部分iFox-Hunting突變體的表型鑒定及功能初步分析.pdf

1、葉片是植物最主要的組成部分，是其于外界溝通的“門戶”。葉片的數(shù)量多少、葉片面積大小、葉片的形態(tài)差異、衰老速度的快慢等對植物的生長發(fā)育、產(chǎn)量、品質均具有不同程度的影響。前期，本實驗室構建了一個可誘導表達油菜基因的擬南芥功能獲得型突變體庫，并從中篩選獲得了具有早衰和窄葉表型的突變體。這些突變體的獲得，為培育油菜早熟新品種和新型的具合理葉形的新型油菜新品種提供了重要可能。本研究將在此基礎上進一步將可在擬南芥中引起早衰表型的基因Bn1327以農

2、桿菌為介導遺傳轉化油菜，以證明超量表達相同的油菜基因是否可使擬南芥和油菜產(chǎn)生相同的表型，以此來證明前期所構建的擬南芥突變體庫，是否可用于研究油菜的功能基因組學。此外，本研究還對誘導表達突變體rsl-1181的表型特征及相關基因的表達進行了初步分析，主要結果如下:
　　1、Bn1327轉基因陽性植株的獲得。利用農桿菌介導的油菜下胚軸遺傳轉化體系，把Bn1327基因轉入冬性甘藍型油菜甲W76-1中，得到了T0代陽性植株5株，經(jīng)套袋自交

3、后得T1代群體。
　　2、為明確超量表達Bn1327基因對油菜早衰性的影響，我們對田間3個月苗齡的T1代轉基因與對照植株具相同葉齡的葉片進行摘取并進行了黑暗處理，結果表明轉基因葉片與對照葉片相比，葉片衰老速度明顯加快;分子證據(jù)表明，轉基因葉片內外源基因Bn1327的表達量也明顯升高。這一研究結果說明，在油菜和擬南芥中超量表達相同的油菜基因可以引起基本一致的表型，說明前期構建的擬南芥功能獲得性突變體庫應該適合用于油菜功能基因組學的研

4、究。
　　3、用誘導劑對突變體rsl-1181處理14天后，發(fā)現(xiàn)該突變體的葉片由橢圓形變成窄長型，在第8周時窄葉表型趨于穩(wěn)定，rsl-1181的葉長、葉面積均顯著小于野生型，而葉寬則極顯著小于野生型。此外，表型統(tǒng)計結果還表明，經(jīng)誘導劑誘導后，與對照相比，突變體rsl-1181的主要生育期均有不同程度的推遲。
　　4、為了進一步解析Bn1181基因調控葉形的分子機制，我們參考了Dubois等人提出的窄葉形成模式，并采用q-PC