

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、棗(Ziziphus jujuba Mill.)是我國重要的特色和優(yōu)勢果樹樹種。棗瘋病是由植原體(Phytoplasma)引起的致死性傳染病害,對棗產業(yè)危害極大。本課題組最近在國內外首次選育出了高抗棗瘋病新品種“星光”,為揭示其抗病機制,本研究利用雙向電泳和質譜分析技術,對其在植原體侵染前后不同時期的蛋白進行了蛋白質組學分析,旨在尋找抗棗瘋病相關蛋白,進而通過氨基酸序列預測基因序列,為抗病基因克隆奠定基礎。主要結果如下: l建立
2、了棗韌皮部蛋白的雙向電泳體系本試驗通過對TCA-丙酮法和甲醇/醋酸銨法的比較,確定甲醇/醋酸銨法適宜棗韌皮部總蛋白提取,可解決棗枝皮中多糖、色素等對雙向電泳的干擾問題。 適宜的蛋白上樣量為380μL(約200 ug),最佳平衡時間為30min~40min,第二向SDS-PAGE電泳的最佳電泳值為200V;通過考馬斯亮藍和硝酸銀染色方法的比較,確定了硝酸銀染色適宜于棗韌皮部蛋白染色。 確定了棗韌皮部蛋白主要集中在pI4~7
3、之間。利用本試驗建立的蛋白質提取及雙向電泳體系,對棗韌皮部蛋白采用pH4~7的線性IPG膠條進行分離,經硝酸銀染色后獲得了重復性好、分辨率高的蛋白質雙向電泳圖譜,經PDQuest圖像分析軟件處理,得到500~700個可識別的蛋白質斑點。 2棗瘋病抗性相關蛋白分析通過單向電泳分析,發(fā)現(xiàn)在棗瘋病病樹上嫁接的“星光”接穗與健康樹上相比,在70d、90d時沒有明顯差異,而在嫁接后110d時,有三條譜帶(分子量為31.2 kDa、30.4
4、 kDa、29.0 kDa)表達量顯著增加。 通過雙向電泳和蛋白斑點比對分析,發(fā)現(xiàn)棗瘋病病樹上嫁接的“星光”接穗在嫁接后90d及110d時,在酸性端出現(xiàn)一隨發(fā)育階段后延而表達增強的區(qū)域(分子量27~32KD、等電點pI4.2~5.0),在對照健康樹上嫁接的接穗均沒有此變化。此結果與單向電泳結果一致。 確定了與棗瘋病抗性相關的蛋白范圍為分子量27~32KD、等電點pI4.2~5.0。 3獲得了3個同源性較好的蛋白序
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 鵝掌揪葉片發(fā)育相關蛋白的雙向電泳分析.pdf
- 家蠶蛾觸角蛋白的雙向電泳分析.pdf
- 牡丹花芽休眠解除相關蛋白的雙向電泳分析及質譜鑒定.pdf
- 低磷脅迫下油菜幼苗根系蛋白雙向電泳分析.pdf
- 甘藍型油菜種子萌發(fā)時期油體蛋白雙向電泳分析.pdf
- 堿脅迫下野生大豆葉片蛋白質組的雙向電泳分析.pdf
- 抗棗瘋病相關基因的克隆與分析.pdf
- 兔上肢骨折愈合的蛋白質組學雙向電泳分析.pdf
- 低溫脅迫下嫁接黃瓜耐低溫性雙向電泳分析.pdf
- 子宮平滑肌腫瘤的鑒別診斷及雙向電泳分析.pdf
- 磷脅迫下油菜子葉、莖及其根系分泌蛋白的雙向電泳分析.pdf
- 低溫脅迫下菊花蛋白質組的雙向電泳分析與質譜鑒定.pdf
- 牛羊乳蛋白質的雙向電泳分析及免疫檢測技術研究.pdf
- 矽肺大鼠支氣管肺泡灌洗液蛋白質差異顯示的雙向電泳分析.pdf
- 雙向電泳分析精索靜脈曲張不育患者精漿蛋白質的表達差異.pdf
- 不同含油量甘藍型油菜種子全蛋白及油體蛋白的雙向電泳分析.pdf
- 休眠期間苣荬菜芽根蛋白質組的雙向電泳分析及質譜鑒定.pdf
- 干旱脅迫下石斛(Dendrobium)葉片的蛋白質組研究——雙向電泳分析及質譜鑒定.pdf
- 蝦類蛋白質的雙向電泳研究.pdf
- 以雙向電泳為基礎的肺癌組織差異蛋白分析策略
評論
0/150
提交評論