簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多核苷類似物預(yù)防免疫抑制狀態(tài)下乙型肝炎病毒再激活的臨床分析.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的構(gòu)建能在哺乳動(dòng)物細(xì)胞得到外源基因高表達(dá)的攜帶HIF1ΑALA402ALA564基因的重組腺病毒載體，為HIF1Α基因及其突變型對(duì)缺血性心臟病的血管新生作用及以后的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。方法采用分子克隆技術(shù)，在業(yè)已完成的PSHUTTLE2HIF11ΑALA564的基礎(chǔ)上，用連續(xù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR定點(diǎn)突變的方法將其第402位脯氨酸密碼子CCA突變?yōu)楸彼崦艽a子GCA，構(gòu)建成雙突變HIF11Α真核表達(dá)載體PSHUTTLE2HIF1ΑALA402ALA564，以PISCEⅠ和ⅠCEUⅠ雙酶切重組穿梭質(zhì)粒，獲得含有突變型HIF1ΑCDNA的表達(dá)盒，通過(guò)體外連接法與線性化的腺病毒骨架質(zhì)粒ADENOXVIRALDNA連接，重組成PADENOHIF1ΑALA402ALA564腺病毒質(zhì)粒，經(jīng)酶切及測(cè)序鑒定正確后，在HEK293細(xì)胞中包裝成為重組ADENOHIF1ΑALA402ALA564腺病毒，并進(jìn)行PCR鑒定及滴度測(cè)定。結(jié)果經(jīng)酶切鑒定及基因測(cè)序證實(shí)重組穿梭質(zhì)粒及重組腺病毒質(zhì)粒構(gòu)建成功，PSHUTTLE2HIF1ΑALA564及PADENOHIF1ΑALA564質(zhì)粒中HIF1ΑCDNA402位均為脯氨酸PRO密碼子CCA，而突變型PSHUTTLE2HIF1ΑALA402ALA564及PADENOHIF1ΑALA402ALA564質(zhì)粒402位則為丙氨酸ALA密碼子GCA。對(duì)照質(zhì)粒PADENOLACZ轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞XGAL染色顯示轉(zhuǎn)染效率約20％。包裝后反復(fù)凍融細(xì)胞3次得到含重組病毒的病毒液，擴(kuò)增病毒后提取病毒DNA行PCR檢測(cè)重組腺病毒均得到預(yù)期的287BP擴(kuò)增產(chǎn)物，終點(diǎn)稀釋實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)重組腺病毒ADENOHIF1ΑALA402ALA564的滴度分別為2010PFUML。結(jié)論成功構(gòu)建重組腺病毒雙突變型的ADENOHIF1ΑALA402ALA564，為缺血性心臟病的HIF1Α基因治療研究奠定了基礎(chǔ)。

簡(jiǎn)介：目的觀察RNA干擾技術(shù)在抑制乙型肝炎病毒HBV復(fù)制與表達(dá)方面的作用，同時(shí)，對(duì)DICER基因在RNA干擾產(chǎn)生機(jī)制中的作用進(jìn)行探討。方法1將13倍HBV基因克隆入PCDNA31中，構(gòu)建HBV真核表達(dá)載體PHBV，將其轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞HEPG2，建立HBV瞬時(shí)表達(dá)模型，并通過(guò)ELISA、免疫熒光、SOUTHERN和NTHERNBLOT檢測(cè)對(duì)該模型進(jìn)行評(píng)價(jià)；2針對(duì)乙型肝炎病毒的四個(gè)開(kāi)發(fā)放性讀碼框，設(shè)計(jì)并構(gòu)建十種SHRNA表達(dá)載體PSHRNA；將PHBV和PSHRNA共轉(zhuǎn)染入肝癌細(xì)胞，通過(guò)ELISA、免疫熒光、SOUTHERN、NTHERN、WESTERNBLOT和RTPCR檢測(cè)，觀察HBV復(fù)制與表達(dá)受抑制的情況。3設(shè)計(jì)并構(gòu)建兩種針對(duì)DICER基因中RNA酶III結(jié)構(gòu)域的SHRNA表達(dá)載體，即PSHRNAD1和PSHRNAD2，先將其轉(zhuǎn)染HEPG22215細(xì)胞和結(jié)腸癌細(xì)胞，通過(guò)RTPCR檢測(cè)，觀察DICER基因受抑的情況。將PSHRNADL轉(zhuǎn)染整合了綠色熒光蛋白GFP基因的HEPG2A9細(xì)胞，以抑制其DICER基因的表達(dá)，再轉(zhuǎn)染抗GFP的SHRNA表達(dá)載體，觀察DICER受抑制后，是否影響后續(xù)SHRNA表達(dá)載體的功能發(fā)揮，以此反映DICER酶在RNA干擾產(chǎn)生機(jī)制中的作用。結(jié)果1成功構(gòu)建了HBV真核表達(dá)載體PHBV，通過(guò)ELISA、免疫熒光、SOUTHEM和NTHEMBLOT能檢測(cè)到HBV的復(fù)制與表達(dá)，說(shuō)明通過(guò)轉(zhuǎn)染PHBV可以建立HBV瞬時(shí)感染模型。2成功構(gòu)建了十種針對(duì)HBV的SHRNA表達(dá)載體，通過(guò)ELISA、免疫熒光、SOUTHERN、NTHERN、WESTEMBLOT及RTPCR等，觀察到HBV復(fù)制與表達(dá)均受到明顯抑制，說(shuō)明RNA干擾可以有效抑制HBV的復(fù)制與表達(dá)。3成功構(gòu)建了兩種針對(duì)DICER基因中RNA酶III結(jié)構(gòu)域的SHRNA表達(dá)載體，通過(guò)RTPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在三個(gè)細(xì)胞系中，DICER基因的表達(dá)均受到明顯抑制，說(shuō)明通過(guò)載體表達(dá)SHRNA的方式可以抑制DICER基因的表達(dá)。當(dāng)細(xì)胞DICER水平降低時(shí)，后續(xù)抗GFP的SHRNA表達(dá)載體不能發(fā)揮其功能，說(shuō)明SHRNA表達(dá)載體功能的發(fā)揮必需依賴于DICER基因的存在。結(jié)論RNA干擾可以有效抑制HBV的復(fù)制與表達(dá)；DICER基因在RNA產(chǎn)生機(jī)制中起重要作用。

簡(jiǎn)介：徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文慢病毒介導(dǎo)血友病B基因在離體細(xì)胞中的表達(dá)姓名閆冬梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液?。┲笇?dǎo)教師徐開(kāi)林潘秀英20060501徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文慢病毒介導(dǎo)血友病B基因在離體細(xì)胞中的表達(dá)中文摘要目的構(gòu)建泛醌啟動(dòng)子PUB驅(qū)動(dòng)的攜帶狗凝血因子IXCFIX基因的慢病毒三質(zhì)粒表達(dá)載體，體外轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)細(xì)胞MSCS和人胚腎細(xì)胞293T，觀察轉(zhuǎn)染后是否能獲得有效的CFIX表達(dá)，為臨床基因治療血友病B提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法采用限制性內(nèi)切酶酶切載體PTK68’，獲得CFIX基因片斷，并連接至慢病毒載體PTKL51含PUB啟動(dòng)子，重組質(zhì)粒命名為PTKL64。采用改良的磷酸鈣沉淀法將包裝質(zhì)?！鱊RF、包膜蛋白質(zhì)粒VSVG和構(gòu)建的重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒PTKL64共轉(zhuǎn)染293T包裝細(xì)胞，72小時(shí)后收集病毒上清并過(guò)濾，以MOI31比例感染第三代MSCS和293T細(xì)胞，24小時(shí)重復(fù)感染一次，48小時(shí)后用FIX促凝活性一期法測(cè)定細(xì)胞上清中CFIX活性。結(jié)果成功構(gòu)建含CFIX基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)移質(zhì)粒PTKL64。PTKL64與△NRF、VSVG構(gòu)成三質(zhì)粒慢病毒載體，同時(shí)以攜帶綠色熒光蛋白GFP的載體PTKL53為對(duì)照，共轉(zhuǎn)染293T包裝細(xì)胞72小時(shí)后可在熒光顯微鏡下觀察到對(duì)照組GFP表達(dá)率約為70％，病毒滴度約5X106IU／ML。以培養(yǎng)第三代的MSCSCD90表達(dá)陽(yáng)性率為94．31％和293T細(xì)胞作為靶細(xì)胞，過(guò)濾后的病毒上清感染靶細(xì)胞，48小時(shí)后培養(yǎng)細(xì)胞上清可檢測(cè)到CFIX活性，兩種靶細(xì)胞分別為26．33士2．08％和19．7土1．53％，且MSCS表達(dá)CFIX明顯高于293T細(xì)胞PD．05。結(jié)論1．成功構(gòu)建PUB啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的CFIX基因的三質(zhì)粒慢病毒表達(dá)載體，包裝后

簡(jiǎn)介：椎間盤退變性疾病包括許多種疾病，給人類健康帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)，然而，目前所有的治療方式都針對(duì)的是椎間盤退變?cè)斐傻陌Y狀的緩解，而并非椎間盤退變本身。治療椎間盤退變的一個(gè)可能的方法就是將采用基因治療的方法將目的基因?qū)胱甸g盤內(nèi)。目的1建立可靠的、可重復(fù)的椎間盤退變的動(dòng)物模型；2構(gòu)建含有人類重組BMP7基因的腺病毒載體；3將該腺病毒載體導(dǎo)入新西蘭大白兔椎間盤內(nèi)，觀察BMP7對(duì)新西蘭大白兔受損椎間盤的影響。方法1健康新西蘭大白兔6只，將L34作為對(duì)照椎間盤，不進(jìn)行針刺也不進(jìn)行暴露；L45作為假手術(shù)椎間盤，只進(jìn)行暴露而不進(jìn)行針刺；L56椎間盤作為手術(shù)椎間盤，手術(shù)暴露后用24G針頭從椎間盤的前外側(cè)針刺三次。觀察4周后其椎間盤高度、MRI信號(hào)改變、髓核含水量、髓核SGAG含量等變化，對(duì)椎間盤進(jìn)行組織學(xué)觀察，了解受損椎間盤的改變。2采用共轉(zhuǎn)染的方法構(gòu)建成功PADBMP7重組腺病毒，293細(xì)胞包裝、擴(kuò)增和純化后對(duì)重組腺病毒DNA進(jìn)行PCR檢測(cè)及酶切鑒定，將鑒定好的病毒克隆進(jìn)一步擴(kuò)增、純化和測(cè)定滴度。驗(yàn)證其使用的安全性3取新西蘭大白兔4只，將BMP7基因的腺病毒載體注射入新西蘭大白兔椎間盤內(nèi)，3天后通過(guò)RTPCR、WESTERNBLOT觀察BMP7的表達(dá)情況。取新西蘭大白兔20只，將L34椎間盤刺傷后注入20ΜL生理鹽水；L45椎間盤刺傷后注入20ΜL的ADBMP7；3、L56留做對(duì)照。在術(shù)后2周、4周、8周、12周，測(cè)量椎間盤高度、MRI信號(hào)強(qiáng)度、髓核含水量、髓核SGAG含量，觀察BMP7對(duì)新西蘭大白兔受損椎間盤在這些方面的影響。結(jié)果1針刺損傷椎間盤4周后，與L34、L45椎間盤相比，L56椎間盤在椎間盤高度、MRI信號(hào)強(qiáng)度、髓核含水量、髓核SGAG含量降低，HE染色證明L56椎間盤有退變性征象發(fā)生。2成功構(gòu)建了腺病毒載體，經(jīng)測(cè)定其滴度為121012PFUML。3注射BMP7的腺病毒載體，三天后就有BMP7表達(dá)。在術(shù)后2周、4周、8周、12周，BMP7基因腺病毒載體注射的L45椎間盤在椎間盤高度、MRI信號(hào)強(qiáng)度、髓核含水量、髓核SGAG含量方面與L34椎間盤相比都能改善受損傷椎間盤的情況，接近L56正常椎間盤水平。結(jié)論針刺損傷椎間盤退變動(dòng)物模型是一種可靠的動(dòng)物模型，具有很好的重復(fù)性。用BMP7基因的腺病毒載體對(duì)受損傷的新西蘭大白兔椎間盤進(jìn)行基因治療，可以很好的延緩受損椎間盤退變的發(fā)生，為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)提供了依據(jù)。

簡(jiǎn)介：安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文分類號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)學(xué)位論文皮質(zhì)下缺血性血管病的認(rèn)知損害和抑郁的交皮質(zhì)下缺血性血管病的認(rèn)知損害和抑郁的交互影響互影響THEINTERACTIONBETWEENCOGNITIVEIMPAIRMENTDEPRESSIONINPATIENTSWITHSUBCTICALISCHEMICVULARDISEASE楊婷婷楊婷婷指導(dǎo)教師姓名孫中武教授安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)名稱神經(jīng)病學(xué)提交論文日期201303論文答辯日期201305學(xué)位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學(xué)201307答辯委員會(huì)主席周江寧教授評(píng)閱人楊毅、唐金榮教授20132013年0505月安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名日期學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解安徽醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國(guó)家主管部門或其指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版，有權(quán)允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書(shū)館被查閱，有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。愿意將本人的學(xué)位論文提交中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)、中國(guó)優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)和中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)中全文發(fā)表，并可以以電子、網(wǎng)絡(luò)及其他數(shù)字媒體形式公開(kāi)出版，并同意編入CNKICNKI中國(guó)知識(shí)資源總庫(kù)，在中國(guó)博碩士學(xué)位論文評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)庫(kù)中使用和在互聯(lián)網(wǎng)上傳播。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽名

簡(jiǎn)介：第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文VEGFRSIRNA腺病毒載體的構(gòu)建及其對(duì)腫瘤血管生成的影響姓名黃大偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（消化）指導(dǎo)教師吳開(kāi)春20050501VEGFR。SIRNA腺病毒載體的構(gòu)建及其對(duì)腫瘤血管生成的影響研究生黃大偉學(xué)科專業(yè)內(nèi)科學(xué)消化系病所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院消化內(nèi)科導(dǎo)師昊開(kāi)春教授主任醫(yī)師資助基金項(xiàng)目國(guó)家杰出青年科學(xué)基金項(xiàng)目編號(hào)302250039全軍醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金課題項(xiàng)目編號(hào)012087新型血管靶向性腺病毒介導(dǎo)SIRNA抑制胃癌血管生成項(xiàng)目編號(hào)30300402關(guān)鍵詞RNA干涉，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2VEGFR2／KDR，腺病毒中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)2005年04月

簡(jiǎn)介：目的研究核苷類似物治療后完全應(yīng)答的慢性乙型肝炎患者在停藥時(shí)肝內(nèi)HBV準(zhǔn)種分布情況，從準(zhǔn)種角度探討核苷類似物停藥復(fù)發(fā)的分子病毒學(xué)機(jī)制。方法選擇經(jīng)核苷類似物治療后達(dá)到停藥標(biāo)準(zhǔn)（實(shí)現(xiàn)HBEAG血清轉(zhuǎn)換、HBVDNA持續(xù)陰轉(zhuǎn)后繼續(xù)用藥48周）的慢性乙型肝炎患者10例，進(jìn)行肝組織活檢，抽提肝內(nèi)HBVDNA，PCR擴(kuò)增HBVRT區(qū)基因，克隆后測(cè)序。并對(duì)所有患者每4周隨訪1次，連續(xù)隨訪24周，觀察停藥后的病毒學(xué)應(yīng)答情況，根據(jù)病毒學(xué)應(yīng)答情況分為持續(xù)應(yīng)答組和停藥復(fù)發(fā)組。應(yīng)用生物信息學(xué)技術(shù)分析停藥復(fù)發(fā)組和持續(xù)應(yīng)答組之間肝內(nèi)HBV準(zhǔn)種的復(fù)雜度和多樣性的差異，對(duì)病毒序列應(yīng)用鄰接法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。結(jié)果停藥復(fù)發(fā)組的血清HBSAG水平明顯高于持久應(yīng)答組，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P0028。兩組間肝組織病理學(xué)結(jié)果無(wú)論是炎癥水平還是纖維化分期以及肝組織內(nèi)HBSAG的免疫組化差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。停藥復(fù)發(fā)組和持續(xù)應(yīng)答組肝內(nèi)HBV準(zhǔn)種復(fù)雜度和準(zhǔn)種多樣性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P005。進(jìn)化樹(shù)分析結(jié)果顯示停藥復(fù)發(fā)組和持續(xù)應(yīng)答組的序列分支枝長(zhǎng)相似。結(jié)論停藥時(shí)的血清HBSAG水平越低越不易復(fù)發(fā)，可以作為核苷（酸）類似物停藥復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)指標(biāo)。肝組織病理學(xué)檢測(cè)尚不能作為核苷（酸）類似物停藥復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)指標(biāo)。準(zhǔn)種復(fù)雜度和多樣性是否可以作為核苷（酸）類似物停藥復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)指標(biāo)有待進(jìn)一步研究。

簡(jiǎn)介：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文宮頸癌組織中人類皰疹病毒6型HHV6和人乳頭瘤病毒HPV的檢測(cè)及其臨床意義姓名宋悅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師侯香圃20000401儀，北京六一儀器廠生產(chǎn)DYYⅢ2穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀。實(shí)驗(yàn)方法1、組織DNA的提取采用酚氯仿異戊醇常規(guī)提取法。2、PCR擴(kuò)增HHV一6檢測(cè)采用巢式PCR，外引物為H68，H66，內(nèi)引物為H66，H6一A／7。兩次擴(kuò)增的反應(yīng)條件及試劑均相同。首先94℃變性3MIN，然后94“C變性45S60。C退火60S一72℃延伸60S，共35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸7RAIN。HPV檢測(cè)用PCR。引物為HPVE61和HPVE62，反應(yīng)條件為95℃變性30S一55℃退火15S一70℃延伸15S，共35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸7MIN。3、結(jié)果判定HHV一6第一次擴(kuò)增產(chǎn)物陽(yáng)性條帶為549BP，第二次擴(kuò)增陽(yáng)性條帶為112BP，HPVDNA陽(yáng)性條帶則為300BP。4、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用X2檢驗(yàn)或四格表精確概率法。結(jié)果1．正常及病變宮頸組織中HHV一6和HPVE6DNA的表達(dá)情況CINⅢ級(jí)和宮頸浸潤(rùn)癌組織中HHV一6總表達(dá)率為61．76％21／34，明顯高于正常組和炎癥組，差異非常顯著PO．01，也明顯高于CINI一Ⅱ級(jí)PO．05。HPVE6的總表達(dá)率為76．47％26／34，明顯高于正常組和炎癥組，差異非常顯著P0．01。并且，從正常到CINⅢ級(jí)隨著病變的逐步發(fā)展，二者表達(dá)率均呈遞增趨勢(shì)。在正常組、炎癥組、CINI一Ⅱ級(jí)、CINⅢ級(jí)和浸潤(rùn)癌2‘

簡(jiǎn)介：碩士專業(yè)學(xué)位論文論文題目維生素D及其受體基因多態(tài)性與新生兒呼吸道合胞病毒肺炎易感性的關(guān)系分析研究生姓名任靜指導(dǎo)教師姓名馮星教授專業(yè)名稱兒科學(xué)研究方向新生兒論文提交日期2013年5月維生素D及其受體基因多態(tài)性與新生兒呼吸道合胞病毒肺炎易感性的關(guān)系分析中文摘要I維生素D及其受體基因多態(tài)性與新生兒呼吸道合胞病毒肺炎易感性的關(guān)系分析中文摘要研究目的研究目的研究25（OH）D3濃度、IGG、IL4、CD4、CD4CD8及VDR基因兩個(gè)常見(jiàn)多態(tài)性位點(diǎn)基因型、等位基因頻率在RSV肺炎新生兒與健康新生兒間的差異，探討該差異與新生兒RSV肺炎易感性的關(guān)系。研究方法研究方法將2011年12月至2012年12月入住我科的RSV肺炎新生兒150例為實(shí)驗(yàn)組，同期蘇州母子保健中心出生的無(wú)感染的新生兒160例作為正常對(duì)照組，ELISA及流式細(xì)胞術(shù)等檢測(cè)血清25（OH）D3濃度、IGG、IL4、CD4及CD4CD8等相關(guān)免疫指標(biāo)，PCRRFLP方法檢測(cè)VDR基因FOKI、TAQI多態(tài)性，分析VDR基因多態(tài)性與新生兒RSV肺炎易感性的關(guān)系。研究結(jié)果研究結(jié)果1實(shí)驗(yàn)組25（OH）D3濃度、IGG、CD4及CD4CD8低于對(duì)照組，IL4高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）。2VDR基因FOKI、TAQI基因型符合HARDYWEINBERG平衡，其中FOKI基因雜合子基因型CT頻率在實(shí)驗(yàn)組為37，在對(duì)照組為21，純合子基因型CC頻率在實(shí)驗(yàn)組為60，在對(duì)照組為76，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0008）。等位基因T頻率實(shí)驗(yàn)組為21，在對(duì)照組為14，而等位基因C則為別為79和86，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明等位基因T與RSV肺炎有關(guān)（P0013）；TAQI多態(tài)性位點(diǎn)基因頻率和基因型頻率分布在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組間無(wú)明顯差異，P值分別為0479和0293。

簡(jiǎn)介：SOOCHOWUNIVERSITY碩士專業(yè)學(xué)位論文論文題目表達(dá)TIPE2腺病毒載體的構(gòu)建及其對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的影響研究生姓名慈雪萍指導(dǎo)教師姓名常樹(shù)建專業(yè)名稱腫瘤學(xué)研究方向?qū)嶓w瘤的治療論文提交日期201406

簡(jiǎn)介：目的分析比較2型糖尿病認(rèn)知功能正常患者與認(rèn)知功能減退患者的臨床特征和相關(guān)因素，探討糖尿病認(rèn)知功能減退的危險(xiǎn)因素以及載脂蛋白EAPOE基因與腫瘤壞死因子ΑTNFΑ基因多態(tài)性與糖尿病認(rèn)知功能減退之間的關(guān)系，為預(yù)防2型糖尿病患者的認(rèn)知功能減退以及防止向癡呆發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)。方法在20085～20093期間對(duì)天津醫(yī)科大學(xué)代謝病醫(yī)院2型糖尿病的住院患者進(jìn)行相關(guān)因素的問(wèn)卷調(diào)查，同時(shí)采用量表對(duì)抑郁焦慮狀況和認(rèn)知功能進(jìn)行測(cè)定，共調(diào)查248例2型糖尿病病人。檢測(cè)出認(rèn)知功能減退患者60例作為病例組，認(rèn)知功能正常者188例作為對(duì)照組，對(duì)兩組的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)特征及臨床特征、認(rèn)知功能狀況等進(jìn)行分析；對(duì)60例認(rèn)知功能減退患者以及隨機(jī)抽取的120例認(rèn)知功能正常者采集靜脈血樣并用PCRRFLP方法檢測(cè)APOE和TNFΑ基因多態(tài)性。采用非條件LOGISTIC回歸模型對(duì)2型糖尿病認(rèn)知功能減退的危險(xiǎn)因素進(jìn)行單因素和多因素分析，計(jì)算比值比及其95％可信區(qū)間95％CI。結(jié)果1單因素LOGISTIC回歸分析結(jié)果顯示，年齡、文化程度、堅(jiān)持鍛煉、DM家族史、抑郁、焦慮、糖尿病病程、血糖控制情況、并發(fā)周圍神經(jīng)病變、并發(fā)視網(wǎng)膜病變、并發(fā)高血壓、血清總膽固醇水平均與T2DM認(rèn)知功能減退有統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)，其95％CI分別為33792114～5402、04300295～0629、05380295～0984、05200286～0947、23211269～4246、30621666～5627、19801302～3011、21911252～3834、20391047～3972、19271071～3469、22441136～4434、13061040～1641，其中文化程度、堅(jiān)持鍛煉、DM家族史是保護(hù)因素，其余均為危險(xiǎn)因素。經(jīng)過(guò)調(diào)整可能的混雜因素的作用后，T2DM認(rèn)知功能減退與糖尿病并發(fā)周圍神經(jīng)病變、并發(fā)視網(wǎng)膜病變、并發(fā)高血壓、血清總膽固醇、糖尿病家族史的關(guān)聯(lián)性消失。未發(fā)現(xiàn)認(rèn)知功能減退與性別、性格、吸煙、飲酒、飲茶、高血壓家族史、并發(fā)腎病、并發(fā)冠心病、治療方式、體質(zhì)指數(shù)、平均收縮壓、平均舒張壓、空腹血糖、餐后2H血糖、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、尿酸、尿素氮、尿肌酐有統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)。2病例組中APOE基因型頻率分別為Ε22型0％，Ε23型1500％，Ε24型667％，Ε33型4166％，Ε34型3167％和Ε44型500％；對(duì)照組中分別為250％，2250％，583％，5583％，1167％，167％，兩組基因型頻率的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0011；病例組中APOE等位基因頻率分別為Ε2為1083％，Ε3為650％，Ε4為2417％；對(duì)照組則分別為1667％，7292％，1041％，兩組APOE等位基因頻率分布的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X212646，P0002；單因素LOGISTIC回歸分析結(jié)果顯示，APOE基因多態(tài)性與T2DM認(rèn)知功能減退之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)，95％CI為27171483～4979，且經(jīng)過(guò)DM病程調(diào)整后二者間的統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)仍然存在。攜帶APOEΕ4等位基因的2型糖尿病患者發(fā)生認(rèn)知功能減退的危險(xiǎn)性是無(wú)該等位基因的患者的3225倍，經(jīng)過(guò)DM病程調(diào)整后二者間的統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)仍然存在。3病例組中TNFΑ基因型頻率分別為GG型6833％，GA型2500％，AA型667％；對(duì)照組中分別為8500％，1250％，250％，兩組基因型頻率的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0028。病例組中TNFΑ基因等位基因頻率分別為G為8083％，A為1917％；對(duì)照組分別為9125％和875％，兩組等位基因頻率的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義X28091，P0004。單因素LOGISTIC回歸分析結(jié)果顯示，TNFΑ基因型與2型糖尿病認(rèn)知功能減退之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)，95％CI為21191170～3836，且經(jīng)過(guò)DM病程調(diào)整后二者間的統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)仍然存在。攜帶TNFΑA等位基因的2型糖尿病患者發(fā)生認(rèn)知功能減退的危險(xiǎn)性是無(wú)該等位基因患者的2626倍，經(jīng)過(guò)DM病程調(diào)整后二者間的統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)仍然存在。4對(duì)所有單因素LOGISTIC回歸分析有意義的變量進(jìn)行多因素非條件LOGISTIC回歸分析擬合主效應(yīng)模型，共7個(gè)因素進(jìn)入主效應(yīng)方程，依次為年齡、焦慮、糖尿病病程、文化程度、APOEΕ4等位基因、血糖控制情況、TNFΑA等位基因，其95％CI分別為58892744～12639、42051607～11004、30081638～5524、03960232～0676、43401589～11854、33231419～7783、33231419～7783、39311366～11315。年齡大、DM病程長(zhǎng)、焦慮、攜帶APOEΕ4等位基因、血糖控制情況差、攜帶TNFΑA等位基因是2型糖尿病認(rèn)知功能減退的危險(xiǎn)因素，文化程度高是保護(hù)因素。5認(rèn)知功能狀況分析結(jié)果顯示2型糖尿病認(rèn)知功能減退組的ADAS總分、記憶分、語(yǔ)言分、操作分、注意力分、ADL分均高于對(duì)照組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多元逐步回歸結(jié)果顯示與記憶、語(yǔ)言、操作、注意力、日常生活能力相關(guān)的主要因素有年齡、文化程度、抑郁、焦慮、鍛煉、DM病程、視網(wǎng)膜病變、糖尿病家族史和血糖控制情況。結(jié)論2型糖尿病認(rèn)知功能減退患者在記憶、語(yǔ)言、操作能力、注意力、日常行為能力等方面均差于認(rèn)知功能正常者；年齡大、焦慮、DM病程長(zhǎng)、攜帶APOEΕ4等位基因、血糖控制差、攜帶TNFΑA等位基因是認(rèn)知功能減退的危險(xiǎn)因素，文化程度高是保護(hù)因素。

簡(jiǎn)介：目的本研究對(duì)原卟啉鈉的制備方法進(jìn)行了改進(jìn)，以期簡(jiǎn)化其生產(chǎn)流程。并且體外觀察原卟啉鈉的細(xì)胞毒性作用及其HCV亞基因復(fù)制子細(xì)胞模型RNA的抑制效果。方法將凝固動(dòng)物血中的蛋白質(zhì)水解，分離出血紅素，經(jīng)原卟啉、原卟啉甲酯等中間產(chǎn)物，最終精制獲得原卟啉鈉。根據(jù)原卟啉鈉的光吸收特性，利用分光光度法對(duì)其進(jìn)行定性和定量檢測(cè)。體外實(shí)驗(yàn)用CCK8試劑盒篩NAPP無(wú)細(xì)胞毒性濃度區(qū)間。在培養(yǎng)的細(xì)胞中依次加入含有藥物的完全培養(yǎng)基藥物最高濃度NAPP10MGML，IFN106IUML，各組藥物10倍稀釋，共6個(gè)濃度級(jí)別，PH7210Μ1。藥物作用72小時(shí)后用CELLCOUNTINGKIT8試劑盒在OD450NM測(cè)定細(xì)胞活力。然后分別取終濃度為L(zhǎng)MGML、101MGML、102MGML、103MGML、104MGML的NAPP與含HCV亞基因復(fù)制子細(xì)胞培養(yǎng)液中共同孵育，同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組和IFNΑ2B陽(yáng)性對(duì)照組，3天后用熒光定量PCR法檢測(cè)HCV復(fù)制子中RNA的含量。結(jié)果提取物為紅褐色結(jié)晶，可溶于水，不溶于氯仿、乙醚及丙酮，易溶于酸性溶液。溶于酸性溶液后純度為938％。體外實(shí)驗(yàn)無(wú)細(xì)胞毒藥物濃度區(qū)間為0～1000ΜGML，在10ΜGM1～1000ΜGML區(qū)間內(nèi)對(duì)HCV復(fù)制子RNA有明顯抑制作用P＜005～001。結(jié)論利用改良后的方法可將非抗凝動(dòng)物血精制成原卟啉鈉，其純度為938％。體外實(shí)驗(yàn)NAPP對(duì)革巴細(xì)胞安全作用范圍較寬，且可有效抑制HCV復(fù)制子RNA。

簡(jiǎn)介：目的RNA干擾現(xiàn)象RNAINTERFERENCE，RNAI指的是雙鏈RNA可引發(fā)同源MRNA降解。它已被成功應(yīng)用于下調(diào)內(nèi)源性基因表達(dá)，并應(yīng)用于抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)各種病原體的復(fù)制。在本研究中，我們?cè)u(píng)估了以U6啟動(dòng)子作為啟動(dòng)序列PSILENCER20U6載體介導(dǎo)的小RNA干擾片段在培養(yǎng)細(xì)胞株中抑制HBV復(fù)制的效應(yīng)。方法將針對(duì)HBV基因組不同區(qū)域的核苷酸序列插入至PSILENCER載體中，并將重組后的PSILENCER質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染入HEPG2N10細(xì)胞株中。HEPG2N10是一個(gè)可穩(wěn)定表達(dá)HBSAG及HBEAG的細(xì)胞株其表達(dá)HBV血清型為ADW2亞型。以ELISA法檢測(cè)病毒抗原，以RTPCR檢測(cè)病毒MRNA，并以熒光定量PCR法檢測(cè)分泌入培養(yǎng)基的CCCDNA。結(jié)果質(zhì)粒載體介導(dǎo)的RNAI能明顯抑制培養(yǎng)基中HBSAG及HBEAG的表達(dá)P005。并且RTPCR法檢測(cè)顯示病毒MRNA也被降解了，從而減少了蛋白表達(dá)及病毒逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制的模板P005。熒光定量PCR法檢測(cè)顯示分泌入培養(yǎng)基的CCCDNA明顯下降P005。結(jié)論RNAI能抑制HBV基因表達(dá)及病毒復(fù)制，RNAI可能對(duì)HBV感染具有潛在的治療作用。

簡(jiǎn)介：疼痛是影響晚期癌癥患者生活質(zhì)量的重要因素之一，醫(yī)護(hù)人員對(duì)癌痛管理的態(tài)度和知識(shí)掌握程度是有效實(shí)施癌痛管理、提高患者生活質(zhì)量的關(guān)鍵。本課題在了解腫瘤康復(fù)科的醫(yī)護(hù)人員癌痛認(rèn)知現(xiàn)狀及所屬病人疼痛狀況、生活質(zhì)量的基礎(chǔ)上，嘗試用短期教育干預(yù)的方法，以講座培訓(xùn)和臨床帶教的方式改善醫(yī)護(hù)人員的認(rèn)知水平。分析、探討醫(yī)護(hù)人員癌痛認(rèn)知水平對(duì)患者疼痛狀況和生活質(zhì)量的影響，探索適合我國(guó)國(guó)情的癌痛管理對(duì)策，為在我國(guó)進(jìn)一步開(kāi)展全方位的癌痛管理提供一些有益的幫助。研究共分三部分。第一部分為癌痛管理現(xiàn)狀調(diào)查，對(duì)138名醫(yī)護(hù)人員進(jìn)行了癌痛認(rèn)知問(wèn)卷調(diào)查。結(jié)果顯示患者的疼痛狀況沒(méi)有得到有效的控制，生活質(zhì)量在住院期間沒(méi)有明顯的變化。提示我們應(yīng)在癌痛管理方面進(jìn)行教育干預(yù)，開(kāi)展有針對(duì)性的培訓(xùn)，以強(qiáng)化醫(yī)護(hù)人員的認(rèn)知水平；以理論和實(shí)踐相結(jié)合的方式指導(dǎo)醫(yī)護(hù)人員實(shí)施癌痛管理方案，提高患者的生活質(zhì)量。第二部分進(jìn)行癌痛管理培訓(xùn)，針對(duì)醫(yī)護(hù)人員癌痛知識(shí)的不足，對(duì)其進(jìn)行為期1周的癌痛管理培訓(xùn)。培訓(xùn)方式采取講座和臨床帶教相結(jié)合的方式。第三部分進(jìn)行培訓(xùn)效果評(píng)價(jià)再次以相同的問(wèn)卷對(duì)醫(yī)護(hù)人員進(jìn)行癌痛認(rèn)知問(wèn)卷調(diào)查，得出以下結(jié)論在癌痛管理方面對(duì)醫(yī)護(hù)人員進(jìn)行有針對(duì)性的培訓(xùn)實(shí)用、有效，醫(yī)護(hù)人員癌痛認(rèn)知水平的提高可以明顯減輕病人的疼痛程度減少疼痛時(shí)間，從而改善病人的生活質(zhì)量的多個(gè)領(lǐng)域。針對(duì)以上結(jié)果，我們提出了有關(guān)癌痛管理方案的幾條對(duì)策①、定期開(kāi)展有關(guān)癌痛知識(shí)的問(wèn)卷調(diào)查，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題與不足，進(jìn)行有針對(duì)性的培訓(xùn)，以強(qiáng)化醫(yī)護(hù)人員的認(rèn)知水平；②、以理論和實(shí)踐相結(jié)合的方式指導(dǎo)醫(yī)護(hù)人員實(shí)施癌痛管理方案；③、在癌痛管理中，將醫(yī)護(hù)人員共同納為管理主體，使兩者作用緊密結(jié)合，以更好地提高患者的生活質(zhì)量；④、建議在癌痛管理監(jiān)督方面加強(qiáng)力度，及時(shí)出臺(tái)相關(guān)法規(guī)、制度。