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1、本研究以天然膠原蛋白含量較為豐富的豬皮為原料,用稀酸和胃蛋白酶分別對(duì)豬皮膠原蛋白進(jìn)行降解,用硫氰酸鐵法和硫代巴比妥酸反應(yīng)生成物法測(cè)定降解產(chǎn)物的抗氧化活性,篩選出最佳降解條件。因?yàn)樘烊荒z原蛋白具有十分穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),不溶于水和稀酸,所以在降解前先對(duì)豬皮進(jìn)行了121℃高溫變性處理,破壞其穩(wěn)定結(jié)構(gòu),提高降解效率。把降解產(chǎn)物添加到豬油中,探討了其對(duì)豬油氧化的抑制能力。因?yàn)樗峤猱a(chǎn)物中殘留了大量的無機(jī)鹽;且由于其分子量較小,所以采用Sephadex G
2、-25對(duì)其進(jìn)行脫鹽,并通過測(cè)定洗脫液電導(dǎo)率來判斷脫鹽效果。 在酸解試驗(yàn)中,主要研究了高溫變性的時(shí)間和酸解時(shí)間兩個(gè)因素。結(jié)果表明:在鹽酸濃度為0.5mol/L的條件下,豬皮經(jīng)過121℃高溫變性處理5min后,再酸解7h,得到的產(chǎn)物抗氧化性最強(qiáng)。 在酶解試驗(yàn)中,主要研究了高溫變性的時(shí)間、酶用量、酶解時(shí)間這三個(gè)因素。結(jié)果表明:豬皮膠原蛋白高溫變性處理的時(shí)間為5min。酶解條件是:在0.5mol/L醋酸溶液中,酶添加量為1.5%
3、(E/S),酶解時(shí)間為0.5h,此時(shí)酶解產(chǎn)物抑制亞油酸過氧化的能力最強(qiáng)。 在抑制豬油氧化試驗(yàn)中,酸解和酶解產(chǎn)物均表現(xiàn)出了抗氧化能力,而且酸解產(chǎn)物的抗氧化能力強(qiáng)于酶解產(chǎn)物,但二者的抗氧化能力均弱于TBHQ。 采用Sephadex G-25(Medium)脫鹽柱對(duì)酸解產(chǎn)物進(jìn)行脫鹽,結(jié)果顯示洗脫液的流速對(duì)脫鹽效果影響較大。洗脫的最佳條件是:上樣體積為1ml,檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm,流速為4.5ml/10min,樣品濃度為0.2g
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