拮抗細(xì)菌RY3對(duì)柑橘綠霉病菌拮抗活性及機(jī)理研究.pdf

1、對(duì)于前期從土壤中篩選的一株高活性拮抗細(xì)菌RY3，通過菌體形態(tài)、生理生化特性測(cè)定并結(jié)合16SrDNA序列分析，表明該菌為解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)。本文對(duì)RY3發(fā)酵培養(yǎng)基組分和發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，研究抑菌物質(zhì)粗提物的理化性質(zhì)和抑菌機(jī)理，為RY3抑菌物質(zhì)生防應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。平板對(duì)峙法測(cè)得菌株RY3具有廣譜抗真菌性，對(duì)柑橘綠霉病菌(Penicilliumdigitatum)、柑橘青霉病菌(Penicill

2、ium expansum)，桃褐腐病菌(Moniliniafructicola)，柑橘蒂腐病菌(Diplodia natalensis)，冬棗漿胞病菌(Alternaria Nees exWallr.)，灰霉病菌(Botrytis cinerea)均有較好的抑制作用，其中對(duì)柑橘綠霉病菌抑制作用最佳。采用單因素和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，通過搖瓶發(fā)酵對(duì)其發(fā)酵培養(yǎng)基組分和發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果顯示，最優(yōu)培養(yǎng)基為：可溶性淀粉1％，黃豆餅粉0.5％，碳酸氫

3、銨1％，碳酸鈣0.5％；最優(yōu)培養(yǎng)條件為：轉(zhuǎn)速180 r/min，接種量2％，裝液量125 ml/250 ml，初始pH值7～7.5，溫度34℃，最佳培養(yǎng)時(shí)間28 h。優(yōu)化條件下對(duì)RY3發(fā)酵培養(yǎng)，采用酸沉淀法提取其抗菌物質(zhì)，得到RY3抗菌粗提物，其對(duì)柑橘綠霉病菌孢子萌發(fā)抑制率為96.92％。為探討RY3抗菌粗提物理化性質(zhì)及機(jī)理，研究熱處理、pH值、紫外線照射、有機(jī)試劑和蛋白酶對(duì)其穩(wěn)定性的影響，結(jié)果顯示，抗菌粗提物具有較強(qiáng)的耐熱、耐有機(jī)試劑