簡介：點(diǎn)擊查看更多益心康對感染CVB3病毒新生乳鼠體外心肌細(xì)胞凋亡及相關(guān)因子Bcl-2-Bax表達(dá)的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：腦白質(zhì)疏松與認(rèn)知功能的關(guān)系及相關(guān)危險(xiǎn)因素的研究CORRELATIONBETWEENLEUKOARAIOSISANDCOGNITIVEFUNCTIONANDRELATEDRISKFACTORS巳寸二級學(xué)科盈絲疸堂論文課題起止時(shí)間至Q圣生旦二至Q三生至旦中國醫(yī)科大學(xué)遼寧2014年5月O1～～““OB“懈均扒砣弱弭錄～～～J；～～～～～～～～～～目～|；～～～；；『～～|；～～～『；一一一一一一一一價(jià)一一一一一￡H札P。一一一一一一一一我一一一一一一一一一一一一一自一一績一一一一一一一一一一的一一成一一要要一一一一一一性一一研一一摘摘語一一一～一新一一科一一著著略一料一一一創(chuàng)獻(xiàn)一問一介論論縮一資一一一究文一期一簡要文文文文言床果論論研考錄述學(xué)謝人摘中英英論前臨結(jié)討結(jié)本參附綜在致個(gè)一二三四五六

簡介：目的探討慢性丙型肝炎CHC患者的Α干擾素受體1IFNAR1基因啟動子的單核苷酸多態(tài)性與干擾素IFNΑ抗HCV治療應(yīng)答之間的關(guān)系。方法1選擇應(yīng)用聚乙二醇干擾素ΑPEGIFNΑ聯(lián)合利巴韋林（RBV）抗病毒治療的慢性丙型肝炎患者73例，治療前行HCVRNA定量、HCV基因型、谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT等檢測，療程48周，根據(jù)應(yīng)答情況分為應(yīng)答組與無應(yīng)答組。2對入選患者IFNAR1啟動子區(qū)基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增及雙向測序。結(jié)果1抗病毒療效在應(yīng)用聚乙二醇干擾素Α聯(lián)合利巴韋林抗病毒治療的73例患者中應(yīng)答組47例6439％，無應(yīng)答組26例3561％，應(yīng)答組與無應(yīng)答組的性別、年齡、治療前ALT及HCV基因型的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而治療前HCVRNAPCR定量比較，兩組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P0003。2在IFNAR1基因啟動子區(qū)測序發(fā)現(xiàn)568、408、77、3四個(gè)位點(diǎn)存在基因多態(tài)性，分別為568GC、408CT、3CT及77GT雙核苷酸重復(fù)序列77GTN，共10種基因單體型，其中單體型568C408C77GT53C和568C408T77GT53T出現(xiàn)頻率最高（52054％和15068％）。3IFNAR1啟動子基因型與抗病毒治療的應(yīng)答率的關(guān)系非568C408C77GT53C者的抗病毒應(yīng)答率為771％，高于568C408C77GT53C者562％X24773P0029568C408T77GT53T者的應(yīng)答率909％，高于非568C408T77GT53T者597％X2392P0048。結(jié)論IFNAR1啟動子基因型為568C408T77GT53T或非568C408C77GT53C者對IFNΑ為基礎(chǔ)的抗病毒治療能產(chǎn)生更好的應(yīng)答，患者IFNAR1啟動子基因多態(tài)性可能與IFNΑ抗HCV治療應(yīng)答有關(guān)。

簡介：為進(jìn)一步研究HBVTR基因在體內(nèi)的表達(dá)以及為該基因在乙型肝炎小動物模型體內(nèi)的抗病毒功能研究和臨床應(yīng)用研究奠定基礎(chǔ)該課題首先構(gòu)建了HBVTR重組腺病毒載體在HEK293細(xì)胞中大量擴(kuò)增至一定滴度后感染正常小鼠然后用免疫組織化學(xué)的方法研究該重組腺病毒在正常小鼠體內(nèi)特別是肝臟的表達(dá)狀況及其毒性反應(yīng)該研究使用ADMAXKITD系統(tǒng)完成HBVTR重組腺病毒載體的構(gòu)建首先是構(gòu)建穿梭質(zhì)粒SHUTTLEPLASBAMHⅠ和HINDⅢ雙酶切PCDNA31TR得到TR基因片段同時(shí)用BGLⅡ和HINDⅢ雙酶切質(zhì)粒載體PDC316然后用T4DNA連接酶將TR基因片段插入質(zhì)粒載體PDC316從而得到穿梭質(zhì)粒PDC316TR使用相同的方法構(gòu)建對照組穿梭質(zhì)粒PDC316TRM、PDC316HEDN和PDC316HBC該課題成功構(gòu)建了乙型肝炎病毒靶向核糖核酸酶基因的重組腺病毒載體ADTR及其對照載體ADTRM、ADHEDN、ADHBC和空的重組腺病毒載體并擴(kuò)增獲得了高滴度的ADTR和ADHEDN重組腺病毒顆粒分別感染正常小鼠后在其肝臟獲得了TR融合蛋白和HEDN蛋白的陽性表達(dá)實(shí)驗(yàn)證明使用人腺病毒載體將目的基因?qū)胄∈蟾渭?xì)胞的基因治療方法是高效的、可行的該研究的結(jié)果為HBVTR重組腺病毒載體下一步在乙型肝炎小動物模型體內(nèi)的抗病毒作用研究以及為探索新的乙型肝炎基因治療方法打下了良好的基礎(chǔ)

簡介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文認(rèn)知行為療法對初中生考試焦慮的干預(yù)研究姓名朱潔申請學(xué)位級別碩士專業(yè)應(yīng)用心理學(xué)指導(dǎo)教師郭兆明201005012揚(yáng)州人學(xué)碩學(xué)位論文ABSTRACTTESTANXIETYISAPSYCHOLOGICALSTATEEXPRESSEDBYDIFFERENTDEGREESOFEMOTIONALREACTIONS，ITISCONSTRAINEDBYINDIVIDUALCOGNITIVEEVALUATIONCAPACITY、PERSONALITYTENDENCYANDOTHERPHYSICALANDPSYCHOLOGICALFACTORS．THETESTANXIETYCHARACTERIZEDBYWORRYANDACTIONSOFDEFENDINGANDESCAPING，ANDISACTIVATEDBYACERTAINTESTSITUATION．TESTANXIETYHASSERIOUSLYAFFECTEDTHEPHYSICALANDMENTALDEVELOPMENTOFJUNIORHIGHSCHOOL’SSTUDENTS．SOTHEINTERVENTIONOFTESTANXIETYBECAMETHEHOTSPOTOFRESEARCHERS．THISSTUDYSELECTEDTHESTUDENTSOFDAGANGSECONDARYSCHOOLOFYANCHENGASSUBJECTS．BASEDONCOMPENSATING。FORTHELACKOFPREVIOUSSTUDIES，THISSTUDYHADASERIESOFINNOVATIONS1THISSTUDYUSEDBECK’STHEORYASAGUIDE，ENGAGEDWITHCOGNITIVEBEHAVIORINTERVENTIONTOTHESTUDENTSOFTESTANXIETY．2INTHEPROCESSOFINTERVENTIONWEUSEDTHEDTRFORMRATIONALLY,STUDYEDJUNIORHIGHSCHOOLSTUDENTS’IRRATIONALAUTOMATICTHOUGHTSABOUTTESTANXIETY．3BASEDONTHEGROUPINTERVENTIONWEHADANINDIVIDUALINTERVENTION．ONTHEONEHANDCANMAKEUPFORLACKOFGROUPINTERVENTION；THEOTHERHAND，CANMAKEAMOREDETAILEDSTUDY,DIGOUTTHEDEEPERPROBLEM．BASEDONTHIS，THEPAPERDESIGNEDTHREESTUDIESTHESTUDYONEINVESTIGATEDTHESTATEOFJUNIORHI曲SCHOOLSTUDENTS’TESTANXIETY,FINDEDOUTTHECHARACTERISTICSOFJUNIORHIGHSCHOOLSTUDENTS’TESTANXIETYANDCHOOSEDAPPROPRIATESUBJECTS；THESTUDYTWOENGAGEDWITHCOGNITIVEBEHAVIORGROUPINTERVENTION，INVESTIGATEDTHEEFFECTOFGROUPINTERVENTION；THESTUDYTHREEENGAGEDWITHCOGNITIVEBEHAVIORINDIVIDUALINTERVENTIONTO5SUBJECTS，INVESTIGATEDTHEEFFECTOFINDIVIDUALINTERVENTIONONTHEBASISOFCOMPENSATINGFORTHELACKOFSTUDYTWO．THERESULTSOFTHISSTUDYSHOWEDTHAT1TESTANXIETYOFJUNIORHIGHSCHOOLSTUDENTSWASVERYSERIOUS．THESCORESOFTESTANXIETYSCALESHOWEDTHATGRADE3WASTHEHIGHEST，F(xiàn)OLLOWEDBYGRADE1，GRADE2WAS

簡介：A組輪狀病毒是造成全世界嬰幼兒嚴(yán)重腹瀉的最主要病原。最新統(tǒng)計(jì)資料表明，全世界5歲以下兒童每年約有1億3千8百萬患輪狀病毒感染，其中約454，000705000例死亡82％的死亡病例發(fā)生在發(fā)展中國家。目前，輪狀病毒尚無特效治療藥物及安全有效的預(yù)防性疫苗，對輪狀病毒感染的免疫保護(hù)機(jī)制的進(jìn)一步研究是當(dāng)前研究的重點(diǎn)與難點(diǎn)。在小鼠輪狀病毒感染模型中的大量研究表明，TCRΑΒCD8T細(xì)胞在抗輪狀病毒原發(fā)感染及再次感染中具有重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，在無輪狀病毒抗體的情況下，輪狀病毒感染的成年小鼠的CD8T細(xì)胞可被動保護(hù)乳鼠，并且可介導(dǎo)重癥免疫缺陷小鼠清除慢性輪狀病毒感染；細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞CYTOTOXICTLYMPHOCYTES，CTL缺陷小鼠Β2MICROGLOBULINKNOCKOUTMICE及其他封閉了CD8T細(xì)胞的小鼠清除輪狀病毒感染的時(shí)間延遲14天；B細(xì)胞缺陷JHD基因敲除小鼠可清除輪狀病毒的原發(fā)感染，封閉CD8T細(xì)胞后則轉(zhuǎn)為慢性感染；B細(xì)胞缺陷小鼠原發(fā)感染18天后可介導(dǎo)幾乎完全的免疫保護(hù)，6周、5個(gè)月及8個(gè)月仍能介導(dǎo)部分的免疫保護(hù)，但封閉CD8T細(xì)胞后，在原發(fā)輪狀病毒感染13天、18天、6周及5個(gè)月再次攻擊則會轉(zhuǎn)為輪狀病毒慢性感染，而封閉TCRΓΔT細(xì)胞幾乎無影響，表明TCRΑΒCD8T細(xì)胞介導(dǎo)了對輪狀病毒再次感染的免疫保護(hù)。進(jìn)一步研究顯示，輪狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP6與VP7是其CTL效應(yīng)的主要靶標(biāo)。VP6是輪狀病毒的組抗原，其含量占輪狀病毒蛋白總量的51％，同組輪狀病毒VP6的氨基酸序列高度保守8799％；VP7是輪狀病毒主要的外殼結(jié)構(gòu)蛋白，約占病毒蛋白總量的30％，與此同時(shí)，VP7不但可引起極強(qiáng)的CTL效應(yīng)，并且與輪狀病毒不同血清型具有完全的交叉反應(yīng)。盡管現(xiàn)已有猴源輪狀病毒SA11G3及牛源輪狀病毒UKG6的鼠源限制性CTL表位鑒定方面的報(bào)道，但均不能用于人體內(nèi)輪狀病毒感染中CD8T細(xì)胞的研究。目前，CD8T細(xì)胞在人體內(nèi)輪狀病毒感染中的地位與作用如何，尚不明了。至今尚未見輪狀病毒HLAⅠ類限制性CTL表位鑒定方面的報(bào)道，這在一定程度上阻礙了人體內(nèi)輪狀病毒感染中CD8T細(xì)胞的相關(guān)研究。既往研究還表明，G1血清型是全世界所有輪狀病毒流行株中最主要的流行血清型，在中國、北美洲、歐洲和澳大利亞等地區(qū)，G1血清型超過了70％；HLAA2是所有人種中最普遍的HLA表型，其中HLAA21是其優(yōu)勢表型，如在白種人中，HLAA21占HLAA2的90％以上。大量關(guān)于輪狀病毒感染的免疫保護(hù)機(jī)制研究均用實(shí)驗(yàn)小鼠作為動物模型，但其本身存在很大局限，如人源輪狀病毒對其不敏感、輪狀病毒致腹瀉的敏感期特別短出生后約15天、小鼠本身不同品系的影響及病理進(jìn)程的差異等。因此，用實(shí)驗(yàn)小鼠作為模型對輪狀病毒的研究只能起到有限的參考。大型動物如牛、豬對人源輪狀病毒相對敏感，感染后可致臨床腹瀉癥狀，同時(shí)致腹瀉的敏感期長豬出生后可長達(dá)6周。相對于其它動物模型，以豬作為輪狀病毒的感染模型還具有如下優(yōu)勢1具有和嬰幼兒相似的消化道生理學(xué)特征、被動免疫類型母乳IGA與免疫發(fā)生過程；2豬的胎盤是母源抗體的天然屏障，出生時(shí)無初乳喂養(yǎng)小豬的免疫狀態(tài)就象一片處女地，便于研究輪狀病毒感染后的原發(fā)免疫反應(yīng)。國外有用悉生豬GNOTOBIOTICPIGLETS，GNP作為輪狀病毒感染模型方面的研究報(bào)道，并取得了較大進(jìn)展。但因其飼養(yǎng)費(fèi)用昂貴，繁殖能力弱，作為實(shí)驗(yàn)動物其基因純合度低等因素，限制了在輪狀病毒研究中的進(jìn)一步廣泛應(yīng)用。小型豬是我國自行選育的特有品種，又稱微型豬。它在分類學(xué)上與普通家豬相同，同屬豬屬動物，野豬科。我國小型豬品種資源豐富，同時(shí)大都原產(chǎn)于我國南方一些偏遠(yuǎn)的山區(qū)，長期的近親繁殖使其具有體型矮小、性成熟早、繁殖力強(qiáng)及基因純度高等優(yōu)點(diǎn)。因此，小型豬作為實(shí)驗(yàn)動物受到了國內(nèi)外有關(guān)學(xué)者的關(guān)注和重視。另一方面，CD8T細(xì)胞在輪狀病毒感染的大型動物如豬體內(nèi)的地位與作用如何，腸粘膜及其他不同部位的CD8T細(xì)胞功能狀態(tài)是否存在差異，目前尚不清楚。基于以上研究背景，我們進(jìn)行了如下三方面的研究1采用計(jì)算機(jī)軟件預(yù)測與體內(nèi)外功能實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的反向免疫學(xué)方法，鑒定人源輪狀病毒W(wǎng)A株G1VP6與VP7的HLAA21限制性CTL表位；2用我國自行選育的特有品種小型豬，建立人源輪狀病毒感染的腹瀉模型；3用胞內(nèi)細(xì)胞因子IFNΓ染色，初步檢測小型豬人源輪狀病毒感染的腹瀉模型中，外周血及其他不同組織中CD8T細(xì)胞產(chǎn)生IFNΓ的頻率。在表位鑒定方面，本研究從以下幾方面進(jìn)行首先，預(yù)測并測定肽與HLAA21的結(jié)合能力。應(yīng)用表位親和力預(yù)測軟件SYFPEITHI和BIMAS及蛋白酶切位點(diǎn)預(yù)測軟件PAPROC和FRAGPREDICT分別預(yù)測VP6與VP7HLAA21限制性CTL表位，應(yīng)用分子模擬對候選肽進(jìn)行分子建模，體外肽T2結(jié)合實(shí)驗(yàn)檢測肽與HLAA21的結(jié)合親和力與結(jié)合穩(wěn)定性。然后，檢測待測肽能否有效激活人T細(xì)胞庫中肽特異性T細(xì)胞前體以及能否被人體內(nèi)的細(xì)胞有效加工提呈。用待測肽負(fù)載的DC反復(fù)刺激自源性HLAA21的健康人外周血淋巴細(xì)胞PERIPHEBLOODLYMPHOCYTESPBL，然后胞內(nèi)因子染色檢測IFNΓ產(chǎn)生頻率，標(biāo)準(zhǔn)51CR檢測殺傷活性。最后，檢測輪狀病毒能否在體誘導(dǎo)產(chǎn)生待測肽特異性的CTL反應(yīng)。用輪狀病毒免疫HLAA21KB轉(zhuǎn)基因小鼠，ELISPOT及標(biāo)準(zhǔn)51CR檢測效應(yīng)CTL的IFNΓ產(chǎn)生頻率及其殺傷活性。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，來源于VP6結(jié)構(gòu)蛋白的肽P340348TLLANVTAV和VP7結(jié)構(gòu)蛋白的肽P1826LLNYILKSV與HLAA21呈高親和力結(jié)合FI266與383，同時(shí)能形成穩(wěn)定的肽HLAA21復(fù)合物DC50大于或等于8H。體外功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，HLAA21健康成年人的PBL能誘導(dǎo)產(chǎn)生很強(qiáng)的P340348與P1826特異性的CTL反應(yīng)。P340348誘導(dǎo)產(chǎn)生的CTL其產(chǎn)生IFNΓ的CD8T頻率分別達(dá)1400％、807％及1478％，同時(shí)能特異性殺傷P340348負(fù)載的T2及輪狀病毒感染的CACO2HLAA21，其殺傷率分別為74％及42％效靶501；P1826刺激產(chǎn)生的CTL產(chǎn)生IFNΓ的CD8T頻率分別達(dá)2015％及917％，特異性殺傷P1826負(fù)載的T2及輪狀病毒感染的CACO2的殺傷率分別達(dá)52％及37％效靶501。同時(shí)，上述CTL的殺傷活性均能被抗HLAA21的單克隆抗體有效抑制。HLAA21KB轉(zhuǎn)基因小鼠的體內(nèi)功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，輪狀病毒能在體誘導(dǎo)產(chǎn)生P340348與P1826特異性的CTL反應(yīng)。在體誘導(dǎo)產(chǎn)生的CTL具有劑量依賴性的IFNΓ產(chǎn)生能力及肽特異性的殺傷。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，P340348與P1826為輪狀病毒的HLAA21限制性CTL表位。此表位的鑒定將為人體內(nèi)輪狀病毒感染的免疫保護(hù)機(jī)制研究提供新思路與新手段，同時(shí)也可為輪狀病毒疫苗研制及評估提供新的侯選靶標(biāo)。人源輪狀病毒的小型豬腹瀉模型建立方面。首先，我們用ELISA與RTPCR相結(jié)合鑒定了重慶地區(qū)2004年12月至2005年3月期間腹瀉兒童的糞便標(biāo)本25例，其中G1血清型22例，G3血清型3例。然后我們用野生型人源輪狀病毒G1與G3血清型口服接種不同日齡的小型豬。結(jié)果表明，35日齡小型豬均出現(xiàn)了典型的臨床腹瀉癥狀；糞便中輪狀病毒抗原排泄可平均持續(xù)57天；小腸組織可見明顯的病理變化，同時(shí)用免疫熒光檢測方法可在小腸組織中檢測到特異性輪狀病毒抗原；透射電鏡進(jìn)行觀察，在小腸組織的超薄切片中可見到大量的輪狀病毒顆粒。3035日齡小型豬可出現(xiàn)明顯腹瀉臨床癥狀，糞便中輪狀病毒抗原排泄可持續(xù)47天；5660日齡小型豬接種野生型人源輪狀病毒G1血清型后，均未出現(xiàn)典型的腹瀉癥狀，但可持續(xù)排毒23天。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，小型豬可作為人源輪狀病毒感染的理想腹瀉模型。最后，我們用胞內(nèi)因子IFNΓ染色的方法，初步檢測小型豬人源輪狀病毒感染的腹瀉模型中外周血、脾、肝、肺部淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)及派氏淋巴結(jié)產(chǎn)生IFNΓ的CD8T細(xì)胞頻率。結(jié)果表明，35日齡小型豬各組織中的CD8T細(xì)胞均不能有效產(chǎn)生IFNΓ。但其CD8T細(xì)胞是否可產(chǎn)生其它細(xì)胞因子或具有細(xì)胞毒效應(yīng)，其它日齡小型豬各組織中CD8T細(xì)胞的功能狀態(tài)如何，目前仍在進(jìn)一步研究中。

簡介：點(diǎn)擊查看更多參甲榮肝丸干預(yù)乙肝病毒復(fù)制的臨床研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：乙型肝炎HEPATITISBVIRUS，HBV是我國當(dāng)前最常見的一種傳染病，能引發(fā)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。原發(fā)性肝細(xì)胞癌HCC是我國最常見的惡性腫瘤之一，嚴(yán)重威脅著人們的健康。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查統(tǒng)計(jì)，HBV感染者發(fā)生HCC的幾率較正常人高100倍，HBV致癌的具體機(jī)制目前尚不明確。既往研究發(fā)現(xiàn)乙型肝炎病毒X蛋白（HEPATITISBVIRUSXPROTEIN）可能在增強(qiáng)HBV復(fù)制和HCC發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。HBX是一個(gè)多功能蛋白，在細(xì)胞內(nèi)具有轉(zhuǎn)錄激活、導(dǎo)致細(xì)胞凋亡、激活多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、干擾細(xì)胞DNA修補(bǔ)等特性，可能在HCC的發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移階段，通過多種尚未明確的機(jī)制，直接或間接地發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。探討HBX蛋白結(jié)構(gòu)和功能是當(dāng)前HBV研究的重要熱點(diǎn)之一。本研究利用ECOLI原核表達(dá)系統(tǒng)對目前己知的基因型AI的HBX進(jìn)行非融合表達(dá)，建立了一套穩(wěn)定的、適用于不同基因型的RHBX表達(dá)、純化和復(fù)性方法，獲得了9種HBV基因型的高純度重組HBX。并以此為基礎(chǔ)，制備了41株ANTIHBX單克隆抗體。通過表位分析、單抗性質(zhì)鑒定和一系列反應(yīng)性評估實(shí)驗(yàn)，篩選出了適用于蛋白印跡、免疫共沉淀和免疫熒光等功能性檢測的高親和力ANTIHBX單抗。借助ANTIHBX單抗，運(yùn)用免疫共沉淀方法在轉(zhuǎn)染HBV13倍基因組的HEPG2細(xì)胞中證實(shí)HBX可通過與BCL2和BCLXL的直接相互作用導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和壞死。綜上所述，本研究建立的重組HBX蛋白表達(dá)純化方法為進(jìn)一步解析HBX的結(jié)構(gòu)奠定了重要基礎(chǔ)，發(fā)展的高親和力ANTIHBX單抗為HBX的功能研究提供了關(guān)鍵技術(shù)工具。

簡介：人類致病病毒嚴(yán)重危害人類的健康和生命，目前的抗病毒藥物在減少病毒的致死率和發(fā)病率方面發(fā)揮了積極的作用，但同時(shí)存在多方面的缺陷。1、大部分藥物基于體內(nèi)細(xì)胞和病毒的酶或蛋白為靶標(biāo)，對正常人體細(xì)胞也不可避免具有較大殺傷性。2、對于一些非自動免疫病毒疾病如HIV、HBV和HCV，由于無法徹底清除體內(nèi)藥物屏障區(qū)的病毒，只得長期甚至終身用藥。3、臨床上大多數(shù)藥物生物利用度低，要達(dá)到一定的療效必須擴(kuò)大用藥劑量，長期高劑量的用藥，使得目前臨床應(yīng)用的藥物無一例外產(chǎn)生致命的耐藥性。為了改善藥物口服生物利用度，本研究以PMPA、PMEA和GCV為先導(dǎo)化合物，合成了3個(gè)系列共17個(gè)目標(biāo)化合物，并通過1HNMR、13CNMR和MS確證了其結(jié)構(gòu)。通過細(xì)胞培養(yǎng)法測定了化合物112的體外抗病毒活性和抗病毒譜，結(jié)果表明，目標(biāo)化合物對逆轉(zhuǎn)錄病毒HIV1和HBV均顯示了較強(qiáng)作用，其中，PMPA和PMEA的十六烷氧丙基酯和十八烷氧乙基酯的抗HIV1和抗HBV活性均強(qiáng)于前體物替諾福韋，十四烷氧丙基酯的抗HIV1活性較替諾福韋強(qiáng)，但抗HBV活性弱于或相當(dāng)于替諾福韋。測定了體外抗病毒活性較好的化合物2、4和6灌胃給藥后小鼠血清在人傳代T淋巴細(xì)胞MT4細(xì)胞培養(yǎng)中的抗HIV1作用，選取替諾福韋酯為陽性對照藥?；衔?、4、6和對照藥的給藥劑量為300MGKG，灌胃后45MIN時(shí)5％小鼠血清在MT4細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)對HIV1ⅢBP25抗原的抑制率分別938％、927％、952％和866％，4H時(shí)的抑制率分別為886％、535％、953％和32％。即在抗HIV1體內(nèi)替代模型試驗(yàn)中，化合物2、4和6的抑制HIV1活性強(qiáng)于對照藥替諾福韋酯，活性持續(xù)時(shí)間均明顯長于對照藥替諾福韋酯。三者在灌胃4H時(shí)5％小鼠血藥活性都在50％以上，化合物2和6灌胃給藥后4H時(shí)的活性與45MIN時(shí)沒有明顯變化。進(jìn)一步考察了化合物2的急性毒性試驗(yàn)，結(jié)果顯示小鼠靜脈注射LD50小于150MGKG，灌胃給藥的LD50大于2300MGKG。從目前研究結(jié)果看，化合物2、4和6有較大的潛力進(jìn)一步研究開發(fā)成為臨床抗病毒藥物。

簡介：中南大學(xué)碩士學(xué)位論文SURVIVIN與高危型人乳頭瘤病毒在宮頸癌及癌前病變中的表達(dá)和意義姓名李婷申請學(xué)位級別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師劉鳳英20040501碩士學(xué)位論文英文摘要ABSTRACTOBJECTIVETOINVESTIGATETHEEXPRESSIONOFSURVIVINANDHIGHRISKHUMANPAPILLOMAVIRUSINCERVICALPREMALIGNANT1ESIONANDINVASIVECARCINOMA。ANDEXPLORETHEIRROLEINTHEPATHOGENESISOFCERVICALCARCINOMA．METHODSIN76PATITENTSOFCERVICALINTRAEPITHELIALNEOPLASIAANDCERVICALCARCINOMA，INCLUDING23CINI．22CINII～I(xiàn)IIAND31INVASIVECARCINOMA，THEEXPRESSIONSOFSURVIVINWEREEXAMINEDBYIMMUNOHISTOCHEMICALASSAY；ANDTHEINFECTIONRATESOFHIGH．RISKHPVINCLUDINGHPVL6，18，3L，33，52，58WEREMEASUREDBYTOUCHDOWNPOLYMERASECHAINREACTIONPCR，BOTHOFTHETWOMETHODS．10NORMALCERVICALSPECIMENSWERETREATEDASCONTR01．RESULTS①THEEXPRESSIONRATESOFSURVIVININNORMALCERVICALEPITHELIA，CINI，CINIIIIIANDINVASIVECARCINOMAWEREO．0％0／10，30．4％7／23，63．6％14／22AND83．8％26／31RESPECTIVELY；劣THEEXPRESSIONOFSURVIVININCINII～HIANDINVASIVECARCINOMAWASSIGNIFICANTLYHIGHERTHANTHATINNORMALCERVICALEPITHELIAANDCINIRJPO．05，NORWASTHEDIFFERENCEBETWEENCINII～I(xiàn)IIANDINVASIVECARCINOMAP0．05；⑧SURVIVINEXPRESSIONTENDEDTOINCREASEALONGWITHTUMORPROGRESSIONP0．05；⑤HIGHRISKHPVPOSITIVERATESINNORMALCERVICALEPITHELIA，CINI，CINII～ⅡIANDINVASIVECARCINOMAWERE10．0％1／1∞，26．1％6／23，77．3％17／22AND87．1％27／31RESPECTIVELY；9THEEXPRESSIONOFHIGHRISKHPVINCINIIIIIANDINVASIVECARCINOMAWASSIGNIFICANTLYHIZHERTHANTHATINNORMALCERVICALEPIMELIAANDCINIRPO．05；⑦THEPOSITIVERATEOFHI曲一RISKHPVINCREASEDALONGWITHTUMORPROGRESSION_P0．05；⑧THE

簡介：中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名墨斐日期中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解中國醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬中國醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為中國醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期薯簍垡毫叢ⅥFI，占中文論著摘要沈陽市部分干部人群輕度認(rèn)知功能障礙的現(xiàn)狀及影響因素分析目的探討沈陽市60歲以上部分干部人群輕度認(rèn)知功能障礙MILDCOGNITIVEIMPAIRMENT，MCI的現(xiàn)狀及其影響因素。方法通過簡易智能精神狀態(tài)量MINIMENTALSTATEEXAMINATION，瑚SE、畫鐘試驗(yàn)CLOCKDRAWINGTEST，CDT、日常生活能力量表ACTIVITYOFDAILYLIVINGSCALE，ADL及臨床癡呆評定量表CLOCKDRAWINGTEST，CDT對368例沈陽市60歲以上部分干部人群的認(rèn)知功能進(jìn)行評價(jià)，并調(diào)查了性別、年齡、文化程度、婚姻狀況、體育鍛煉、高血壓病、糖尿病、高脂血癥、冠心病、腦卒中、吸煙等對認(rèn)知功能的影響。應(yīng)用SPSSL70軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。多士甲寶口7代調(diào)查的60歲以上368名老年人中輕度認(rèn)知障礙MCI的發(fā)病率為2174％。MCI患者者存在多項(xiàng)認(rèn)知功能的損害，在MMSE總分、CDT得分、延遲記憶、視空間、注意和計(jì)算力以及執(zhí)行功能方面表現(xiàn)出不同程度的下降，與早期阿爾茨海默病有相類似的神經(jīng)心理特點(diǎn)。單因素LOGISTIC回歸分析顯示NC組與MCI組關(guān)于年齡、文化程度、婚姻狀況、體育鍛煉、冠心病方面的統(tǒng)計(jì)結(jié)果差異均有顯著性；進(jìn)行多因素二元非條件LOGISTIC回歸分析，最終年齡、文化程度、婚姻狀況、體育鍛煉進(jìn)入回歸方程，其OR值及95％可信區(qū)間依次為215811324114、17371003301、250313174754、305116275722。結(jié)論我們的資料顯示沈陽城區(qū)60歲以上干部人群輕度認(rèn)知障礙的患病率高于國

簡介：第一部分臨床研究一、老年病人非心臟手術(shù)后認(rèn)知功能障礙的多中心研究結(jié)論老年病人POCD主要表現(xiàn)為記憶力與計(jì)算能力的下降。二、血清S100ΒΒ和NSE蛋白變化與老年病人腹部手術(shù)后認(rèn)知功能障礙的關(guān)系結(jié)論老年病人腹部手術(shù)后血清S100ΒΒ蛋白出現(xiàn)二次升高，分別在術(shù)畢和術(shù)后48H。老年病人腹部手術(shù)后POCD的發(fā)生與血清S100ΒΒ蛋白的變化有密切關(guān)系，POCD組術(shù)后6H內(nèi)S100ΒΒ蛋白水平明顯高于非POCD組。血清S100ΒΒ蛋白可作為評估老年病人腹部手術(shù)后發(fā)生POCD的重要指標(biāo)。三、老年病人停跳和不停跳冠脈搭橋術(shù)后血清S100ΒΒ、NSE蛋白變化與中樞神經(jīng)功能障礙的關(guān)系結(jié)論老年病人無論ONPUMP還是OFFPUMP技術(shù)下行冠脈搭橋術(shù)，血清NSE和S100ΒΒ蛋白水平術(shù)后比術(shù)前顯著升高，NSE術(shù)后6H最高，S100ΒΒ術(shù)畢最高。第二部分實(shí)驗(yàn)研究一、術(shù)中低血壓對老年大鼠術(shù)后認(rèn)知功能及腦內(nèi)S100Β蛋白表達(dá)的影響結(jié)論術(shù)中失血性低血壓能引起老年大鼠腹部手術(shù)后認(rèn)知功能下降以及腦細(xì)胞S100Β蛋白在術(shù)后1D內(nèi)的強(qiáng)陽性表達(dá)，表達(dá)高峰在術(shù)后6H。結(jié)論大鼠閉胸式血液稀釋體外循環(huán)模型可用于體外循環(huán)腦損傷病理生理及其保護(hù)機(jī)制的基礎(chǔ)研究。

簡介：天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文高同型半胱氨酸血癥與腦小血管病及認(rèn)知功能相關(guān)性研究姓名劉海艷申請學(xué)位級別碩士專業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師張哲成20070501天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文測驗(yàn)CDIS評分SVD組明顯低于對照組PO．05，而即刻記憶與對照組沒有明顯差異．對三亞組認(rèn)知功能進(jìn)一步分析，結(jié)果顯示ⅢSE總評分和畫鐘測驗(yàn)CDIS評分LALI組低于LA組，LA組低于LI組；單項(xiàng)認(rèn)知功能定向功能和短時(shí)記憶功能評分LALI組與L組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異尸0．241，，0．262，均低于LI組尸。0．024，JP一0．003．注意力及計(jì)算能力，語言功能評分LALI組低于LA組和LI組，一0．000，JP0．008，而LA組、LI組此兩項(xiàng)評分統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性不明顯J口；0．535，尸；0．609，三組間即刻記憶無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義．5．將自變量HCY、年齡、性別、文化水平．抽煙顆數(shù)．血壓．血糖、腎功能逐步法進(jìn)入多元線性回歸分析，應(yīng)變量為MMSE分?jǐn)?shù)和CDIS評分，探討HCY與認(rèn)知功能的關(guān)系．得出公式SVD患者M(jìn)MSE分?jǐn)?shù)45．7717．314LOGHCYO．171X年齡；CDIS評分一31．2895．325XLOGHCY一0．122X年齡。6．為進(jìn)一步明確HCY水平升高是否對認(rèn)知功能有獨(dú)立危險(xiǎn)性，將單因素分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義變量帶人回歸方程，進(jìn)行多因素LOGISTIC逐步回歸分析．結(jié)果顯示在校正年齡，文化程度，卒中史，白質(zhì)疏松和腔梗等相關(guān)因素后HCY水平升高是認(rèn)知功能損害的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，具體對MMSE總評分，定向功能、語言功能以及反映視空間功能動作的計(jì)劃性和執(zhí)行功能的CLOCK畫鐘測驗(yàn)均有獨(dú)立的危險(xiǎn)性，其OR值分別為1．044，1．057，1．040，1．251．而在校正年齡．文化程度，卒中史等相關(guān)因素后，HEY升高對注意力及計(jì)算力和短時(shí)記憶的損害沒有獨(dú)立性．結(jié)論1．HCY水平的升高是SVD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素．2．相對于腔梗HCY水平升高可能是缺血性白質(zhì)疏松更危險(xiǎn)的因素．3．HCY水平升高是血管性認(rèn)知功能損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，具體來說是總體認(rèn)知功能．定向功能、語言功能以及視空間功能、動作的計(jì)劃性和執(zhí)行功能損害的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，而對注意力及計(jì)算力損害和短時(shí)記憶無獨(dú)立危險(xiǎn)性．4．合并腦白質(zhì)疏松的腔梗患者認(rèn)知功能損害更嚴(yán)重。Ⅱ

簡介：目的本研究旨在探討寧心顆粒的臨床療效及其作用機(jī)制。通過臨床觀察研究寧心顆粒對病毒性心肌炎患兒的治療作用；通過柯薩奇B3病毒感染小鼠病毒性心肌炎模型，研究寧心顆粒的抗病毒、抗氧化損傷及減輕穿孔素介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用，為寧心顆粒治療病毒性心肌炎提供理論依據(jù)。方法臨床研究部分將60名符合1999年9月昆明全國小兒心肌炎、心肌病會議修定方案診斷標(biāo)準(zhǔn)的患兒隨機(jī)分為兩組寧心顆粒組和西藥對照組各30例，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析兩組患兒在性別、年齡、病情等方面無顯著性差異。治療組給予寧心顆?？诜瑢φ战M給予能量合劑ATP、輔酶、維生素C、肌苷及病毒唑靜脈滴注。觀察治療前后臨床癥狀、血清學(xué)指標(biāo)CKMB和CTNI、24小時(shí)動態(tài)心電圖早博次數(shù)、超聲心動圖左室舒張末期內(nèi)徑LVEDD以及左室射血分?jǐn)?shù)LVEF的變化。實(shí)驗(yàn)研究部分選用雄性BALBC純系小鼠40只，隨機(jī)分為空白對照組10只、模型組10只、黃芪顆粒組10只、寧心顆粒組10只?？瞻讓φ战M接種不含病毒的生理鹽水01ML，模型組、黃芪顆粒組、寧心顆粒組均腹腔接種108TCID50ML的柯薩奇病B3NANCY株病毒液01ML。1小時(shí)后，空白對照組和模型組給予01ML的生理鹽水灌胃，黃芪顆粒組給予01ML的黃芪顆粒溶液01ML灌胃，寧心顆粒組給予01ML的寧心顆粒溶液01ML灌胃。10天后，摘眼球取血處死，無菌取心臟，分別觀察和測定以下指標(biāo)①心臟組織作常規(guī)HE染色病理切片，光鏡下觀察組織形態(tài)學(xué)改變，計(jì)算心肌病理積分；②RTPCR測定心肌組織CVB3MRNA表達(dá)水平；③RTPCR測定心肌組織PFP3MRNA表達(dá)水平；④測定SOD、MDA、CKMB血清學(xué)指標(biāo)。結(jié)果臨床研究證明①寧心顆粒組的臨床有效率、早搏有效率優(yōu)于西藥對照組；②在臨床癥狀方面，胸悶、心悸、氣短、乏力改善優(yōu)于西藥對照組；多汗、頭暈兩組比較無明顯差別。③血清學(xué)指標(biāo)CKMB、CTNI寧心顆粒組治療前后比較CKMB、CTNI均明顯降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；治療后寧心顆粒組與西藥對照組比較差異顯著。④在超聲心動圖方面寧心顆粒組治療前后比較左室舒張末期內(nèi)徑LVEDD縮小有顯著意義；西藥對照組治療后與治療前比較LVEDD縮小差異不明顯；治療后寧心顆粒組與西藥對照組比較差異明顯；寧心顆粒組治療前后比較左室射血分?jǐn)?shù)LVEF升高有顯著差異；西藥對照組治療前后比較LVEF升高差異不明顯；治療后寧心顆粒組與西藥對照組比較差異明顯。實(shí)驗(yàn)研究證明①心肌病理改變空白對照組小鼠心肌組織形態(tài)均正常，模型組、黃芪顆粒組、寧心顆粒組心肌炎發(fā)生率為100％，其中模型組心肌病理改變最明顯，寧心顆粒組與模型組比較差異顯著，黃芪顆粒組與模型組比較差異明顯，寧心顆粒與黃芪顆粒組比較差異不明顯。②RTPCR測定心肌組織CVB3MRNA、PFPMRNA表達(dá)水平空白對照組CVB3MRNA、PFPMRNA不表達(dá)，模型組表達(dá)最高，黃芪顆粒組次之，寧心顆粒組最低。兩項(xiàng)指標(biāo)寧心顆粒組表達(dá)明顯低于模型組，黃芪顆粒組表達(dá)降低與模型組比較有意義，寧心顆粒組表達(dá)低于黃芪顆粒組，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③血清學(xué)指標(biāo)SOD、MDA、SOD水平寧心顆粒組較模型組提高顯著，黃芪顆粒組較模型組提高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，寧心顆粒組較黃芪顆粒組比較無顯著差異；MDA水平寧心顆粒降低較模型組明顯，黃芪顆粒降低較模型組明顯，寧心顆粒組較黃芪組比較無顯著差異。結(jié)論1寧心顆粒能明顯改善病毒性心肌炎患者的臨床癥狀和體征，減少早搏，降低血清學(xué)指標(biāo)CKMB、CTNI，縮小左室舒張末期內(nèi)徑LVEDD，提高左室射血分?jǐn)?shù)LVEF，對病毒性心肌炎有顯著療效。2寧心顆粒對CVB3誘導(dǎo)的病毒性心肌炎小鼠心肌組織CVB3MRNA病毒復(fù)制有明顯的抑制作用，可減少病毒對心肌細(xì)胞的直接破壞作用，減輕心肌病理損害程度，具有抗病毒作用。3寧心顆?？梢韵拗芇FP介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用造成的免疫損傷，具有免疫調(diào)節(jié)作用。4寧心顆?？梢蕴岣卟《拘孕募⊙仔∈骃OD的含量，降低MDA的含量，具有抗氧化損傷作用。5寧心顆粒安全有效，無毒副作用。

簡介：浙江大學(xué)博士學(xué)位論文大鼠胚肝細(xì)胞肝內(nèi)移植和慢病毒載體LENTILACZ的表達(dá)姓名陳繼達(dá)申請學(xué)位級別博士專業(yè)外科學(xué)（普通外科）指導(dǎo)教師蔡秀軍20050501浙江大學(xué)博士學(xué)位論文第二部分雌性SD大鼠予倒千里光堿預(yù)處理后，慢病毒載體LENLILACZ轉(zhuǎn)導(dǎo)的大鼠胚胎肝細(xì)胞通過門靜脈注射移植到大鼠肝臟，檢測細(xì)胞移植后8周內(nèi)大鼠肝臟LACZ基因的表達(dá)，以及PCR檢測肝組織SRY基因Y染色體標(biāo)記基因明確移植的胚肝細(xì)胞在體內(nèi)是否增殖。在第一部分中，慢病毒載體表達(dá)質(zhì)粒PLENTILACZ和包裝質(zhì)粒復(fù)合物通過脂質(zhì)體共轉(zhuǎn)染方法在293FT細(xì)胞中包裝成病毒顆粒，在293細(xì)胞中測定病毒滴度，其滴度范圍從8105TU／ML到17106TU／ML。膠原酶消化法分離胎齡14天SD大鼠的胚肝細(xì)胞，體外培養(yǎng)的胚肝細(xì)胞部分呈克隆樣生長形成細(xì)胞集落。免疫組化檢測部分細(xì)胞AFP表達(dá)陽性，提取細(xì)胞總RNA作RTPCR檢測，AFP表達(dá)陽性。免疫組化和RTPCR結(jié)果說明分離的胚肝細(xì)胞含有胚肝上皮祖細(xì)胞。LERTTI1AEZ載體以MO為10轉(zhuǎn)導(dǎo)體外培養(yǎng)不同時(shí)間的胚肝細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)L天時(shí)轉(zhuǎn)導(dǎo)效率最高，LACZ表達(dá)陽性細(xì)胞比例為263％。在胚肝細(xì)胞培養(yǎng)的第二天，LENTILACZ載體以不同MOI轉(zhuǎn)導(dǎo)胚肝細(xì)胞，結(jié)果表明轉(zhuǎn)導(dǎo)效率隨著MOI提高而升高。在第二部分中，倒千里光堿腹腔注射預(yù)處理雌性SD大鼠后，行2／3肝葉切除同時(shí)通過門靜脈注射肝內(nèi)移植2105個(gè)LENTILACZ載體感染的胚肝細(xì)胞。分別在紹胞移植后1周、2周、4周和8周XGAL檢測大鼠肝臟組織中LACZ基因表達(dá)，提取肝組織基因組DNA作PCR檢測肝組織中SRY基因。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞移植后1周時(shí)少量肝細(xì)胞LACZ表達(dá)陽性，在2周和4周后LACZ表達(dá)陽性的肝細(xì)胞明顯增多，LACZ表達(dá)陽性的肝細(xì)胞約為1015％，而在8周后全部肝細(xì)胞都不表達(dá)LACZ。在細(xì)胞移植后8周內(nèi)肝組織基因組DNAPCR檢測SRY基因都為陽性。本實(shí)驗(yàn)得出如下結(jié)論1建立了胎齡14天SD大鼠胚肝細(xì)胞分離、體外培養(yǎng)和鑒定方法。2。慢病毒載體LENDLACZ能夠轉(zhuǎn)導(dǎo)體外培養(yǎng)的胚肝細(xì)胞，在胚肝細(xì)胞體外培養(yǎng)L天和MOI為10時(shí)轉(zhuǎn)導(dǎo)效率為263％。3建立了胚肝細(xì)胞肝內(nèi)移植的倒千里光堿傭葉切除動物模型。