用，設計了銀納米顆粒（AgNPs）/DNA/BMVC-Bu雙光子納米復合探針檢測 GSH。首先，以BMVC-Bu/HPDNA為模板

4、合成AgNPs/DNA/BMVC-Bu納米復合探針。由于AgNPs與 BMVC-Bu之間的距離靠近，產(chǎn)生能量轉移，BMVC-Bu/HPDNA的熒光減弱。GSH與 AgNPs之間會形成強力的Ag-S鍵，產(chǎn)生競爭作用，促使 AgNPs遠離BMVC-Bu/HPDNA，熒光恢復。該納米復合探針被成功地應用于細胞內(nèi) GSH的檢測，并實現(xiàn)了對細胞和組織凋亡過程中GSH變化的監(jiān)測。
　　三、基于核酸內(nèi)切酶Dnase I對DNA的剪切作用，設計了