簡介：本課題以江蘇省宜興市為研究現(xiàn)場，從病原學(xué)角度開展了以人群為基礎(chǔ)的丙型肝炎分子流行病學(xué)研究。第一部分江蘇宜興地區(qū)丙型肝炎病毒基因型分布研究HCV基因組的核苷酸序列具有高度的變異性，目前主要分為六個(gè)基因型，即1～6型。不同基因型存在明顯的地區(qū)分布差異，而且HCV的基因型對(duì)判斷丙型肝炎治療的難易程度及其預(yù)后具有重要的意義，故了解本地區(qū)HCV基因型分布特征作為進(jìn)一步深入研究丙型肝炎慢性化的基礎(chǔ)資料有其必要性。本研究采用SIMMONDS基因分型方法，依據(jù)HCV的保守區(qū)段5非編碼區(qū)5NCR設(shè)計(jì)1、2、3和1B型特異性引物，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RTPCR方法擴(kuò)增分型，并對(duì)不同基因型在人群中的分布作統(tǒng)計(jì)描述。主要結(jié)果如下1HCVRNA陽性檢測和基因分型研究檢測158份抗HCV陽性血清，其中95份HCVRNA陽性，陽性率為601﹪，基因分型結(jié)果1B型80例842﹪，2A型5例53﹪，1B2A型混合感染5例53﹪，分型不明確者5例53﹪。2HCV基因型在不同性別人群中的分布研究男性丙型肝炎患者中HCV基因型以1B為主，占882﹪，其余為2型以及1B與2型的混合感染，分別占79﹪和15﹪；女性丙型肝炎患者中1B型占740﹪，未檢測到2型，而1B和2型的混合感染發(fā)現(xiàn)4例，占148﹪。3HCV基因型在急、慢性丙型肝炎和肝硬化患者中的分布研究在HCVRNA陽性的患者中，急性丙型肝炎的HCV基因型均為1B型，慢性輕度丙型肝炎患者ALT≤200UL中1B和1B2A型共占898﹪，慢性重度丙型肝炎患者ALT＞200UL中為884﹪，肝硬化患者中為846﹪。4HCV基因型在有輸血史及無明確輸血史患者中的分布研究有明確輸血史的丙型肝炎患者組與無明確輸血史患者組，基因型分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0414。5對(duì)分型產(chǎn)物的測序驗(yàn)證工作本研究基因分型結(jié)果為1B型的樣本測得5NCR區(qū)擴(kuò)增片段序列與GENBANK上HCJ4株相應(yīng)序列同源性為992﹪；分型結(jié)果為2型的樣本測得與GENBANK上HCJ6株相應(yīng)序列同源性為977﹪。第二部分丙型肝炎病毒準(zhǔn)種復(fù)雜性與臨床關(guān)系的研究準(zhǔn)種變異在丙型肝炎的慢性化中起到的作用需要深入研究和探討。本研究采用單鏈構(gòu)象多態(tài)性SSCP方法，對(duì)44例未經(jīng)干擾素治療的慢性丙型肝炎和肝硬化患者的HCV進(jìn)行準(zhǔn)種檢測。分析準(zhǔn)種復(fù)雜性與臨床肝損害指標(biāo)之間的關(guān)系，主要結(jié)果如下1不同臨床情況的丙型肝炎患者準(zhǔn)種復(fù)雜性比較ALT≤45UL正常的患者組準(zhǔn)種條帶數(shù)為254±105，ALT異常＞45UL組，準(zhǔn)種條帶數(shù)為448±214，兩組的準(zhǔn)種條帶數(shù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0003，說明準(zhǔn)種在ALT異常的患者中復(fù)雜性較高。2影響肝損害程度的多因素LOGISTIC回歸分析將ALT按照正常與否作為二分類結(jié)局變量，年齡、性別、基因型、肝硬化程度、準(zhǔn)種復(fù)雜與否納入LOGISTIC回歸模型，分析結(jié)果顯示，準(zhǔn)種的復(fù)雜與否對(duì)ALT有顯著影響，值為12884，可信區(qū)間為2390～69463，說明準(zhǔn)種的復(fù)雜性是肝臟損害程度的獨(dú)立影響因素。第三部分1B型丙型肝炎病毒包膜區(qū)變異進(jìn)化研究本研究從1B型HCV包膜區(qū)的核苷酸序列和高變區(qū)的氨基酸序列變異入手，采用生物信息學(xué)方法構(gòu)建遺傳進(jìn)化樹，研究HCV的生物學(xué)特點(diǎn)。主要結(jié)果如下1HCVE2區(qū)的核苷酸序列和HR1的氨基酸序列變異研究測序獲得的10株HCVE2區(qū)序列經(jīng)分析比對(duì)后，發(fā)現(xiàn)不同患者來源的E2區(qū)核苷酸差異較大，變異度最大的區(qū)域集中在HR114911573NT，但從序列的比對(duì)結(jié)果中可發(fā)現(xiàn)很多位點(diǎn)具有保守性，保守堿基占648﹪204315；而HR1的氨基酸序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)，不同患者來源的HCV株在此區(qū)域多個(gè)固定的氨基酸位點(diǎn)同樣具有很好的保守性，保守的氨基酸位點(diǎn)占222﹪627。2系統(tǒng)進(jìn)化樹分析雖然E2區(qū)為HCV核苷酸序列變異最大的區(qū)域，但以此區(qū)域和不同來源的HCV株E2區(qū)序列構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，仍可以發(fā)現(xiàn)親緣關(guān)系最近的病毒株是中國東南部城市以及日本所研究的HCV1B株，進(jìn)一步證實(shí)了E區(qū)的變異并非隨機(jī)，仍較好的保持了地區(qū)和型別的特征，并再次驗(yàn)證了本地區(qū)HCV的主要基因型為1B型。

簡介：流行性感冒是由流感病毒引起的傳染病。流感病毒屬正粘科病毒，分為甲、乙、丙三型，同型流感病毒根據(jù)血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA抗原性的不同又分為若干亞型，甲型流感病毒的HA抗原共有13個(gè)亞型H～H，其中H～H與人流感病毒相關(guān)；NA抗原共有9個(gè)亞型N～N，其中僅N和N是人流感病毒所特有。甲型流感病毒在自然界分布廣泛，除了可以感染人類以外，還可以感染禽、豬、馬及數(shù)種海洋哺乳動(dòng)物；乙型流感病毒目前僅在人類中發(fā)現(xiàn)；丙型流感病毒則在人和豬中流行。20世紀(jì)流感的大流行，造成了千百萬人的死亡，而最近禽流感的威脅與日俱增。因此，世界各國均投入了大量的人力物力進(jìn)行流感病毒的研究，希望能找到治療和預(yù)防的有效方法。本課題所用中藥九節(jié)茶具有清熱、生津、活血、解毒的功效，是廣東涼茶中的常用成分，在臨床上也常用來治療感冒、非典等外感疾病，但對(duì)其抗流感病毒的實(shí)驗(yàn)研究鮮有報(bào)道，因而有必要對(duì)其抗流感病毒的作用及機(jī)制進(jìn)行深入研究。本文主要從對(duì)流感病毒的中西醫(yī)文獻(xiàn)研究及抗流感病毒實(shí)驗(yàn)研究兩方面論述。本文對(duì)流感的病原學(xué)、流行病學(xué)、臨床診斷治療進(jìn)展、對(duì)人類的危害，以及中醫(yī)對(duì)流感病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)、預(yù)防、治療進(jìn)行了綜述。文獻(xiàn)表明自1933年人類甲型流感病毒被分離出以來，已基本弄清了流感病毒感染流行的機(jī)理。大概每隔10年，甲型流感病毒的血凝素要發(fā)生一次變異，神經(jīng)氨酸酶不變異或發(fā)生很小的變異；大約每隔30～40年，甲型流感病毒的血凝素和神經(jīng)氨酸酶同時(shí)發(fā)生大變異，往往會(huì)帶來一次流感的世界大流行。目前人類尚不能控制流感的發(fā)生與流行，流感病毒的研究仍是當(dāng)今病毒學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。臨床上有效的抗流感病毒藥有病毒唑、金剛烷胺、金剛乙胺等，由于其副作用而大大限制了臨床應(yīng)用；流感病毒抗原的變異性影響了流感疫苗的應(yīng)用。因此，從中藥中尋找療效確切且副作用少的抗流感病毒藥物已受到國內(nèi)外的廣泛重視。通過體內(nèi)外抗病毒實(shí)驗(yàn)，觀察九節(jié)茶的抗病毒作用；并以肺指數(shù)、病毒致小鼠死亡率等為指標(biāo)，觀察其治療效果。九節(jié)茶組與病毒對(duì)照組相比，可以顯著降低FML感染小鼠的肺指數(shù)。九節(jié)茶組與病毒對(duì)照組相比，大小劑量組在平均存活時(shí)間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)的顯著性差異P005，提示該藥對(duì)流感病毒甲1型感染小鼠具有肯定的保護(hù)作用?？梢钥吹?，九節(jié)茶大劑量組的保護(hù)作用與延長生命率明顯高于小劑量組，提示具有正的量效關(guān)系。以利巴韋林病毒唑作為陽性藥物對(duì)照，利巴韋林以5、10、20、40、80、100UGML處理流感、副流感、RSV感染的細(xì)胞，結(jié)果表明對(duì)此三株病毒的50％有效濃度IC50分別為3125，630，781UGML，而鼻病毒的IC50為250UGML。九節(jié)茶對(duì)以上四種病毒的IC50分別為4983，100，1605和3503，換算成原藥材濃度乘81分別為405MGML、081MGML、130MGML、283MGML。其治療指數(shù)分別TC5OIC50為156，78，2025和231說明九節(jié)茶在體外對(duì)常見的引起呼吸道感染病毒具有較寬的抑制病毒譜。

簡介：目的分離新近發(fā)現(xiàn)的兒童呼吸道病毒病原一一人偏肺病毒HUMANMETAPNEUMOVIRUS，HMPV中國大陸流行株，并初步闡明其分子流行病學(xué)規(guī)律。方法選取重慶醫(yī)科大學(xué)兒童醫(yī)院因呼吸道感染住院的患兒，無菌采集鼻咽分泌物兩份。一份用直接免疫熒光法檢測呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒A／B、副流感病毒1、2、3型等常見呼吸道病毒病原。另一份標(biāo)本接種VEROE6細(xì)胞和LLCMK2細(xì)胞進(jìn)行病毒分離，用含胰酶的病毒生長培養(yǎng)基維持培養(yǎng)至21天，觀察細(xì)胞病變CPE。出現(xiàn)CPE者，采用RTPCR擴(kuò)增HMPVN、F基因，F(xiàn)基因擴(kuò)增產(chǎn)物純化后測序。用PHYLIP軟件包中的鄰接法與最大節(jié)約法構(gòu)建遺傳進(jìn)化樹，用CLUSTALX軟件進(jìn)行F基因序列比對(duì)分析。收集分析HMPV感染患兒的臨床資料。結(jié)果收集的86份鼻咽分泌物中，有6份接種VEROE6和LLCMK2細(xì)胞后出現(xiàn)CPE，表現(xiàn)為灶性病變、圓縮、顆粒增多，無明顯合胞病變，逐漸發(fā)展為細(xì)胞脫落、漂浮。用RTPCR法成功擴(kuò)增出HMPVN、F基因片段，證實(shí)HMPV中國流行株首次分離成功。遺傳進(jìn)化樹表明此6株分離株全為A型。序列變異分析提示6株分離株之間，擴(kuò)增F基因片段的核苷酸序列及推導(dǎo)的氨基酸序列同源性分別為998％1000％和993％1000％，與代表A亞型的CAN9783的同源性分別為993％996％和987％993％；與代表B亞型的CAN9875的同源性分別為853％856％和953％960％。在6例陽性標(biāo)本中，2例收集于冬季12月、1月，2例春季5月，2例夏季6月、7月。6位HMPV感染患兒年齡都小于2歲，臨床表現(xiàn)有發(fā)熱、咳嗽、流涕、吼喘、呼吸急促、唇周發(fā)紺和雙肺聞及中粗濕噦音，診斷為支氣管肺炎2／6、毛細(xì)支氣管炎2／6、嬰幼兒哮喘1／6和上呼吸道感染1／6。副流感病毒3和腺病毒可為協(xié)同感染病毒病原。結(jié)論首次在中國大陸成功分離獲得6株HMPV，從活病毒水平證實(shí)HMPV是導(dǎo)致中國兒童下呼吸道感染的重要病毒病原，臨床表現(xiàn)與呼吸道合胞病毒感染相似，并可能與哮喘發(fā)作關(guān)。采用病毒分離技術(shù)，HMPV在呼吸道感染患兒中的檢出率約為7％6／86。A型可能是西南地區(qū)的主要流行亞類。副流感病毒3、腺病毒能與HMPV協(xié)同感染患兒。PARTⅡ人偏肺病毒融合蛋白基因的克隆與真核表達(dá)目的采用BACTOBAC桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)真核表達(dá)人偏肺病毒F蛋白。方法重組供體質(zhì)粒RPFASTBACHTHMPVF由美國亞拉巴馬大學(xué)WAYNEMSULLENDER教授饋贈(zèng)。在大腸桿菌DH5CZ中擴(kuò)增，酶切證實(shí)后，轉(zhuǎn)化含有穿梭質(zhì)粒BAC和輔助質(zhì)粒的感受態(tài)大腸桿菌DHLOBAC，經(jīng)藍(lán)白斑篩選陽性克隆，提取重組穿梭質(zhì)粒RBACHMPVF。PCR擴(kuò)增和測序證實(shí)后，轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞SF9包裝桿狀病毒，經(jīng)數(shù)次擴(kuò)增獲得高滴度重組桿狀病毒后，感染SF9細(xì)胞表達(dá)F蛋白，觀察細(xì)胞病變。結(jié)果擴(kuò)增的重組供體質(zhì)粒RPFASTBACHTHMPVF酶切出現(xiàn)F基因目的片斷，轉(zhuǎn)化DHL0BAC，獲得重組穿梭質(zhì)粒RBACHMPVF。后者經(jīng)PCR擴(kuò)增得到3994BP片斷，測序證實(shí)無突變發(fā)生。RBACHMPVF轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞SF9獲得重組桿狀病毒。重組病毒感染新鮮SF9細(xì)胞后，出現(xiàn)胞體變大、顆粒增多、細(xì)胞破壞直至逐漸脫落，提示F蛋白表達(dá)成功，WESTERNBLOT鑒定須等待抗體成功制備。結(jié)論利用昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)成功表達(dá)了人偏肺病毒融合蛋白，為今后研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能和抗體、疫苗制備奠定了基礎(chǔ)。PARTⅢ人偏肺病毒主要蛋白的免疫信息學(xué)分析目的分別預(yù)測人偏肺病毒主要抗原即融合蛋白、黏附蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)和B細(xì)胞表位。方法根據(jù)氨基酸序列，分別預(yù)測蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)、跨膜區(qū)域、親水性、表面可及性與抗原性指數(shù)，綜合分析這些參數(shù)，預(yù)測蛋白的B細(xì)胞抗原表位。結(jié)果對(duì)于融合蛋白，N段2225、6984、8996、108142、165169、174一177、183192、22023L、241、380、244252、325327、341346、430435、455470區(qū)段形成Α螺旋的可能性大；513、3639、4451、147150、155159、201207、257263、268280、285287、352354、388392、39740L、4084¨、416427、436440、475、492500、506508、528530區(qū)段可能為P一折疊區(qū)域；1516、6163、97100、152一153、178181、42、197、2082¨、254255、264、281、292297、306308、313315、32L一323、330331、355358、367、414、393395、404406、488489、502、519522、531534區(qū)段可能形成轉(zhuǎn)角或無規(guī)則卷曲結(jié)構(gòu)，為柔性區(qū)域。結(jié)合多種參數(shù)分析，B細(xì)胞表位可能位于N段L528、88一LU2、L6LL89、195202、2062L3、245257、290299、302309、3L8334、410419、515526區(qū)段。對(duì)于黏附蛋白，二級(jí)結(jié)構(gòu)主要為柔性區(qū)域，占621％，位于蛋白N端273L、3839、5677、81124、131一146、151167、180一183、L84188、193212、219區(qū)段；Α一螺旋占2237％位于蛋白N端526、4046、125130、168175、213218區(qū)段；Β一折疊占1553％，位于蛋白N端14、3237、4755、7880、147150、176179、189192區(qū)域。N端第3251位氨基酸殘基為跨膜區(qū)。B細(xì)胞表位位于G蛋白N端5577、80104、¨1126、130167、178210區(qū)段。結(jié)論應(yīng)用生物信息學(xué)分析主要抗原蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)B細(xì)胞表位，為進(jìn)一步研究蛋白特征、單克隆抗體制備及表位疫苗研制奠定了基礎(chǔ)。

簡介：點(diǎn)擊查看更多小干擾RNA對(duì)丙型肝炎病毒核心蛋白基因表達(dá)的抑制作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：中國圖書資料分類法單位代碼10660分類號(hào)R74309學(xué)號(hào)S080221貴陽醫(yī)學(xué)院貴陽醫(yī)學(xué)院2011屆碩士學(xué)位論文屆碩士學(xué)位論文經(jīng)顱電刺激對(duì)血管性癡呆大鼠認(rèn)知功能及ACACHE和NR2BNR2B活性活性的影響研究生漆偉男導(dǎo)師劉芳教授年級(jí)2011級(jí)專業(yè)神經(jīng)病學(xué)2011年5月8日貴陽醫(yī)學(xué)院2011屆碩士畢業(yè)生論文2經(jīng)顱電刺激對(duì)血管性癡呆大鼠認(rèn)知功能及ACACHE和NR2BNR2B活性活性的影響貴醫(yī)附院神經(jīng)內(nèi)科漆偉男導(dǎo)師劉芳教授摘要目的觀察經(jīng)顱電刺激治療（TES）對(duì)血管性癡呆（VD）大鼠認(rèn)知功能恢復(fù)的影響，探討經(jīng)顱電刺激治療對(duì)認(rèn)知功能障礙改善的作用及其作用機(jī)制。方法成年SD用MRIS水迷宮試驗(yàn)進(jìn)行篩查，將學(xué)習(xí)能力相近的85只大鼠分為正常對(duì)照、假手術(shù)組、血管性癡呆組。采用“兩血管阻斷硝普鈉降壓”法建立VD大鼠模型。將模型組大鼠再隨機(jī)分為VD組（模型組）和VD經(jīng)顱電刺激低、中、高電壓（500V、1000V、1500V）組（經(jīng)顱電刺激治療組），模型組不給予任何干預(yù)處理，治療組在造模后第8天給予經(jīng)顱電刺激治療，每天連續(xù)刺激3次14天一療程，休息1天再行第二療程治療，共30天。治療前后各組均采用MRIS水迷宮的定位航行實(shí)驗(yàn)、空間探索實(shí)驗(yàn)對(duì)大鼠記憶功能進(jìn)行測評(píng)，應(yīng)用HE染色觀察海馬神經(jīng)元數(shù)目和形態(tài)，用免疫組化染色測查乙酰膽堿酯酶（ACHE）及N一甲基一D一天冬氨酸一2B受體（NMDAR陽性細(xì)胞表達(dá)。結(jié)果假手術(shù)組與正常對(duì)照組比，記憶功能相似，海馬CA1區(qū)神經(jīng)元未見神經(jīng)結(jié)構(gòu)改變。而模型組、治療組出現(xiàn)不同程度的結(jié)構(gòu)紊亂，伴有神經(jīng)細(xì)胞水腫、變性和神經(jīng)細(xì)胞壞死，間質(zhì)有不同程度水腫、血管充血。但治療組神經(jīng)元損傷程度較模型組輕。治療前模型組、治療組平均逃避潛伏期、穿越平臺(tái)次數(shù)評(píng)分無顯著性差異。而經(jīng)顱電刺激治療后，各治療組大鼠平均逃避潛伏期明顯縮短，穿越平臺(tái)次數(shù)增多，尤以中、高電壓電刺激組明顯，治療組海馬CA1區(qū)的乙酰膽堿酯酶陽性細(xì)胞表達(dá)較模型組大鼠減低，NR2B陽性細(xì)胞較模型組大鼠減少。并且隨著電壓的升高，空間行為記憶及免疫組化改變?cè)矫黠@。結(jié)論經(jīng)顱電刺激治療可改善血管性癡呆大鼠的認(rèn)知功能，作用機(jī)制可能與減少海馬區(qū)乙酰膽堿酯酶、及N一甲基一D一天冬氨酸一2B受體陽性細(xì)胞表達(dá)有關(guān)。關(guān)鍵詞血管性癡呆；經(jīng)顱電刺激；HE染色；乙酰膽堿酯酶；N一甲基一D一天冬氨酸一2B受體。

簡介：中山大學(xué)博士學(xué)位論文重組雙自殺基因腺病毒ADCPCDGLYTK靶向治療鼻咽癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名王國慧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師吳沛宏20070421生些奎蘭墮堂垡堡皇重塑塾魚薹莖嬰鑒塹墨壘蘭￡蘭望型鑒塑塹墨塑堡盟塞墼型塑第1章重組腺病毒質(zhì)粒PDC316CPCDGLYTK構(gòu)建高保真PCRPOLYMERASECHAINREACTION擴(kuò)增TK基因，回收PCR產(chǎn)物并用HINDIIISAIL進(jìn)行酶切，疆回收產(chǎn)物，同時(shí)采用HINDLLLSALL酶切穿梭質(zhì)粒PDC316，回收線性化載體片段，1“4DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌E．COLIDH5A，挑取克隆，抽提質(zhì)粒DNA，得到重組質(zhì)粒PDC316．TK，再用ECORLHINDLLL酶切所構(gòu)建質(zhì)粒，回收線性化質(zhì)粒片段。同時(shí)高保真PCR擴(kuò)增CD基因，回收并用HINDIIIECORL酶切，回收片段，與PDC316．TK酶切線性化片段經(jīng)過連接、轉(zhuǎn)化、篩選等方法得到重組質(zhì)粒PDC316CDGLYTK，XBAIECORI酶切質(zhì)粒，回收線性化片段以備用。另外，高保真PCR擴(kuò)增CP啟動(dòng)子，XBAIECORL酶切PCR產(chǎn)物，回收產(chǎn)物，與PDC316．CDGLYTK酶切片段經(jīng)過連接、轉(zhuǎn)化、篩選等方法到重組質(zhì)粒PDC316CPCDGLYTK。重組質(zhì)粒經(jīng)過PCR電泳、酶切電泳法及DNA測序法等證明TK、CD、CP基因序列插入方向正確。第2章重組腺病毒ADCPCDGLYTK包裝純化當(dāng)HEK293細(xì)胞長至80～90％融合時(shí)，取骨架質(zhì)粒PBHGIOXDELTAE1、E3CRE和質(zhì)粒PDC316CPCDGLYTK，用LIPOFECTAMINE2000脂質(zhì)體進(jìn)行轉(zhuǎn)染293細(xì)胞，2H后換成含5％的培養(yǎng)液，培養(yǎng)10～14天至出現(xiàn)細(xì)胞病變效應(yīng)CPE，收集病變細(xì)胞，37“C、．70“C反復(fù)凍融3次。取L／3病毒上清液再感染293細(xì)胞進(jìn)行大量擴(kuò)增，3天后收集細(xì)胞，PBS重懸，反復(fù)凍融3次，最后CSCI梯度離心純化，80“C保存?zhèn)溆?。擴(kuò)增后的病毒滴度采用快速腺病毒滴度TCID50檢測試劑盒進(jìn)行測定，病毒滴度為5．610’TCID50，ML。第3章逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RTPCR檢測CDGLYTK基因體外表達(dá)CNEI、NP69細(xì)胞予對(duì)數(shù)生長期分別加入病毒載體M01為1001，感染2H，

簡介：第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文攜帶P53基因的增殖腺病毒CNHK600P53治療肺癌和攜帶CD20全長抗體的腺病毒ADSGCD20治療淋巴瘤的實(shí)驗(yàn)研究姓名陳潔申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)內(nèi)科學(xué)血液病指導(dǎo)教師達(dá)萬明20050501第PQ軍|廷人舉博IJ論義縮略詞表縮寫英文全稱中文全稱ADADENOVIRUS腺病毒AMPAMPICILLIN氨芐青霉素BSABOVINESERUMALBUMIN小牛血清白蛋白DMEMDULBECCO’SMODIFIEDEAGLEMEDIUMDMEM培養(yǎng)基EDTAETHYLENEDIAMINETETRAACETICACID乙二胺四乙酸FBSFETALBOVINESERUM胎牛血清HIFHYPOXIAINDUCIBLEFACTOR缺氧誘導(dǎo)因子HREHYPOXIARESPONSEELEMENT缺氧反應(yīng)元件HTERTHUMANTELOMERASEREVERSETRANSCRIPTASE人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶KDAKILODALTONS千道爾頓LBLURIABERTANICULTUREMEDIUMLB培養(yǎng)基MEMMINIMALESSENTIALMEDIUMMEM培養(yǎng)液MOIMULTIPLICITYOFINFECTION感染復(fù)數(shù)PCRPOLYMERASECHAINREACTION多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PFUPLAQUEFORMINGUNIT空斑形成單位TCIDS0TISSUECULTUREINFECTIOUSDOSE5050％組織培養(yǎng)感染劑量ONYX015CRADWITHE1B55KDDELETEDE1B55KD缺失腺病毒ADP53ADENOVIRUSWITHP53重組人P53的腺病毒MABMONOCLONALANTIBODY單克隆抗體NHLNONHODGKIN’SLYMPHONLA非霍奇金氏淋巴瘤ADPADENOVIRUSDEATHPROTEIN腺病毒死亡蛋白IFAINDIRECTIMMUNOFLUORESCENCEASSAY問接免疫熒光試驗(yàn)

簡介：第一部分上海部分地區(qū)小于5歲兒童輪狀病毒性腹瀉的臨床分析目的了解上海地區(qū)5歲以下，急性稀水樣便腹瀉患兒中輪狀病毒感染的流行情況及其臨床特征，有無伴隨腸道外損傷，及輪狀病毒感染所造成的直接疾病負(fù)擔(dān)。方法留取2006年6月至2007年3月部分復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院門診、住院及院內(nèi)感染腹瀉患兒糞便標(biāo)本，應(yīng)用免疫層析膠體金法檢測輪狀病毒。本實(shí)驗(yàn)主要的研究對(duì)象為年齡小于等于5歲，病程少于等于2周。大便培養(yǎng)無條件致病菌生長者。結(jié)果共收集849例急性腹瀉糞便標(biāo)本，小于等于5歲人群輪狀病毒陽性檢出率425％約85％患兒年齡在2歲以下；病例全年均有發(fā)生，發(fā)病高峰主要集中在12月例到次年1月例；有55例患兒伴隨腸道外損害。50％社區(qū)獲得性腹瀉住院患兒住院費(fèi)用波動(dòng)于1473740296元PP；50％院內(nèi)感染腹瀉病患兒住院費(fèi)用波動(dòng)于30968105523元PP。結(jié)論輪狀病毒是上海地區(qū)嬰幼兒病毒性腹瀉的重要病原，部分患兒伴腸道外損傷。第二部分上海部分地區(qū)小于5歲兒童星狀病毒性腹瀉的臨床分析目的了解上海地區(qū)5歲以下腹瀉患兒中星狀病毒感染的臨床流行病學(xué)特點(diǎn)。方法留取2006年6月至2007年3月部分復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院5歲以下門診、住院及院內(nèi)感染腹瀉患兒糞便標(biāo)本，排除輪狀病毒感染后應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測星狀病毒。結(jié)果共檢測276例急性腹瀉糞便標(biāo)本，小于5歲兒童星狀病毒陽性標(biāo)本28例，小于等于5歲人群星狀病毒陽性檢出率116％，536％患兒年齡在2歲以下；觀測期間病例散發(fā)，發(fā)病高峰主要集中在10月例到次年1月例；有一例患兒伴隨腸道外損害。結(jié)論星狀病毒是上海地區(qū)嬰幼兒病毒性腹瀉的又一重要病原。

簡介：點(diǎn)擊查看更多2009-2010年云南省腸道病毒相關(guān)無菌性腦炎的分子流行學(xué)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的了解中心性肥胖青少年認(rèn)知功能及心血管危險(xiǎn)因素的聚集情況。方法在合肥市和馬鞍山市分別招募到初中學(xué)生34人和33人作為研究對(duì)象。通過人體測量獲得身高、體重、腰圍WC、臀圍HC以及腹部、上臂、肩胛下角3處皮脂厚度SF等指標(biāo)，以體塊指數(shù)BMI作為判定肥胖的標(biāo)準(zhǔn)；以腰臀比腰臀比腰圍臀圍，WHR同性別年齡組2005年安徽省城市學(xué)生腰臀比第90百分位數(shù)作為中心性肥胖的界定標(biāo)準(zhǔn)。運(yùn)用雙能X線吸收法DXA測定體成分，磁共振測定右腦海馬和額葉部位的波譜，事件相關(guān)電位儀測定P300潛伏期。采用生化分析儀測定血糖和各項(xiàng)血脂指標(biāo)，多普勒彩色超聲測定心臟參數(shù)、大腦左側(cè)前、中、后動(dòng)脈及左右頸部總動(dòng)脈、頸內(nèi)及頸外動(dòng)脈血液動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。結(jié)果中心性肥胖組青少年的體重、BMI、腰圍、腰臀比、上臂、肩胛下角、腹部3處皮脂厚度、體脂百分含量都高于超重組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P潛伏期結(jié)果顯示，調(diào)整DXA測定的體脂含量后，中心性肥胖組P300潛伏期的修正均數(shù)38234±1426，MS高于超重組33589±1086，MS，中心性肥胖組青少年的P潛伏期較超重組延長F506，P0033。中心性肥胖組青少年甘油三酯高于超重組，而高密度脂蛋白低于超重組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P值分別為0038，0013。中心性肥胖組心臟超聲的5項(xiàng)檢測指標(biāo)主動(dòng)脈根部內(nèi)徑、左房內(nèi)徑、左室內(nèi)徑、室間隔厚度、左室后壁厚度均高于超重組，兩組間主動(dòng)脈根部內(nèi)徑、左房內(nèi)徑、室間隔厚度的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。經(jīng)顱彩超比較兩組左腦動(dòng)脈參數(shù)顯示，中心性肥胖組MCA的VD探測深度56MM低于超重組，而PI探測深度54MM高于超重組P值分別為0043，0033。ACA的探測結(jié)果顯示，中心性肥胖組的VD探測深度66MM低于超重組，而PI探測深度66MM和68MM、RI探測深度66MM都高于超重組P0041，0042。中心性肥胖組BA的VM近端探測深度74MM、78MM和遠(yuǎn)端探測深度80MM、VS近端探測深度72MM、VD近端探測深度72MM、74RAM、76MM、78MM和遠(yuǎn)端探測深度80MM都低于超重組，而PI近端探測深度74MM和遠(yuǎn)端探測深度80MM、砒近端探測深度74MM、76MM和遠(yuǎn)端探測深度80MM都高于超重組P005。中心性肥胖組VA的PI左側(cè)深度60MM、RI左側(cè)深度60MM都高于超重組P005。左右頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈及頸動(dòng)脈分叉處參數(shù)結(jié)果分析顯示，中心性肥胖組的左頸總動(dòng)脈內(nèi)徑、內(nèi)膜中層厚度，右頸總動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度、血流脈動(dòng)指數(shù)PI、阻力指數(shù)RI，右頸內(nèi)動(dòng)脈內(nèi)徑、內(nèi)膜中層厚度顯著高于超重組P005。左頸總動(dòng)脈血液收縮期峰值速度VS、舒張末期峰值速度VD，右頸總動(dòng)脈分叉處血液VD低于超重組P005。結(jié)論中心性肥胖可能影響青少年腦代謝的過程，同時(shí)延長認(rèn)知加工時(shí)間；中心性肥胖青少年可能存在心血管危險(xiǎn)因素的聚集現(xiàn)象。

簡介：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)碩士學(xué)位論文，獼猴轉(zhuǎn)基因載體病毒的篩選和新；T型獼猴認(rèn)知自動(dòng)測試系統(tǒng)的建立；作者姓名廖志星學(xué)科專業(yè)神經(jīng)生物學(xué)導(dǎo)師姓名胡新天研究員完成時(shí)間二0一四年十月二日中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。除已特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含任何他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明。作者簽名趁簽字日期加≯了／一Y中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)位論文授權(quán)使用聲明作為申請(qǐng)學(xué)位的條件之一，學(xué)位論文著作權(quán)擁有者授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)擁有學(xué)位論文的部分使用權(quán)，即學(xué)校有權(quán)按有關(guān)規(guī)定向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以將學(xué)位論文編入中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫等有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人提交的電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。保密的學(xué)位論文在解密后也遵守此規(guī)定。／叼公開口保密年導(dǎo)師簽名塑塑墜簽字日期絲叢生生星～肼壽一卜鏖冽鈺飆簽日者字怍整

簡介：移植排斥反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是同種反應(yīng)性T細(xì)胞識(shí)別同種抗原后發(fā)生的細(xì)胞免疫應(yīng)答，其機(jī)制為移植術(shù)后，供、受者來源的DC可遷移至受者外周免疫器官，通過直接或間接識(shí)別途徑，向受者同種反應(yīng)性T細(xì)胞提呈同種抗原，并使之激活，進(jìn)而誘導(dǎo)針對(duì)同種抗原的免疫應(yīng)答。因此，通過基因治療干預(yù)DC與同種反應(yīng)性T細(xì)胞間的相互作用，有可能成為防治移植排斥反應(yīng)的有效策略。迄今，多數(shù)干預(yù)策略的原理是阻斷同種免疫應(yīng)答中DC和T細(xì)胞間的共刺激途徑，使T細(xì)胞因缺乏共刺激信號(hào)而失能ANERGY或凋亡。參與T細(xì)胞活化的共刺激分子主要包括兩類，即免疫球蛋白超家族IGSF成員和腫瘤壞死因子受體超家族TNFRSF成員。研究顯示，單獨(dú)由IGSF共刺激分子如CD28B7啟動(dòng)的信號(hào)，并不能持續(xù)激活T細(xì)胞，也不能形成記憶性T細(xì)胞，還需TNFRSF共刺激分子參與。屬于TNFRSF的T細(xì)胞共刺激分子包括OX40、41BB、CD27、CD30和HVEM，均屬Ⅰ型跨膜蛋白。其中，CD27和HVEM組成性表達(dá)于NAYVET細(xì)胞表面；OX40、41BB和CD30在T細(xì)胞識(shí)別抗原數(shù)小時(shí)后誘導(dǎo)性表達(dá)。41BB于1989年在篩選活化T細(xì)胞CDNA文庫時(shí)被發(fā)現(xiàn)，其并不組成性表達(dá)于靜止T細(xì)胞表面，而僅表達(dá)于活化CD4T、CD8T和NK細(xì)胞等表面。最新研究表明，41BB也可表達(dá)于DC、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞表面。41BB的配體表達(dá)于活化的APC如DC、B細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞表面。根據(jù)41BB與41BBL所分別表達(dá)的細(xì)胞類型，提示41BB可能參與固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答的多個(gè)階段。近期研究顯示，與CD40相同，41BB也是參與DC活化的分子之一。通過啟動(dòng)41BB信號(hào)途徑，可誘導(dǎo)DC產(chǎn)生IL6和IL12等，同時(shí)上調(diào)共刺激分子B71和B72表達(dá)。與CD40CD40L信號(hào)途徑的不同之處是，CD40信號(hào)的啟動(dòng)有賴于活化T細(xì)胞提供配體CD40L，而啟動(dòng)DC表面41BB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的配體可能來源于鄰近的APC或DC自身。因此，41BB的生物學(xué)功能不僅限于參與T細(xì)胞活化。研究發(fā)現(xiàn)B7CD28共刺激信號(hào)主要在T細(xì)胞活化的前期起作用，可促進(jìn)T細(xì)胞增殖并維持其短期存活；41BB41BBL信號(hào)通路主要在免疫應(yīng)答后期被啟動(dòng)，可維持T細(xì)胞活化，并是CD8T細(xì)胞存活和記憶性細(xì)胞形成的必需條件。免疫應(yīng)答過程中，尤其在CD28分子表達(dá)缺陷或功能障礙的情況下，41BB41BBL通路可能在提供共刺激信號(hào)中發(fā)揮極為重要的作用。結(jié)論1借助大腸桿菌BJ5183同源重組及ADEASY載體系統(tǒng)，成功制備攜帶小鼠41BB胞外段和人IGGFC融合基因的復(fù)制缺陷型重組腺病毒AD41BBLG，國內(nèi)外均未見相關(guān)報(bào)道。2在成功制備AD41BBLG重組腺病毒的基礎(chǔ)上，初步探討其干預(yù)移植排斥反應(yīng)的作用及機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)AD41BBLG可抑制同種反應(yīng)性T細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子分泌、抑制CD8的IFNΓ細(xì)胞產(chǎn)生、抑制單個(gè)核細(xì)胞浸潤移植物，并有效延長小鼠同種移植心臟存活時(shí)間。本課題研究成果可望為干預(yù)移植排斥反應(yīng)提供新策略。

簡介：甲型流感病毒長期以來一直是威脅人類健康的重要病原體之一，對(duì)其變異規(guī)律進(jìn)行深入的分析研究在流感的防治工作中具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本研究借助近年來發(fā)展起來的數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)和進(jìn)化樹分析方法，從生物信息學(xué)的角度對(duì)流感病毒H3抗原的變異規(guī)律進(jìn)行了系統(tǒng)研究，我們認(rèn)為H3亞型流感病毒在人間的變異呈現(xiàn)出逐漸加速的趨勢(shì)，而這主要是受到了越來越強(qiáng)大的免疫屏障的篩選作用所致。目前免疫策略的核心任務(wù)是保護(hù)高危人群，但是這種策略并不能夠阻止，反而可能加速了新變異株的出現(xiàn)。通過更進(jìn)一步的生物信息學(xué)分析，并且在全球采取統(tǒng)一的主動(dòng)免疫策略，人類應(yīng)當(dāng)有可能消滅已有亞型病毒的繼續(xù)流行。這將是一個(gè)異常艱巨，然而值得嘗試的任務(wù)。而本研究提供的分析結(jié)果和具體建議則可作為防治工作的決策和實(shí)施之理論依據(jù)與參考。本研究在回答流行病學(xué)問題的同時(shí)，還系統(tǒng)完善了遺傳序列變異規(guī)律研究的數(shù)據(jù)挖掘方法體系，提出了大數(shù)據(jù)集進(jìn)行精確進(jìn)化樹分析的方法，分析結(jié)果顯示這些方法能夠很好的滿足生物信息學(xué)中相應(yīng)分析的需求，值得進(jìn)一步加以推廣和應(yīng)用。

簡介：目的探討葉酸對(duì)柯薩奇病毒B3COXSACKIEVIRUSB3CVB3誘導(dǎo)的乳鼠心肌細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因與蛋白表達(dá)變化的影響。方法取成熟健康雌性WISTAR大鼠隨機(jī)分為四組正常對(duì)照組葉酸組柯薩奇B3病毒組葉酸對(duì)柯薩奇B3病毒感染干預(yù)組。各組大鼠與成熟雄性大鼠置于交配籠中1∶1合籠。對(duì)照組大鼠自由進(jìn)水和食物葉酸組大鼠用補(bǔ)充葉酸的飼料喂養(yǎng)柯薩奇病毒B3組大鼠用柯薩奇B3病毒腹腔注射持續(xù)5天柯薩奇病毒葉酸組用補(bǔ)充葉酸的飼料喂養(yǎng)柯薩奇B3病毒腹腔注射5天。待自然分娩后取乳鼠心臟液氮保存檢測備用。制作心肌細(xì)胞病理切片觀察乳鼠心肌損傷TUNEL法檢測乳鼠心肌凋亡細(xì)胞WESTERNBLOT及RTPCR測定乳鼠心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白BAXBCL2CASPASE3及基因表達(dá)。結(jié)果納入實(shí)驗(yàn)大鼠40只其中病毒組死亡3只1只中途流產(chǎn)1只所產(chǎn)乳鼠中有2只為死胎病毒加葉酸組死亡1只35只母鼠所產(chǎn)的乳鼠進(jìn)入結(jié)果分析。懷孕大鼠注射柯薩奇病毒后乳鼠心肌細(xì)胞損傷明顯光鏡可見心肌細(xì)胞崩解、斷裂TUNEL法可見凋亡細(xì)胞增加加用葉酸后狀態(tài)改善。病毒組乳鼠心肌細(xì)胞BAXCASPASE3蛋白及基因的表達(dá)高于葉酸病毒組P結(jié)論早期懷孕母鼠感染柯薩奇病毒B3后可導(dǎo)致乳鼠心肌細(xì)胞損傷明顯及凋亡增加補(bǔ)充葉酸對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞凋亡具有明顯的預(yù)防作用其作用機(jī)制通過上調(diào)凋亡抑制基因BCL2蛋白及基因的表達(dá)、降低促凋亡基因BAXCASPASE3蛋白及基因的表達(dá)有效的保護(hù)乳鼠心肌細(xì)胞。

簡介：乙型肝炎是由乙型肝炎病毒HBV，HEPATITISBVIRUS引起的一種影響人類健康的重要傳染病。乙肝疫苗的接種是目前控制乙型肝炎感染的最有效的措施，但是傳統(tǒng)的乙型肝炎亞單位疫苗是由乙型肝炎病毒的表面抗原和鋁佐劑組成，鋁佐劑決定了該疫苗僅能引起很好的體液免疫而不能產(chǎn)生有效的細(xì)胞免疫，因此傳統(tǒng)的乙型肝炎亞單位疫苗僅激活體液免疫反應(yīng)，沒有能力激活細(xì)胞免疫。所以，乙型肝炎亞單位疫苗僅起到預(yù)防乙型肝炎病毒的感染，沒有治療作用。佐劑可以增強(qiáng)細(xì)胞免疫，體液免疫，活T細(xì)胞，上調(diào)細(xì)胞因子的表達(dá)，增強(qiáng)免疫記憶，并能改變其免疫反應(yīng)類型。因此對(duì)佐劑進(jìn)行改良可能增強(qiáng)傳統(tǒng)乙型肝炎亞單位疫苗細(xì)胞疫免有望使之成為治療性疫苗。左旋咪唑LEVAMISOLE，LMS是一種咪唑類似物，最初廣泛的用動(dòng)物和人驅(qū)除體內(nèi)寄生蟲。近年米許多研究報(bào)道表明，LMS是一種良好的免疫增強(qiáng)劑它能使受抑制的吞噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞功能恢復(fù)正常，可以作為一種佐劑物質(zhì)用丁癌癥治療的研究。我們實(shí)驗(yàn)室近年來對(duì)左旋咪唑的佐劑作用進(jìn)行了人量的研究，發(fā)現(xiàn)左旋咪唑能夠增強(qiáng)口蹄疫疫苗滅活疫苗的細(xì)胞免疫和體液免疫，并初步探索了作用機(jī)理。本研究利用LMS與傳統(tǒng)的乙型肝炎亞單位疫苗混合免疫C57BL6小鼠，檢測產(chǎn)生的體液和細(xì)胞免疫水平，結(jié)果表明在免疫后21天，LMS誘導(dǎo)產(chǎn)生了較高水平的IGG利IGG2AIGG1的比率；LMS刺激產(chǎn)生了較強(qiáng)的T細(xì)胞增值和CTL反應(yīng)。為進(jìn)一步探討LMS作為佐劑增強(qiáng)免疫反應(yīng)的作用機(jī)理，對(duì)細(xì)胞因子和DC細(xì)胞表面分子進(jìn)行進(jìn)行檢測，結(jié)果表明LMS能夠上調(diào)細(xì)胞因子的表達(dá)和上調(diào)DC表面分子CD11C的表達(dá)。同時(shí)在以上實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上研究了不同濃度的LMS與乙型肝炎亞單位苗疫分開或混合免疫C57BL6小鼠，結(jié)果表明在免疫后21天，1％LMS分開或混合免疫均能誘導(dǎo)產(chǎn)生了較高水平的IGG和IGG2AIGG1的比率1％LMS分開或混合免疫均能刺激產(chǎn)生了較強(qiáng)的T細(xì)胞增值和CTL反應(yīng)，進(jìn)一步探討LMS作為佐劑增強(qiáng)免疫反應(yīng)的作用機(jī)理，1％LMS分開或混合免疫都上調(diào)CD4T細(xì)胞IL4，IFNΓ和CD8T細(xì)胞IFNΓ表達(dá)。以上研究結(jié)果表明1％LMS與乙型肝炎亞單位苗疫分開或混合免疫能夠增強(qiáng)其細(xì)胞免疫效果。DNA疫苗能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生有效免疫反應(yīng)，尤其是能夠產(chǎn)生有效的細(xì)胞免疫的優(yōu)點(diǎn)，在許多疫苗的研究中已經(jīng)取得很人進(jìn)步，可以彌補(bǔ)了傳統(tǒng)乙型肝炎疫苗的不足。但是DNA疫苗在大動(dòng)物和人體中的免疫效力尚不理想，因此如果克服DNA疫苗的不足，乙型肝炎DNA疫苗有望成為HBV治療性疫苗。41BBL，OX40L，和CD70是APC細(xì)胞進(jìn)行抗原遞呈的第二信號(hào)，能夠增強(qiáng)T細(xì)胞的活化增殖，分化，增強(qiáng)CTL反應(yīng)，延KT細(xì)胞的存活時(shí)間和增強(qiáng)免疫記憶。因此在本實(shí)驗(yàn)中我們利用41BBL，OX40L，和CD70二種共刺激分子作為分子佐劑與乙型肝炎DNA疫苗一起免疫C57BL6小鼠，結(jié)果表明在免疫后42天，這二種共刺激分子佐劑均能很好的誘導(dǎo)產(chǎn)生了較高水平的IGG利IGG2AIGG1的比率；產(chǎn)生較強(qiáng)的T細(xì)胞增值和CTL反應(yīng)，同時(shí)能夠上調(diào)CD4T細(xì)胞IL4，IFNΓ和CD8T細(xì)胞1FNΓ的表達(dá)。同時(shí)對(duì)其能否增強(qiáng)免疫記憶反應(yīng)也進(jìn)行研究，其結(jié)果表明，這二種共刺激分子均能增加記憶性T細(xì)胞的數(shù)目，增強(qiáng)免疫記憶反應(yīng)；并進(jìn)一步分析增強(qiáng)免疫記憶反應(yīng)機(jī)理，對(duì)免疫記憶反應(yīng)相關(guān)的基因表達(dá)進(jìn)行了檢測，結(jié)果表明這三種共刺激分子作為佐劑均能上調(diào)BCL2，SPI2A，IL7RA和IL15RA的表達(dá)，說明其佐劑功能在免疫記憶方面也有一定的影響。以上研究結(jié)果表明41BBL，OX40L，和CD70三種共刺激分子作為分子佐劑，能夠有效的增強(qiáng)細(xì)胞免疫和免疫記憶反應(yīng)。亞總而言之，本研究證實(shí)了LMS是一種良好的免疫增強(qiáng)劑，能夠很好的提高傳統(tǒng)的乙型肝炎亞單位疫苗佐劑的細(xì)胞免疫，同時(shí)發(fā)現(xiàn)41BBL，OX40L，和CD70三種共刺激分子作為分子佐劑與乙型肝炎DNA疫苗一起免疫能夠有效的增強(qiáng)細(xì)胞免疫和免疫記憶反應(yīng)，為乙型肝炎治療性疫苗的研究奠定了基礎(chǔ)，為佐劑的機(jī)理研究提供了理論依據(jù)，同時(shí)為佐劑的改良和研發(fā)提供了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。