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簡介:湖北中醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文嬰兒巨細(xì)胞病毒肝炎的臨床分析及中藥聯(lián)合更昔洛韋的療效評(píng)價(jià)姓名王定成申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)中西醫(yī)結(jié)合兒科指導(dǎo)教師鄢素琪20090512現(xiàn)中性粒細(xì)胞升高。結(jié)論1嬰兒CMV肝炎病情復(fù)雜,臨床表現(xiàn)多樣。絕大數(shù)患兒均以黃疸持續(xù)不退或退而復(fù)現(xiàn)或進(jìn)行性加重者而來就診,此病常并發(fā)先天畸形,并發(fā)或繼發(fā)感染,部分患兒并發(fā)機(jī)會(huì)致病菌感染的敗血癥,還有伴有維生素D、維生素K缺乏等。2沖藥聯(lián)合更昔洛韋治療嬰兒CMV肝炎較單純更昔洛韋治療臨床療效有顯著性差異,無明顯藥物毒副作用。關(guān)鍵詞巨細(xì)胞病毒肝炎;嬰兒;中藥;更昔洛韋
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簡介:本研究利用內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)INTERNALRIBOSOMEENTRYSITE,IRES構(gòu)建可用于雙順反子共表達(dá)的腺病毒重組體。本研究依據(jù)IRES的堿基序列,設(shè)計(jì)并合成一對(duì)特異性引物,以商品化的真核雙表達(dá)載體PIRES為模板,擴(kuò)增IRES及其調(diào)控序列IVS,克隆入T載體,獲得PGEMTIRES克隆載體MCSA、MCVB分別位于IRES序列的上、下游。根據(jù)IRES上、下游多克隆位點(diǎn),設(shè)計(jì)并合成兩對(duì)用于擴(kuò)增目的基因的PCR引物,分別擴(kuò)增出F基因和增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因ENHANCEDGREENFLUESCENTPROTEIN,EGFP,分別克隆至PGEMTIRES,獲得重組質(zhì)粒PGEMTFEGFP。為構(gòu)建共表達(dá)RSVF和EGFP的非復(fù)制型腺病毒重組體,本研究采用了ADEASY系統(tǒng),為進(jìn)一步研究含RSVF和G雙順反子的腺病毒重組體奠定了基礎(chǔ)。
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簡介:蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文正常兒童及癲癇兒童數(shù)學(xué)認(rèn)知事件相關(guān)電位的研究姓名李梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師董選20080301ANEVENTRELMDPOTENTIALSSMDYFORMAFLZCMSTICSCO鯛IFIVCFUNCTIONINNORMALCHILDREN繃墅堡型塵型型一壘墮堅(jiān)ANEVENTRELATEDPOTENTIALSSTUDYFORMATHEMATICSCOGNITIVEFUNCTIONINNORMALCHILDRENANDCHILDRENWITHEPILEPSYABSTRACTOBJECTIVETOINVESTIGATETHECOGNITIVEDEVELOPMENTANDTHEBRAINMECHANISMOFMENTALCALCULATIONOFSCHOOLAGEDCHILDRENUSINGEVENTRELATEDPOTENTIALS,ANDTHEEFFECTSOFSUBCLINICALEPILEPTIFORMDISCHARGESONMATHEMATICSCOGNITIVEFUNCTIONINBENIGNEPILEPSYOFCHILDHOOD誦TLLEENTROTEMPORALSPIKESBECTSMETHODSONEHUNDREDANDTWENTYCHILDRENAGEDFROM7TO12YEARSOLD,ELEVENBEETSCHILDRENANDELEVENNORMALCHILDRENTHATMATCHAGE,GENDER,YEARSOFEDUCATIONANDFAMILYSOCIOECONOMICSTATUSWITHBECTSCHILDRENWERESUBJECTS,USINGSIMPLEADDITIONS,SUBTRACTIONSANDMULTIPLICATIONWITHINTWENTY弱VISUALSTIMULUS,EVENTRELATEDPOTENTIALSWEREDISTILLEDBYBESARESULTS1RESPONSETIMEOFMENTALCALCULATIONDECREASEDANDTHEACCURACIESOFMENTALCALCULATIONINCREASED誦TLLTHEGROWTHOFCHILDREN’AGE;THEREWASSIGNIFICANTLYSTATISTICALMEANINGPO05FORN2ANDP3AMPLITUDEAMONGDIFFERENTAGEGROUPS,ANDTHEYHADSIMILARTRENDTHATTHEAMPLITUDEDECREASEDFROMSEVENYEAROLDTOEIGHTYEAROLD,ANDINCREASEDFORNINEYEAROLDANDTENYEAROLD,THENDECREASEDAGAINFROMELEVENYEAROLDTOTWELVEYEAROLD2COMPAREDWITHTHECONTROLGROUP,THELATENCYOFP3WASSIGNIFICANTLYPROLONGEDANDTHEAMPLITUDEOFP3DECREACEDINBECTSCHILDRENGROUP;THERESPONSETIMEWASLONGERINTLLEDIFFERENTKINDSOFARITHMETICOPERATIONSANDTHEREWEREMOREERRORSINADDITIONANDSUBTRACTIONINBEETSCHILDRENGROUPTHANINTHECONTROLGROUPCONCLUSIONS1THEOLDERSCHOOLAGEDCHILDRENARE,THESTRONGERTHEIRMENTALCALCULATIONABILITIESN2MAYBERELATEDTOTHERETRIEVALOFARITHMETICFACTS,THEREMAYBEANEGATIVECORRELATIONBETWEENTHEAMPLITUDEOFN2ANDTHEEXTENTRELIANCEONDIRECTRETRIEVALSTRATEGYINTHECALCULATIONANDAPOSITIVECORRELATIONBEWEENTHEAMPLITUDEOFP3ANDTHEMENTALRESOURCESTHATCHILDRENDEVOTEDTOTHETASK2FREQUENTSUBCLINICALEPILEPTIFORMDISCHARGESII
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簡介:分類號(hào)____________密級(jí)______________UDC____________單位代碼______________碩士學(xué)位論文論文題目宮頸液基細(xì)胞與人乳頭瘤病毒篩查宮頸病變的效果評(píng)價(jià)學(xué)號(hào)_________________________作者_(dá)________________________專業(yè)名稱_________________________2012年06月01日籍鳳宇公開10127遺傳學(xué)200902336Q3宮頸液基細(xì)胞與人乳頭瘤病毒篩查宮頸病變的效果評(píng)價(jià)THEEFFECTEVALUATIONOFCERVICALLESIONSCREENINGBYCERVICALTHINPREPCYTOLOGICTESTHUMANPAPILLOMAVIRUSDETECTION研究生姓名籍鳳宇指導(dǎo)教師姓名馬利兵內(nèi)蒙古科技大學(xué)數(shù)理與生物工程學(xué)院包頭014010,中國CIDATEJIFENGYUSUPERVISMALIBINGSCHOOLOFMATHEMATICSPHYSICSBIOLOGICALENGINEERINGINNERMONGOLIAUNIVERSITYOFSCIENCETECHNOLOGYBAOTOU014010,PRCHINA
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簡介:復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文皮膚T細(xì)胞淋巴瘤患者的人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒Ⅰ型感染姓名高紅陽申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)生物物理學(xué)指導(dǎo)教師單易非2002515堡蘭堡堡苧堡壁塑望壁里墮皇耋塑△鲞鲞里塑望皂坐塹墮量三型墮一INFECTIONOFHUMANTLYMPHOTROPICVIRUSTYPEIINPATIENTSWITHCUTANEOUSTCELLLYMPHOMAABSTRACTCUTANEOUSTCELLLYMPHOMACTCLDESIGNATESAGROUPOFNEOPLASMSOFTCELLLYMPHOPROLIFERATIVEDISEASESTHATCLINICALLYORIGINATEINTHESKINORSHOWOBVIOUSMANIFASTATIONOFSKINLESIONSITOCCUPIES60%OFCUTANEOUSMALIGNANTLYMPHOMASCMLANDSHOWSCONSIDERABLEVARIATIONINCLINICALPRESENTATION,HISTOPATHOLOGY,IMMUNOPHENOTYPEANDSOONTHEETIOLOGYOFCTCLREMAINSUNKNOWNANDMAYBERELATEWITHAGENTSSUCHASVIRUSINFECTION,HEREDITY,IMMUNITYANDENVIROMENTTHECOURSEOFCTCLISSLOWSOMESTUDIESSUGGESTTHATCTCLISASSOCIATEDWITHTHEINFECTIONOFHUMANTLYMPHOTROPICVIRUSTYPEIHTLVIHTLVIISAKINDOFHUMANRETROVIRUSWHICHCAUSESADULTTCELLLEUKEMIA/LYMPHOMAATL/LTHISKINDOFVIRUSISENDEMICINJAPAN,THECARIBBEANREGIONANDTHEWESTERNAFRICASINCETHEGEOGRAPHICENVIROMENTINSHANGHAIANDTHEAREASOFJIANGZHEARESIMILARTOSOUTHJAPANWHEREHTLVIISENDEMIC,ITISINTERESTINGWHETHERTHEREISHTLVIINFECTIONINTHESEAREASORNOTINTHISSTUDYPROVIRUSDNAOFHTLVIANDANTIBODIESTOHTLV1WERETESTEDAMONG46CASESOFCTCLPATIENTS’PERIPHERYBLOODWHOARELIVEDAROUNDSHANGHAIANDJIANGZHEAREAANDNEVERTRAVELLEDABROADBYPCR,ELISA,PAANDWESTERNBLOT5CASESWEREFOUNDTOHAVEPROVIRUSDNAOFHTLVIINPBMCANDAMONGTHEM3CASESSHOWEDPOSITIVEWITHHTLVIANTIBODIESINSERUMTHISSTUDYSUGGESTSTHATHTLVIINFECTIONISFOUNDINSHANGHAIANDTHEAREASOFJANGZHE;THEREISSOMERELATIONSHIPBETWEENHTIJ,一IANDCTCL;HTLVIINFECTIONMAYBEONEOFTHEETIOLOGICALFACTORSOFCTCLKEYWORDSCUTANEOUSTCELLLYMPHOMA;HTLVI;INFECTION2
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簡介:從認(rèn)知角度探討學(xué)習(xí)困難兒童內(nèi)部心理特征,逐步成為近四十年以來心理學(xué)、教育學(xué)和醫(yī)學(xué)等學(xué)科研究的熱點(diǎn)。但由于理論、方法和工具的制約,以往關(guān)于學(xué)習(xí)困難兒童認(rèn)知特征的研究缺乏系統(tǒng)性,缺乏將認(rèn)知能力視為一個(gè)有機(jī)整體來研究不同類型的學(xué)習(xí)困難兒童。而最新修改的韋氏兒童智力量表第四版簡稱WLSCIV結(jié)合了當(dāng)代多個(gè)智力理論的結(jié)晶,也體現(xiàn)了當(dāng)代認(rèn)知心理學(xué)和神經(jīng)心理學(xué)理論和實(shí)踐進(jìn)一步發(fā)展的成果,它是智力認(rèn)知理論的集大成者。相對(duì)于第三版,它不單純是材料和被試的更新,它拓展了新量表,并增加了分測驗(yàn)。此外,第四版除了提供總智商之外,還提供了一個(gè)評(píng)判兒童認(rèn)證特征更全面的四個(gè)指標(biāo)言語理解、知覺推理、工作記憶和加工速度。從而,WLSCIV為更加全面、深刻了解學(xué)習(xí)困難兒童的認(rèn)知特征提供了新視角。本研究為了深入了解不同類型學(xué)習(xí)困難兒童的認(rèn)知過程,揭示學(xué)習(xí)困難兒童產(chǎn)生的根源,為其提供適當(dāng)?shù)慕逃深A(yù),運(yùn)用靜進(jìn)等人編制的學(xué)習(xí)困難兒童篩查量表,篩選出三種不同類型的學(xué)習(xí)困難兒童言語型學(xué)習(xí)困難兒童、非言語型學(xué)習(xí)困難兒童、綜合型學(xué)習(xí)困難兒童,然后借助韋氏兒童智力量表第四版,對(duì)學(xué)習(xí)困難兒童的智力和內(nèi)部認(rèn)知特征進(jìn)行了研究。研究結(jié)果表明學(xué)習(xí)困難兒童的總智商處于正常水平,但是顯著低于普通兒童。他們四項(xiàng)認(rèn)知分測驗(yàn)得分與普通兒童相比,除言語理解與普通兒童無差異之外,知覺推理、工作記憶和加工速度都顯著低于正常兒童。通過學(xué)習(xí)困難兒童與普通兒童及其不同類型學(xué)習(xí)困難兒童之間的比較發(fā)現(xiàn),學(xué)習(xí)困難兒童的工作記憶這方面的認(rèn)知缺失最嚴(yán)重,并且這是三類兒童共有的特征。此外,三類兒童也存在加工速度和知覺推理方面的缺失,但是言語理解得分言語型學(xué)習(xí)困難組和非言語型困難組兩者之間及其兩者與普通兒童均沒有差異,而綜合型困難兒童則在韋氏智力各分測驗(yàn)上均不及普通兒童。
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簡介:華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文輕度認(rèn)知障礙患者的APOE基因多態(tài)性與他汀類藥物治療研究姓名葉妮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師彭海20040401華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院碩士畢業(yè)論文第3頁前言隨著科學(xué)技術(shù)和社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,我國人口預(yù)期壽命不斷增長,老年人在人群中所占的比例迅速上升,老年病的防治日益緊迫,特別是阿爾茨海默病ALZHEIMERDISEASE,AD這一嚴(yán)重危害老年人健康的疾病,已成為二十一世紀(jì)全球性研究的熱點(diǎn)。AD是老年人的常見病之一,主要表現(xiàn)為記憶力減退及識(shí)別能力障礙等,是一種漸進(jìn)性的神經(jīng)功能退化性失調(diào)。有資料表明,我國60歲以上人口1998年已達(dá)12億,75歲以上的老人有2000萬。并以年均32%的速度遞增,大大高于人口增長速度,本世紀(jì)中葉老齡人口可達(dá)4億左右,將成為世界上老齡人口最多的國家。我國現(xiàn)有AD患者大約為300多萬。目前對(duì)AD的發(fā)病機(jī)制還不十分清楚,要從根本上預(yù)防它還不太現(xiàn)實(shí),并且中晚期AD的治療效果不佳。輕度認(rèn)知障礙MILDCOGNITIVEIMPAIRMENT,MCI是特指僅有輕度記憶或認(rèn)知損害、但無癡呆的老年人,其病因不能由已知的醫(yī)學(xué)或神經(jīng)精神病狀況解釋。目前普遍認(rèn)為MCI是介于年齡相關(guān)性記憶損害AGEASSOCIATEDMEMORYIMPAIRMENT,AAMI和老年性癡呆主要指AD之間的一種綜合征。MCI的患病率在老年人中約占3%左右。MCI患者進(jìn)展為AD主要指散發(fā)性AD的年轉(zhuǎn)化率是同齡認(rèn)知功能正常老年人的LO倍12,RITCHIE等‘31研究認(rèn)為MCI患者中10%~15%在初次診斷1年內(nèi),23%在2年內(nèi),34%在3年內(nèi),50%在4年內(nèi)進(jìn)展為AD。所以也有人認(rèn)為MCI就是臨床前的AD,最新報(bào)道認(rèn)為它代表AD的極早期階段141。因?yàn)锳D不可逆轉(zhuǎn),而MCI患者通過早期干預(yù)可延緩或阻止病情發(fā)展為AD,因此,對(duì)MCI群體進(jìn)行監(jiān)測篩查并早期進(jìn)行干預(yù)治療,從而為延緩或阻止病情發(fā)展為AD提供一個(gè)最佳治療時(shí)間窗,已成
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簡介:目的比較免疫層析法IMMUNUNOCHROMATOGRAPHICTESTICT、酶聯(lián)免疫吸附法ENZYMELINKEDIMMUNOSBENTASSAYELISA和免疫斑點(diǎn)法DLOTIMMUNOBINDINGASSAYDIBA檢測登革DVIGMIGG抗體的敏感性、特異性及其他優(yōu)缺點(diǎn)。建立疑似登革病毒感染的病原快速鑒定分型方法對(duì)廣州市區(qū)2003年仲夏一批疑似登革病毒感染患者進(jìn)行確診并從基因水平分析該流行株的可能來源。方法用ICT法、ELISA法和DIBA法同時(shí)檢測明確診斷為登革熱和流行性出血熱、瘧疾、乙腦、流感、鉤體等其他發(fā)熱患者標(biāo)本的DVIGMIGG抗體比較測試結(jié)果。用ICT法檢測2003年廣州地區(qū)早期疑似患者的DVIGMDIBA法檢測DVIGG抗體;同時(shí)用細(xì)胞培養(yǎng)病毒分離、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)限制性片段長度多態(tài)性分析REVERSETRANASEPOLYMERASECHAINREACTIONRESTRICTIONFRAGMENTLENGTHPOLYMPHISMRTPCRRFLP技術(shù)分別進(jìn)行病原的分離和鑒定;并對(duì)所分離到的毒株進(jìn)行基因克隆、測序并與國際參考株及國內(nèi)流行株相應(yīng)的序列進(jìn)行同源性分析結(jié)合患者的流行病學(xué)資料推測本次流行株的可能來源。結(jié)果用ICT法澳大利亞PANBIOLIMITED檢測登革熱患者DVIGM的陽性率為6043253DVIGG無一例陽性;檢測非登革感染發(fā)熱患者DVIGM的假陽性率為147553DVIGG無一例陽性。用ELISA法德國GMBH檢測登革熱患者DVIGM的陽性率為6603553DVIGG的陽性率為7024057;檢測非登革感染發(fā)熱患者DVIGM的假陽性率為3531253DVIGG的假陽性率為88357。用ELISA法澳大利亞PANBIOLIMITED檢測登革熱患者DVIGM的陽性率為7554053DVIGG的陽性率為4912857;檢測非登革感染發(fā)熱患者DVIGM的假陽性率為118453DVIGG無一例陽性。用DIBA法新加坡GENELABSDIAGNOSTICS檢測登革熱患者DVIGM的陽性率為8494553DVIGG的陽性率為6493757檢測非登革感染發(fā)2003年廣州地區(qū)登革病毒感染快速診斷及可能來源分析摘要熱患者DV一IGM的假陽性率為4701653DV一IGG無一例陽性。2003年廣州地區(qū)疑似發(fā)病患者發(fā)病5天內(nèi)血標(biāo)本DV一工GM抗體陽性率為5651323DV一IGG抗體陽性率為2一7523;發(fā)病5一10天血標(biāo)本DV一IGM抗體陽性率為6671624DV一IGG抗體陽性率為7081724。從18份發(fā)病5天內(nèi)患者的血標(biāo)本中分離病毒7份GD292003廣東流行株經(jīng)間接免疫熒光檢測以及RT一PCR一RFLP和基因測序檢測證實(shí)為DVI感染;用RT一PCR檢測30份早期患者血標(biāo)本患者的陽性率為8332530其中DV一IGM一患者的陽性率為9381516DV一IGM患者的陽性率為7141014;基因序列分析分析表明GD292003廣東流行株與登革I型病毒柬埔寨流行株及我國97、99年登革I型病毒流行株的同源性最高分別為97、97、98。所有患者在發(fā)病前兩個(gè)月均在廣州市區(qū)某大院內(nèi)居住無輸血史、無外出史。結(jié)論通過比較顯示工CT法檢測DV一IGM抗體具有快速敏感、操作簡便的優(yōu)點(diǎn)可單人份操作不需要特殊設(shè)備適合在登革熱暴發(fā)流行期間用作疫區(qū)基層醫(yī)療單位的早期初篩試驗(yàn);ELISA法檢測DV一工GMIGG抗體的敏感性和特異性較強(qiáng)且檢測成本較低適合在普查及大批量標(biāo)本檢測時(shí)使用;DIBA法檢測DV一工GM抗體的敏感性較強(qiáng)容易判讀結(jié)果但操作繁瑣、成本昂貴不適合作為初篩試驗(yàn);DIBA法檢測DV一IGG抗體的敏感性和特異性高可避免敏感性不高的方法造成的漏檢與其他黃病毒屬病毒和某些蟲媒傳染病之間的非特異性反應(yīng)很少可排除干擾因素影響適合在登革熱散發(fā)期間使用可作為登革病毒感染的確證實(shí)驗(yàn)。利用RT一PCR一RFLP技術(shù)對(duì)登革病毒進(jìn)行分型具有敏感、特異、快速的優(yōu)點(diǎn)與DV抗體檢測結(jié)合起來應(yīng)用可有效縮短疑似DV感染的確診時(shí)間、降低檢測成本具有很好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。2003年廣州登革熱流行為登革I型病毒感染所致推測廣東可能存在登革工型病毒的疫源地。關(guān)鍵詞登革病毒;免疫層析法;逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)一限制性片段長度多態(tài)性分析
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簡介:目的構(gòu)建三株含有HFGF2、HVEGF165、HVEGF121基因的非復(fù)制型重組腺病毒以期用于皮瓣血運(yùn)障礙的基因治療方法以ADEASY系統(tǒng)為基礎(chǔ)利用原核細(xì)胞的同源重組機(jī)制構(gòu)建非復(fù)制型重組腺病毒首先設(shè)計(jì)引物通過RTPCR從HEP2細(xì)胞喉鱗癌細(xì)胞的總MRNA中擴(kuò)增得到三個(gè)目的基因的CDNA分別將其重組到克隆載體PGEMTEASY中經(jīng)測序證實(shí)后進(jìn)一步重組到穿梭質(zhì)粒PSHUTTLECMV上獲得分別含有三種不同目的基因的重組穿梭質(zhì)粒用PMEI酶切線性化重組穿梭質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)化含腺病毒骨架質(zhì)粒PADEASY1的ECOLIBJ5183P的感受態(tài)細(xì)胞完成同源重組取陽性克隆、小提質(zhì)粒再分別轉(zhuǎn)化ECOLIDH10B感受態(tài)細(xì)胞獲得可產(chǎn)生高拷貝質(zhì)粒的ECOLIDH10B菌株采用限制性內(nèi)切酶分析、測序等方法對(duì)三種重組腺病毒質(zhì)粒進(jìn)行鑒定最后將重組腺病毒質(zhì)粒用PACI酶切獲得重組腺病毒DNA分子用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染293包裝細(xì)胞得到三種重組腺病毒并以PCR和RTPCR法進(jìn)行進(jìn)一步鑒定結(jié)論獲得HFGF2、HVEGF165、HVEGF121三種基因的CDNA和三株含有HFGF2、HVEGF165、HVEGF121基因的重組腺病毒并經(jīng)鑒定為皮瓣血運(yùn)障礙的基因治療研究奠定了基礎(chǔ)
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簡介:第一部分抗乙型肝炎病毒S基因的小干擾RNA靶位點(diǎn)篩選體系的建立目的針對(duì)乙型肝炎病毒S基因HEPATITISBVIRUSSGENE,HBS序列制備兩種小干擾RNASMALLINTERFERINGRNA,SIRNA,載體法構(gòu)建3個(gè)小發(fā)夾RNASHTHAIRPINRNA,SHRNA表達(dá)載體和化學(xué)合成法制備一個(gè)SIRNA分子,同時(shí)構(gòu)建增強(qiáng)型綠色熒光蛋白EGFP和HBS基因融合表達(dá)載體,共轉(zhuǎn)染人宮頸癌HELA細(xì)胞,在MRNA水平和蛋白質(zhì)水平檢測兩種SIRNA對(duì)HBS基因表達(dá)的抑制作用,篩選出最有效抑制HBS的SIRNA作用靶位點(diǎn)。方法抽提HEPG2215細(xì)胞基因組,用PCR法獲取HBS基因片段,克隆在增強(qiáng)型綠色熒光蛋白表達(dá)載體PEGFPN3上,構(gòu)建成PHBSEGFP融合蛋白表達(dá)載體;利用PSIRNAHHLNEO質(zhì)粒,構(gòu)建針對(duì)HBS基因的SHRNA表達(dá)載體PSIRNA1、PSIRNA2、PSIRNA3;化學(xué)合成小干擾RNASIRNAHBS,共轉(zhuǎn)染HELA細(xì)胞,用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和熒光定量PCR儀檢測SIRNA對(duì)HBS基因MRNA表達(dá)的抑制作用,用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測SHRNA對(duì)融合蛋白表達(dá)的抑制作用。結(jié)果成功構(gòu)建SHRNA表達(dá)載體和PHBSEGFP表達(dá)載體,SHRNA表達(dá)載體和化學(xué)合成的SIRNA均可不同程度地抑制HBS基因的表達(dá),其中載體PSIRNA1對(duì)HBS基因的抑制作用最強(qiáng),對(duì)HBSMRNA抑制率達(dá)7877%,對(duì)融合蛋白HBSEGFP的抑制率為6194%;化學(xué)合成的SIRNA在50NM時(shí)抑制作用最大,對(duì)HBSMRNA抑制率達(dá)6130%,對(duì)融合蛋白HBSEGFP的抑制率為4873%。結(jié)論篩選出抑制HBS基因作用最強(qiáng)的的SIRNA靶位點(diǎn),位于AYW亞型HBV基因組161NT~181NT,成功地建立了一個(gè)行之有效、相對(duì)經(jīng)濟(jì)簡便且便于長期研究的RNA干擾研究體系,為以后的抗HBV治療和RNA干擾相關(guān)技術(shù)的實(shí)驗(yàn)研究打下基礎(chǔ)。第二部分抗乙型肝炎病毒X基因的小干擾RNA靶位點(diǎn)篩選體系的建立目的針對(duì)乙型肝炎病毒X基因HEPATITISBVIRUSXGENE,HBX序列制備兩種SIRNA,載體法構(gòu)建3個(gè)SHRNA表達(dá)載體和化學(xué)合成法制備一個(gè)SIRNA分子,同時(shí)構(gòu)建HBX表達(dá)載體PHBX,共轉(zhuǎn)染人宮頸癌HELA細(xì)胞,在MRNA水平和蛋白質(zhì)水平檢測兩種SIRNA對(duì)X基因表達(dá)的抑制作用,篩選出最有效抑制該基因的靶位點(diǎn)。方法抽提HEPG2215細(xì)胞基因組,用PCR法獲取HBX基因片段,克隆在真核表達(dá)載體PCDNA3上,構(gòu)建成PHBX表達(dá)載體;利用PSIRNAHH1NEO質(zhì)粒,構(gòu)建針對(duì)HBX基因的SHRNA表達(dá)載體PSIRNA4、PSIRNA5、PSIRNA6,化學(xué)合成小干擾RNASIRNAHBX,共轉(zhuǎn)染HELA細(xì)胞,用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和熒光定量PCR儀檢測SIRNA對(duì)HBX基因MRNA表達(dá)的抑制作用,用免疫印跡法WESTERNBLOT檢測SIRNA對(duì)HBX蛋白表達(dá)的抑制作用。結(jié)果成功構(gòu)建SHRNA表達(dá)載體和PHBX表達(dá)載體,SHRNA表達(dá)載體和化學(xué)合成的SIRNA均可不同程度地抑制HBX基因的表達(dá),其中SHRNA載體PSIRNA4對(duì)HBX基因的抑制作用最強(qiáng),對(duì)HBXMRNA抑制率達(dá)8027%,對(duì)HBX蛋白的抑制率為6559%;化學(xué)合成的SIRNA在50NM時(shí)抑制作用最大,對(duì)HBXMRNA抑制率達(dá)5638%,對(duì)HBX蛋白的抑制率為5653%。結(jié)論篩選出抑制作用最強(qiáng)的HBX基因的SIRNA靶位點(diǎn),位于AYW亞型HBV基因組1764NT~1784NT,載體法和化學(xué)合成法SIRNA都能有效封閉HBX基因的表達(dá),這對(duì)控制HBV感染和預(yù)防HBV相關(guān)性肝細(xì)胞癌的發(fā)生都有十分重大的意義。第三部分SHRNA在HEPG2215細(xì)胞內(nèi)的抗HBV活性目的RNAI技術(shù)可以在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平顯著抑制HBS基因和HBX基因的表達(dá),如果在HBV整體的復(fù)制水平上也能夠起到明顯的抑制作用,則該技術(shù)在治療HBV感染和防治HBV相關(guān)性肝細(xì)胞癌方面將有更廣闊的應(yīng)用的前景。方法HEPG2215細(xì)胞系是由頭尾相接的HBVAYW亞型基因組轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞系HEPG2而建立的一株能穩(wěn)定分泌HBV各種抗原和完整病毒顆粒的細(xì)胞系。因而用HEPG2215細(xì)胞進(jìn)行RNA干擾的抗病毒研究更接近于疾病的治療過程。因此,把上述兩部份篩選的載體法SIRNAPSIRNA1和PSIRNA4分別轉(zhuǎn)染HEPG2215細(xì)胞,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測定培養(yǎng)上清中HBVDNA水平的變化,用酶聯(lián)免疫吸附法ELISA檢測培養(yǎng)上清中HBSAG、HBEAG的變化。結(jié)果初步結(jié)果表明,通過內(nèi)源性傳遞產(chǎn)生的SIRNA能夠明顯地抑制HEPG2215細(xì)胞HBV的復(fù)制。PSIRNA1能抑制HEPG2215細(xì)胞培養(yǎng)上清68%的HBSAG和254%的HBEAG,對(duì)培養(yǎng)上清中HBVDNA的抑制率達(dá)527%。而PSIRNA4能抑制HEPG2215細(xì)胞培養(yǎng)上清79%的HBSAG和887%的HBEAG,對(duì)培養(yǎng)上清中HBVDNA的抑制率達(dá)883%。結(jié)論結(jié)果說明,SHRNA表達(dá)載體PSIRNA4在HEPG2215細(xì)胞內(nèi)顯示顯著的抗病毒能力,是RNA干擾作用于HBV基因組的一個(gè)較為理想的靶位點(diǎn)。RNAI技術(shù)在HBV感染和HBV相關(guān)性疾病的基因治療中具有良好的應(yīng)用前景。
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簡介:目的SPISUBCLINICALHUMANPAPILLOMAVIRUSINFECTIONSPI是HPV感染的主要表現(xiàn)形式其轉(zhuǎn)歸涉及到CACONDYLOMAACUMINATACA的發(fā)生及復(fù)發(fā)、CA的流行病學(xué)和相關(guān)惡性腫瘤的發(fā)生等目前缺乏SPI轉(zhuǎn)歸機(jī)制的研究資料。為進(jìn)一步探討SPI轉(zhuǎn)歸機(jī)制本課題擬從SPI患者的HPV感染類型和宿主局部細(xì)胞免疫功能等不同方面分別研究其與SPI轉(zhuǎn)歸的關(guān)系為臨床上HPV感染的預(yù)防、治療及監(jiān)測提供新的思路。方法對(duì)通過臨床、醋酸白試驗(yàn)、組織病理檢查和HPVDNA檢測而確診的62例SPI患者進(jìn)行1所有患者隨訪8個(gè)月每月觀察1次以臨床表現(xiàn)和醋酸白試驗(yàn)判定SPI三種轉(zhuǎn)歸結(jié)局發(fā)展為典型CA、SPI持續(xù)存在、SPI消失依次分為A組、B組、C組2采用PCR反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)檢測62例SPI患者感染的HPV類型分析HPV類型與SPI三種轉(zhuǎn)歸結(jié)局的關(guān)系3應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測皮損組織和正常對(duì)照組織的T細(xì)胞亞群CD4、CD8、CD4CD8的百分比分析局部細(xì)胞免疫功能與SPI三種轉(zhuǎn)歸結(jié)局的相關(guān)性。結(jié)果1、80例SPI患者經(jīng)過8個(gè)月的隨訪完成觀察者62例失訪18例。62例SPI患者中發(fā)展為典型CA者20例占3226%SPI持續(xù)存在者31例占5000SPI消失者11例占177。2、62例SPI患者中HPVDNA亞型陽性者為62例檢出各種HPVDNA亞型合計(jì)22種。陽性亞型主要為HPV6、11、16、18、42、43、58、59亞型其中單一型別感染者45例7258多重型別感染者者17例2742低危組感染者38例6129高危組感染者24例3871。A組與B組中單一感染者與多重型別感染者比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005A組與B組中低危組與高危組感染者相比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。3、62例患者局部CD4細(xì)胞為4458±1579、CD4CD8比值為130±032正常組織局部CD4細(xì)胞1724±750CD4CD8比值為199±069。SPI組局部CD4細(xì)胞、CD4CD8比值均較正常包皮組織下降差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005C組CD4細(xì)胞為5682±1225、CD8細(xì)胞為3375±1083、CD4CD8比值為153±033分別與A、B兩組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0055、低危組中CD4細(xì)胞為5272±1824CD8細(xì)胞為3528±1231CD4CD8為141±078高危組CD4細(xì)胞為3833±1056CD8細(xì)胞為3607±962CD4CD8127±068。兩者相比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。結(jié)論1、性傳播疾病的高危人群中SPI的發(fā)生率較高提倡臨床重視醋酸白實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用。加強(qiáng)對(duì)高危人群的宣教。2、HPV型別、HPV型別的混合或單一感染均與SPI轉(zhuǎn)歸具有相關(guān)性。3、SPI患者存在局部細(xì)胞免疫功能降低局部細(xì)胞免疫功能的強(qiáng)弱是決定SPI臨床癥狀及其轉(zhuǎn)歸的一個(gè)重要因素臨床加強(qiáng)局部細(xì)胞免疫功能的治療有利于減少疾病的惡性轉(zhuǎn)歸。4、SPI患者局部細(xì)胞免疫功能的下降與感染的HPV型別有關(guān)。5、臨床上通過檢測HPV型別以及局部細(xì)胞免疫功能水平對(duì)SPI預(yù)后的評(píng)估、監(jiān)測具有一定的價(jià)值有利于指導(dǎo)臨床治療。
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簡介:重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文ERPMMN在輕度認(rèn)知障礙的診斷、分型和預(yù)后中的價(jià)值研究姓名程啟慧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師王永紅20080501重慶醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得重慶醫(yī)科大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料,與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處,本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。學(xué)位論文作者簽名車望盔乳日期勁子SIR乙學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解重慶醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定,印研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬重慶醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后,發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱學(xué)??梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外,可以采用影印、縮印或其他手段保存論文論文作者簽名室壘基指導(dǎo)教師簽名重墨曼芻日期2竺量』12
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簡介:西安電子科技大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性或創(chuàng)新性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝中所羅列的內(nèi)容以外,論文中不包含其它人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果;也不包含為獲得西安電子科技大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處,本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。本人簽名日期西安電子科技大學(xué)關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解西安電子科技大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定,即研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬西安電子科技大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后,發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位仍然為西安電子科技大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件,允許查閱和借閱論文;學(xué)??梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容,可以允許采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存論文。保密的論文在解密后遵守此規(guī)定本學(xué)位論文屬于公開,在一年解密后適用本授權(quán)書。本人簽名導(dǎo)師簽名輜日期日期釜圣I監(jiān)ABSTRACTMILDCOGNITIVEIMPAIRMENTISACRITICALSTATEBETWEENNORMALAGINGANDDEMENTIAINDIVIDUALSINTHISSTATEHAVEMEMORYIMPAIRMENTOROTHERMILDCOGNITIVEDYSFUNCTIONBUTPATIENTS’ACTIVITIESOFDAILYLIVINGARESTILLRETAINEDRESEARCHESHAVEBEINGENGAGEDINCLINICALANDFOUNDATIONALRESEARCHINASPECTOFANATOMICALNEUROLOGICALANDIMAGEONMILDCOGNITIVEIMPAIRMENTANDHAVESOMEUNDERSTANDINGOFITSPATHOPHYSIOLOGICALMECHANISMS,BUTTHEREARESTILLMANYAREASFORINDEPTHSTUDYTHISPAPERFOCUSESONTHEAPPLICATIONOFBRAINRESEARCHOFTMRI,ANDUSESRESTINGSTATETMRIBRAINIMAGEANALYSISMETHODSSUCHASAMPLITUDEOFLOWFREQUENCYFLUCTUATIONSALFF,F(xiàn)RACTIONALAMPLITUDEOFLOWFREQUENCYFLUCTUATIONSFALFFANDFUNCTIONALCONNECTIVITYFCTOTHEABNORMALBRAINFUNCTIONALRESEARCHONAMNESTICMILDCOGNITIVEIMPAIRMENTAMCIPATIENTSTHEMAINCONTENTSOFTHISPAPERAREASFOLLOWS1AMPLITUDEOFLOWFREQUENCYFLUCTUATIONATDIFFERENTFREQUENCYBANDSINEARLYAMNESTICMILDCOGNITIVEIMPAIRMENTEMCI;2CHANGESINBILATERALTHALAMUSCONNECTIVITYINTHEEARLYANDLATESTAGESOFAMNESTICMILDCOGNITIVEIMPAIRMENTEMCI/LMCITHERESULTSSHOWTHATTHEREAREWIDESPREADDIFFERENCEINALFF/FALFFBETWEENTWOFREQUENCYBANDSSLOW400270073HZ;SLOW50010027HZASFOREMCIPATIENTSCOMPARETONORMALCONTROLSMEAWHILE,THISPAPERALSOFINDSTHATIMPAIRMENTANDCOMPENSATIONOFTHALAMUSCONNECTIVITYCOEXISTINTHEEMCI/LMCIPATIENTSANDTHELEFT/RIGHTTHALAMUSSHOWEDDIFFERENTCONNECTIVITYPATTERNSWITHOTHERBRAINREGIONSKEYWORDSRESTINGSTATETMRIAMNESTICMILDCOGNITIVEIMPAIRMENTAMPLITUDEOFLOWFREQUENCYFLUCTUATIONSFUNCTIONALCONNECTIVITY
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簡介:本文對(duì)福多的心理模塊論及其認(rèn)知哲學(xué)思想進(jìn)行了探討。文章認(rèn)為,在福多的認(rèn)知哲學(xué)思想部分中,心腦關(guān)系是認(rèn)知本質(zhì)的理論基礎(chǔ),這種心腦關(guān)系是建立在符號(hào)同一論的觀點(diǎn)之上的。符號(hào)同一論用功能關(guān)系不是用特殊的物質(zhì)載體來解釋心理狀態(tài),因此在認(rèn)知哲學(xué)中又被稱為功能主義。功能主義開辟了一條從功能的角度去研究人類的思維過程,借助計(jì)算機(jī)來解釋認(rèn)知的道路。福多哲學(xué)觀中的認(rèn)知本質(zhì)實(shí)際上就是一種認(rèn)知主義,是福多為認(rèn)知主義奠定了理論框架計(jì)算理論和表征理論。計(jì)算理論和表征理論的重要意義在于說明對(duì)人類心理活動(dòng)的解釋不再是純粹思辨式的研究,而是一種可以用計(jì)算機(jī)的程序加以模擬、刻畫的過程。最后,福多從中樞加工的整體特性中得出了中樞加工不適宜作為科學(xué)研究對(duì)象的結(jié)論。
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